灯盏花素脂质体前体抗脑缺血再灌注损伤药效学研究

《灯盏花素脂质体前体抗脑缺血再灌注损伤药效学研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、中国医科大学硕士学位论文灯盏花素脂质体前体抗脑缺血再灌注损伤药效学研究姓名：黄粮申请学位级别：硕士专业：药理学指导教师：王怀良20090301·中文论著摘要·灯盏花素脂质体前体抗脑缺血再灌注损伤药效学研究刖声缺血再灌注(ischemiareperfusion，IR)损伤是指各种原因造成的局部组织器官的缺血缺氧，使组织细胞发生缺血性损伤，在一定条件下恢复血液再灌注后，细胞功能代谢障碍及结构破坏反而加重的现象。缺血再灌注可挽救濒临死亡的细胞，也可加重细胞损伤，导致细胞死亡。缺血性脑血管病已经成为人类致死、致残的最主要疾病之一。灯盏花素(breviscapine)是从菊科

2、短亭飞蓬属植物短亭飞蓬(ErigeronbreviscapusVant．)中提取出来的黄酮类有效成份，是灯盏乙素为主和少量甲素的混合物，其中灯盏乙素含量占95％以上。灯盏花素药理活性广泛，具有保护脑缺血区神经元，拮抗氧自由基，减轻脑水肿和炎症反应，减少脑组织缺血及再灌注损害，保护脑组织作用。但是其口服生物利用度低。临床上主要用于治疗脑梗死、冠心病、心绞痛等。脂质体是一种定向药物载体，属于靶向给药系统的一种新剂型，具有增加药物溶解度、增强药物的靶向性及降低毒性等优点。脂质体前体是指经喷雾干燥、冻干后以固态形式存在的脂质体分散系，在临用前加入分散介质即可再分散形成脂质体

3、。采用脂质体技术制备的灯盏花素脂质体前体可以显著提高其口服生物利用度，有可能提高疗效。本研究拟观察灯盏花素脂质体前体对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用，并对灯盏花素脂质体前体进行安全性评价。实验方法1．SD大鼠脑缺血再灌注模型制备和神经评分参照Longa线栓法制作大脑中动脉阻塞再灌注动物模型，大鼠清醒之后按Longa4分法进行神经功能评分，1．3分作为缺血再灌注成功样本入选。2．脑组织TTC染色再灌注后4h断头取脑，全脑冠状切成5片，37。C水浴TTC染色，多聚甲醛固定，拍照。3．用专业图像分析软件ipp6．0计算脑梗死面积4．脑含水量测定按干湿重法，脑组织含水量(％

4、)=(脑湿重一脑干重)／脑湿重x100％。5．采用线栓法制备大鼠下腔静脉血栓模型水合氯醛麻醉大鼠，开腹分离下腔静脉，与左肾静脉下方结扎下腔静脉。6．采用FeCl3建立大鼠颈总动脉血栓模型’水合氯醛麻醉大鼠，分离右侧颈总动脉2cm，将吸有20ulFeCl3溶液的小片滤纸敷于颈总动脉上30min。7．采用毛细管法测定小鼠凝血时间8．急性毒性实验首先进行LD50测定实验。但是LD50无法测出，接下来进行最大给药量实验。9．统计学处理所有数据以平均值士标准差表示，采用单因素方差分析对组间差异进行统计学分析，P

5、模型组比较，PS剂量依赖性降低缺血再灌注后脑组织梗死面积，从模型组0．239士0．051分别降至O．141+0．036，和0．113+0．029(尸

6、．34士18．06分别降至23．92土20．09和7．4616．20(尸<0．01)；干重从模型组8．42_4：5．85分别降至7．49士6．30和2．74士1．82(P<0．01)。PS中剂量组与Bre组比较没有显著性差异。4．大鼠颈动脉血栓溶栓实验结果与模型组比较，PS能剂量依赖性降低血栓重量，从模型组3．00士1．43，分别降至2．38士1．05和1．89士0．86(P

7、与Bre组比较，PS中剂量显著延长了凝血时间(PS中剂量115．8士18．6，n=20倦Bre93．5士18．1，n=20P<0．01)。6．急性毒性实验结果LDso测定预试实验中PS高剂量组(18000mg／kg)，PS中剂量组(9000mg／kg)，PS低剂量组(4500mg／kg)小鼠均没有出现死亡，LDso未能测出。在随后最大给药量实验中，按18000mg／kg剂量一天灌胃两次(相当于临床剂量2000倍)，14天内小鼠行为无异常，没有死亡，给药后14天进行大体解剖未见内脏器官异常。结论灯盏花素脂质体前体(PS)能显著降低大鼠脑组织梗死面积，剂量依赖性的降