独活杀灭鱼类指环虫活性成分研究论文

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1、四川农业大学硕士毕业论文摘要鱼类指环虫病是一种鱼类养殖中最常见寄生虫病害之一，流行于春末夏初。此病流行广、传播快、危害大，且其发病率和危害性正在逐年增长。国内外对于此病的防治主要是移植人药、兽药和部分农药等化学药物，但长期使用，会造成环境污染、药物残留、耐药性等一系列问题。因此，需寻找新的对环境无污染、易降解的天然植物杀虫药，以及从天然植物中分离杀虫活性成分，进而进行仿生合成，更符合人类对健康的要求。同时，也有利于植物资源的合理利用和开发。1．本研究以此为出发点开展了杀虫活性植物筛选、活性部位筛选

2、、杀虫活性成分跟踪分离、鉴定。在20种植物中，对指环虫的最高杀灭率依次为：独活为100％；除虫菊为90％：远志、了哥王、苦树皮为80％；走马芹、半边莲、吐根、委陵菜为50％；南天竺、延胡索、藜芦、断肠草、白屈菜、血水草为20％'--'30％；在1000mg．L‘1范围内，八角枫、山麻柳、千里光、水黄连、瓜蒌没有明显杀虫活性。最佳杀虫浓度从低到高依次为：了哥王为30mg．L一；独活为120mg．L～；白屈菜为150mg．L～；走马芹为200mg．L一；除虫菊为240mg．L～；远志为350mg．L一

3、；藜芦为400mg．L～；苦树皮为500mg．L一；延胡索为600mg．L一；南天竺为700mg．L-1；血水草、断肠草、半边莲、吐根为800mg．L～。在测试浓度范围内，能够导致试验金鱼在48h死亡的如表2．2所示，其中山麻柳；瓜萎、断肠草、半边莲、吐根、委陵菜在1000mg．L以时，试验金鱼仍然未见有死亡现象。2．独活杀灭指环虫活性部位的研究：分别采用4种极性不同的溶剂对独活进行提取，并测定不同溶剂提取物的杀指环虫活性。结果显示：乙醇提取物的最佳杀虫浓度为120mg．L。1(按生药计)，杀虫率

4、为100％；丙酮提取物最佳杀虫浓度为70mg．L。(按生药计)，但最高杀虫率为72．O％；乙酸乙酯提取物的最佳杀虫浓度为300mg．L’1(按生药计)，最高杀虫率只有64．8％；而石油醚提取物的最佳杀虫浓度为100mg．L。1(按生药计)，最高杀虫率仅为49．1％。3．独活中杀灭指环虫活性成分的跟踪分离与结构鉴定：根据2可知乙醇提取物对指环虫具有杀灭效果。采用硅胶柱层析法，以石油醚．乙酸乙酯(40：1、30：1、20：1、10：1、5：1、2：1、1：1、O：1)，乙酸乙酯．甲醇(100：l、50

5、：1、20：1、10：1、5：1、3：l、2：1、1：1、O：1和水洗柱)作为洗脱系统，进行梯度洗脱，TLC检测，得到16个流分组A～P，经药效测定F流分和K流分组具有杀虫活性，且F流分为结晶体，TLC检测为单点。以氯仿．甲醇(50-l，25-1，10-1，9：1，8：1，7：l，5：1，3：l，2：1，i四川农业大学硕士毕业论文1：1，甲醇和水洗柱)作为洗脱系统，对K流分组进行硅胶柱层析分离，得到11个流分组Kl～Kll，经药效测定Kl流分组具有杀虫活性。以石油醚一乙酸乙酯(1：0、50：1、2

6、0：1、10：1、5：1、2：1、1：1、0：1、甲醇)作为洗脱系统，对Kl流分进行硅胶柱层析分离，得到6个流分组K1．1"--Kl-6，其中经药效测定K1．1和K1．2具有杀虫活性，且K1．1为油性成分。以石油醚一氯仿(6：4、6：5、6：6、6：7、氯仿)作为洗脱系统，对K1．2进行梯度洗脱，得到4个流分组K1．2．1"--Kl-2．4，其中K1．2．3具有杀虫活性，且为结晶物质，TLC检测为单点。F和K1．2．3的活性测定结果显示，F48h的100％杀指环虫浓度为1．6mg．L一；K1．2．

7、348h在浓度为5mg．L以时，对指环虫的杀灭率为74．4％；Kl-i48h在浓度为20mg．L以时，对指环虫的杀灭率为51．9％。通过对活性化合物进行熔点测定，并结合质谱(EI．MS)、红外光谱(IR)、质子核磁共振谱(1H-NMR)、核磁共振碳谱(13C-N凇)、高效液相(HPLC)、气质联用(GC．MS)等对其结构进行鉴定。F鉴定为蛇床子素(C15H1604)，K1．2．3鉴定为东莨菪内酯(C10H804)，K1．1鉴定为油性成分。关键词：独活；指环虫；活性成分四川农业大学硕士毕业论文Stu

8、diesonactivecomponentsfromRadixAngelicaePubescentisagainstfishDactylogyrusABSTRACTDactylogyriasisisoneoftheseriousparasitosisinaquaculture．Itcalloccurinmostofprovinceofournation，anditsharmisbecomingmoreandmorestrongly．Atpresent，medicationisthe