洋金花杀灭鱼类指环虫的活性成分研究

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1、V}1132947分类号：S!!：j!!!UDC：582．：／．9密级：公开学校代羁：10r12研究生学号：SY29040390西北农林鬻捉大学2007届攻读硕士学位研究生学位(毕业)论文洋金花杀灭鱼类指环虫的活性成分研究研究生墨熬亟一指导教’J币—王壹堂基!熬篮完成时间2007．6中国陕西杨凌中文摘要洋金花杀灭鱼类指环虫的活性成分研究摘要鱼类体外寄生指环虫病是危害水产养殖最为严重的寄生虫病害之一。当前，国内外防治主要以化学药物为主，长期使用导致指环虫的抗药性与日俱增，用药量增大，治疗效果下降，成

2、本提高，甚至还产生致畸、致突变等副作用。因此，开发能替代现有药品的无公害、环保型天然植物源杀虫药，以及从天然植物中分离杀虫活性成分，进而进行仿生合成是今后研究的方向和热点。本研究正是以此为出发点开展了活性植物筛选、成分预试、杀虫活性成分的跟踪分离、光谱分析等工作，并取得了以下结果：1．具有杀虫活性植物的筛选：通过药效试验，检测了15种天然植物乙醇提取物对寄生于金鱼的中型指环虫的杀灭活性。试验结果表明：48h内，洋金花、蛇床、鸦胆子、槟榔、云南重楼、木通、牛心朴子、吴茱萸和夹竹桃的最高杀虫率均达70

3、％以上，其中洋金花、蛇床和鸦胆子的最高杀灭率达到100％，并且这几种植物对试验鱼安全性较高；另外，牵牛子、青蒿对指环虫有一定杀灭作用，不仅杀虫浓度高，杀虫率也较低，分别为55％、30％。综合15种植物的杀虫试验效果、药物毒性以及实验操作的实际情况，再结合陕西当地资源情况，选择洋金花作为研究对象。2．洋金花化学成分预试与杀虫活性部位筛选：采用试管法对洋金花化学成分进行预试。结果显示：洋金花以生物碱成分为主，提取物呈弱碱性：用石油醚、氯仿、丙酮、乙酸乙酯、乙醇、蒸馏水六种溶剂对洋金花进行部位提取，采用

4、药效试验观察各部位提取物的杀虫活性，结果表明：洋金花的杀虫活性部位为氯仿提取物浓度为200mg．L。(按生药计)。乙醇提取物和乙酸乙酯提取物也有一定的杀虫作用，杀虫最佳浓度分别为400mg．L’I、250mg．L。(按生药计)时，最高杀灭率达85％以上，且金鱼的中毒率较低；石油醚提取物、丙酮提取物和蒸馏水提取物在试验浓度范围内几乎不具备杀虫作用。所以洋金花的氯仿提取物杀虫活性是洋金花主要杀虫活性部位。3．洋金花杀虫活性成分的追踪分离与结构鉴定：采用三级硅胶柱层析法，一级柱以氯仿：甲醇为溶剂系统梯度

5、洗脱，对洋金花的氯仿提取物进行分离，得到A—F等6段混合物，药效试验发现，C段混合物具有较强的杀虫活性，48h内平均杀灭率为95％。二级柱合并C段化合物以石浊醚：乙酸乙酯为溶剂系统进行柱层柝分离纯化，得到C1--C7段混合物，药效试验发现，C6段混合物具有突出的杀虫活性，48h内的平均杀灭率大于95％。三级柱合并c5、c6和c7段化合物，以石油醚：乙酸乙酯的比例为1．5：1恒定极性洗脱系统对C6段进行分离，得到三种化合物I、II和Ⅲ，药效试验发现，化合物1148h内的平均杀灭率为100％，杀虫效果

6、明显优于化合物I和IⅡ。对化合物II进行紫外光谱，气质联用色谱分析．结合杨炳友论文EI—MS图谱。推测该化合物可能为Ⅱ中文摘要醉茄内酯类化合物中的一种物质。关键词：指环虫；天然植物提取物；洋金花；醉茄内酯类化合物；杀虫活性英文摘要IIISTUDY0NDACTYLOGYRUS—KILLEDACTlVECOMPOUNDSFROMDATURA酗ETEL、-．ABSTRACTDactylogyriasisisoneoftheseriousverminosisinaquaculture．Atpresent,

7、preventionandcureofDactylogyriasistakemainlyadvantageofchemicalathomeandabroad．butlong-termusingofchemicalleadDactylogyrustogrowresistancetodrugsdaybyday,dosageofdrugsincreasing，remedialeffectdecreasing，costaddmg,everitmaybebringsomeside·effect,suchas

8、causingmonstrosity、CallceTandbreakandsooil．Therefore，thedominantdirectionandhotspotinthefuturearetodevelopnaturaldnlgoflowtoxicity、unresidualandunresistance，toisolateactivecompoundsfromnaturalplants，tobiomimeticsynthesisofeffeetivecomponents．I