96指环虫检测方法

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1、质量管理体系文件江苏省海洋环境监测预报中心江苏省渔业生态环境监测站文件编号:XZ-096-2009作业文件第1页共9页指环虫检验实施日期:2009年04月01日1.主题含义1.1含义本方法规定了指环虫的检验方法2.分析方法2.1方法出处参照了《鱼类寄生虫学》中第三篇“鱼类寄生扁形动物”和第八章“寄生于鱼类的单殖吸虫”及《水产动物疾病学》中有关内容进行了修订2.2适用范围和应用领域适用于水产品中指环虫的检验2.3试剂及其配制——10%福尔马林——4%福尔马林2.4仪器与设备——显微镜:10×10×——解

2、剖镜:4×10×或10×10×——载玻片——盖玻片:20mm×20mm、0.17cm——培养皿:直径90mm——吸管:1mL(具0.01ml刻度)——解剖工具2.5分析步骤:2.5.1样品的收集和处理取样(参照本实验室现场采样规范),对样品先进行目检,确定病变部位,然后取鳃、皮肤、鳍等病变组织制片。2.5.2制片用剪刀或解剖刀、镊子取病症的部位,同一部位分别制成两个玻片,标上组织名称。9质量管理体系文件江苏省海洋环境监测预报中心江苏省渔业生态环境监测站文件编号:XZ-096-2009作业文件第2页共9

3、页指环虫检验实施日期:2009年04月01日2.5.3确诊优势种将制好的玻片分别于显微镜低倍镜(10×10×)下观察,只要有一片中有单种寄生虫出现80%以上,可定为寄生虫优势种。2.5.4查检索表将制好的玻片于显微镜低倍镜下观察,根据所见的优势寄生虫种,查检索表(见附A),确定是否为指环虫。2.5.5确诊指环虫病在低倍镜的视野下,指环虫在5个以上或者有一片鳃上的指环虫数量达50个以上的确定为指环虫病。2.5.6将上述结果进行进一步确认上述结果如果为阳性,不复查。为阴性的,重复2.5.2,2.5.3,2

4、.5.4步骤,与上述结果一致的,则报告阴性。9质量管理体系文件江苏省海洋环境监测预报中心江苏省渔业生态环境监测站文件编号:XZ-096-2009作业文件第3页共9页指环虫检验实施日期:2009年04月01日附A指环虫属检索表A1概说指环虫属隶属于扁形动物门、单殖吸虫纲、多钩亚纲、指环虫目、指环虫科。单殖吸虫属扁形动物吸虫纲的单殖亚纲。绝大部分是外寄生虫。典型寄生部位为鱼类的鳃,但也可以寄生在皮肤、鳍和口腔、鼻腔、膀胱等处。有极少数种属则寄生于鱼类的胃及体腔,前者如寄生于丽鱼科鱼类Etroplussur

5、atensis胃中的肠环虫,产于斯里兰卡;后者如网杯虫,寄生于鳐鱼的体腔中。单殖吸虫的寄生主要为鱼类,少数种类可寄生于甲壳纲(如寄生于虱上的后环指虫Metagyrodactylus)、头足纲、两栖类及爬行类。这类吸虫通常以其后吸器(后固着器)上的钩插入寄生部位,造成寄生部位的病变,产生不良的后果,导致病重幼鱼的死亡,或破坏器官的完整性,引起其他病原生物的入侵(如细菌),造成炎症,产生病变;或者吮吸鱼血、粘液,刺激寄生产生大量分泌物,破坏正常的生理活动。目前这类寄生虫不仅危害小鱼同时亦可影响较大的养殖鱼

6、(如小鞘指环虫对白鲢的危害),不仅淡水鱼受害,而且在海水网箱养殖中亦有相当的病例出现,并正在引起有关单位的注意,一些病例正在研究之中。就我国淡水鱼类(饲养鱼类)中的危害情况看,主要为三代虫和指环虫等引起的皮肤病和鳃病,但已有可行的防治措施来控制它们的发展。A2单殖吸虫的形态结构A2.1外部形状A2.1.1身体的大小与形状单殖吸虫身体较小,体长0.15—20毫米(个别的可达3厘米)。淡水种类大多数在0.5厘米以下,如指环虫超过1毫米者不多见。身体形状不一,有指状、尖细叶片状、椭圆、圆盘状或圆柱状等。一般

7、淡水产的种类,体型较单纯,海产的形态较为多样。A2.1.2体表的结构体表通常无棘,但有时有乳状突起,或在某些种类的体侧、背面具刺,9质量管理体系文件江苏省海洋环境监测预报中心江苏省渔业生态环境监测站文件编号:XZ-096-2009作业文件第4页共9页指环虫检验实施日期:2009年04月01日或体表有所皱褶。又有些种类在后吸器上有几丁质板所构成的鳞盘。A2.1.3固着器固着器分前固着器和后固着器。一般以后固着器为主要固着器官。前固固着器在一些种类有包围着口的口吸盘。更多的种类有头器。头器有腺体,可分泌粘

8、液。前固着器的功能一是便于虫体取食时吸着之用,二是起尺蠖状运动的作用。后吸器(后固着器)结构较为复杂,为分类上重要依据之一。结构简单的后吸器为肌质的,无几丁质结构。但大多数种类,则有不同结构的几丁质装置,大多数有下列几种类型:后吸器上主要几丁质结构为数目较多、而大小不同的锚钩和联结片。具有这种结构的种类,一般被认为在进化上较为原始一些。后固着器主要的几丁质结构为吸铗,但或多或少保留着幼虫期的锚钩,或不保留幼虫期的锚钩结构。具有这类结构的,一般被看作是在进

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