《发酵分析》试验教案

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1、《发酵分析》试验教案试验一酿造用水硬度分析（2学时）一、教学目的:掌握配位滴定法分析水硬度的操作技术。二、重点与难点:学习EDTA标准溶液的标定过程；掌握指示剂铬黑T的使用条件和终点变化三、主要内容:1.原理:水硬度主要是由水中钙盐、镁盐引起的，故硬度一般指水中钙离子、镁离子的浓度。水的硬度高就是指水中钙离子、镁离子浓度高。按钙、镁成盐形式不同，水的硬度分为碳酸盐硬度（又称暂时硬度）和非碳酸盐硬度（又称永久硬度）。水的硬度表示方法有好几种，常用的表示方法是以度为单位：1L水中含有钙、镁等盐的总量相当于10mgCaO时，称为1度。按照硬度的大小，可

2、将水质分为下列几类：水质的分类 WaterQualityClass名称(Name)极软水(Verysoftwater)软水(Softwater)中等水(Moderatelyhardwater)硬水(Hardwater)极硬水(Veryhardwater)硬度(Hardness)0～4.24.2～8.48.4～16.816.8～28.0>28.0EDTA(乙二胺四乙酸)其二钠盐可与水中钙离子、镁离子生成可溶性无色配合物,指示剂铬黑T也能与钙离子、镁离子配位,生成酒红色配合物。但EDTA与钙离子、镁离子的配合物更稳定。当在水样中加入蓝色的铬黑T后，生

3、成铬黑T钙、镁配合物，而使溶液呈酒红色。再用EDTA滴定时，由于EDTA与钙离子、镁离子的配合能力强于铬黑T，故能将铬黑T钙、镁配合物中的钙离子、镁离子夺出来，进行配位，生成无色的EDTA钙、镁配合物，致使铬黑T游离出来，溶液从酒红色突变为蓝色，即为滴定终点。2.试剂：①0.01mol/L乙二胺四乙酸二钠（EDTA-Na2）标准滴定溶液：称取4gC10H14N2O8Na2·2H2O，用水加热溶解，冷却后用水定容至1000mL。a.标定:称取基准ZnO1g（准确到0.0001g），用少量水润湿，加6mol/L的HCl溶液至样品溶解，移入250mL容

4、量瓶中，用水稀释定容。移取该溶液25mL，加70mL水，用10%NH3·H2O中和pH至7-8，加10mLpH10NH4OH-NH4Cl缓冲液，加5滴1%铬黑T指示剂，用待标定的EDTA-Na2溶液滴定至溶液由紫色变为纯蓝色。同时做试剂空白试验。b.计算：c(C10H14N2O8Na2·2H2O)=m/0.08138×(V1-V2)式中：c(C10H14N2O8Na2·2H2O)：EDTA-Na2标准滴定溶液的实际浓度，mol/L；V1：滴定消耗EDTA-Na2标准滴定溶液的体积，mL；V2：空白试验消耗EDTA-Na2标准滴定溶液的体积，mL；

5、m：ZnO的质量0.08138:与1.00mLEDTA-Na2标准滴定溶液〔c(EDTA)=1.000mol/L〕相当的以克表示的氧化锌的质量。②PH10NH4OH-NH4Cl缓冲溶液：称取5.4gNH4Cl溶于水中，加35mL浓NH3·H2O，用水稀释定容至100mL。③1%铬黑T指示剂：称取1g铬黑T和1g盐酸羟胺，溶于100mL无水乙醇中。3.测定方法⑴总硬度的测定：移取50mL水样，置于250mL三角瓶中，加5mLPH10NH4OH-NH4Cl缓冲溶液和5滴1%铬黑T指示剂，用0.01mol/LEDTA-Na2标准滴定溶液滴定至蓝色。⑵永

6、久硬度的测定：移取50mL水样，置于250mL三角瓶中，煮沸10min，用滤纸过滤，滤液用250mL三角瓶接收，用水充分洗涤滤纸，使滤液接近50mL，加5mLPH10NH4OH-NH4Cl缓冲溶液和5滴1%铬黑T指示剂，用0.01mol/LEDTA-Na2标准滴定溶液滴定至蓝色。4.计算总硬度=cV1×28.04×1/50×1/10×1000永久硬度=cV2×28.04×1/50×1/10×1000暂时硬度=总硬度-永久硬度C：EDTA-Na2标准滴定溶液的实际浓度，mol/L；V1：总硬度测定时消耗EDTA-Na2标准滴定溶液的体积，mL；V2

7、：永久硬度测定时消耗EDTA-Na2标准滴定溶液的体积，mL；28.04:与1.00mLEDTA-Na2标准滴定溶液〔c(EDTA)=1.000mol/L〕相当的以克表示的氧化钙的质量，mg。5.讨论①滴定过程为什么要缓慢进行？②如果铬黑T在水样中变白色或浑浊的玫瑰色，该怎么办？是什么原因引起的？试验二Glu的制备（2学时）一、教学目的：学会由味精制备谷氨酸的方法,加深对谷氨酸发酵下游技术的认识。二、重点与难点：掌握酸碱滴定的操作步骤。三、主要内容：1.原理：谷氨酸与适量的碱发生中和反应生成L-谷氨酸一钠——味精,味精与盐酸作用生成谷氨酸。2.实

8、验材料与仪器：味精、浓HCl、烧杯、精密酸性PH试纸、纱布、玻棒、干燥箱。3.实验步骤(配50mL水中加35g味精）①在烧杯中配制味精饱