jnk和erk12f2信号通路在亚砷酸钠所致人胚肺成纤维细胞兴奋效应中的作用

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1、南京医科大学硕士学位论文APSBSADCFHDADMSOECLEGFPERKl／2FCSG418狐LFHRP胍NL心KsN匝K1／2M订N啦s02队GEPBSPMSFTBSTEⅣ匝D缩略语ammoniumpersulfatesbovineserumalbumin2’，7'-diehlorofluorescindiacetatedimathylsulfoxideenhancedchemiluminescence过硫酸铵牛血清白蛋白2’，7’一二氯乙酰乙酸盐荧光素二甲基亚砜增强化学发光enhancedgreenfluores

2、centprotein增强绿色荧光蛋白Extracellularsignal。regulated胞外信号调节激酶1／2kinasel／2fetalcalfserum胎牛血清geneticin遗传霉素humanembryolungfibroblasts人胚胎肺成纤维细胞horseradishperoxidase辣根过氧化物酶c—JunN-terminalkinasec．Jun氮端激酶mitogen-activatedproteinkinases丝裂原激活蛋白激酶mitogen。activatedproteinkinase丝

3、裂原活化蛋白激酶激酶kinase3-(4，5一dimethylthiazol一2-y1)-2，5-di噻唑蓝phenyltetrazoliumbromidesodiumarsenite亚砷酸钠polyacrylamidegelelectrophoresis聚丙烯酰胺凝胶电泳phosphatebufferedsaline磷酸盐缓冲溶液phenylmethylsulfonylfluoride苯甲基磺酰氟Tris-bufferedsalineTris．缓冲盐溶液N’，¨’，N’，N'-tetramethylethylenedi

4、N，，N，，N，，N，一四甲基乙二胺amineWesternblot蛋白印迹技术南京医科大学硕士学位论文论文独创性声明本论文』塾垒里丛!』2焦兰亟整垒垩壁堕垡毖塾厶壁韭盛红丝堑照羞查垫廛主煎笠旦是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果．论文中除了特别加以标注和致谢的地方外，不包含其他人或机构已经发表或撰写过的研究成果。其他同志对本研究的启发和所做的贡献均在论文中作了明确的声明并表示了谢意。专业：里垒圭垄作者签名：缱隧．盘日期：玉tI：五皇；论文使用授权声明本人完全了解南京医科大学有关保留、使用学位论文的规定，即

5、：学校有权保留送交论文的复印件，允许论A．gt查阅和借阅；学校可以公布论文的全部或部分内容，可以采用影印，缩印或其它复制手段保存论文。保密的论文在解密后遵守此规定．作者签名：盆赶．盘导师签名：牡喊蚴南京医科大学硕士学位论文JNK与ERKl／2信号通路在亚砷酸钠所致人胚肺成纤维细胞兴奋效应中的作用南京医科大学公共卫生学院，南京210029研究生何晓庆指导教师刘起展教授指导小组周建伟教授李爱萍助理研究员中文摘要环境化学物所致兴奋效应(双相效应)，即接触某--416学物低浓度时对机体产生刺激效应，而在高浓度时却产生抑制效应，其

6、剂量．反应关系曲线呈B型和域u型．近年，Calabrese和Baldwin等学者认为兴奋效应型剂量一反应关系是环境化学物影响机体的主要模型，而并非经典的阈值模型或无闽值线性模型．兴奋效应这一新理论的应用不仅将重新审视毒理学中心法则，而且将引起环境、医学、公共卫生等众多领域发生广泛变革．亚砷酸钠(NaAs02)是砷(舡)元素在环境中存在的主要形式，其不仅分布广泛，而且对机体的影响非常复杂，其既是人类确定致癌物又是多种肿瘤的抗癌药物，然而对其致癌作用和抗癌作用的分子机制目前仍不清楚。国内外已有研究报道不同浓度NaAs02引起

7、多种细胞增殖与凋亡的兴奋效应，即低浓度引起细胞增殖升高而凋亡降低；相反，高浓度则引起细胞增殖降低而凋亡升高，其分子机制未见研究报道．本研究拟探讨不同浓度NaAs02处理不同时问对人胚肺成纤维细胞(HELF)增殖和凋亡的影响，以建立NaAs02所致HELF细胞兴奋效应模型；并探讨JNK和ERKl／2信号通路在NaAs02所致HELF细胞兴奋效应中的作用；建立JNK缺陷细胞株，为进一步探讨JNK信号通路在NaAs02所致细胞兴奋效应中的作用提供条件．从而揭示NaAsO：所致细胞兴奋效应的部分分子机制，并为进一步理解和接受环境

8、化学物所致兴奋效应及其南京医科大学硕士学位论文应用、全面了解砷化物对细胞的影响提供一定的科学依据。方法一、NaAs02对HELF细胞增殖和凋亡的影响分别用0．0、0．1、0．5、1．0、5．0和10．0Imaol／LNaAs02处理HELF细胞3、6、12、24和48h后，分别用MTT法检测HELF细胞增殖率并口用H