新型肽类生长调节物质——植物磺肽素psk的研究

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1、河南农监大学学位谂文独裁性声骥、霞用授权及絮识产蔽舞满承诺褰学位论植物新型生长调节物质植物磺膝素(psK)学位硕：b文题藉静磺究缀剐学学生秘艳会辩{睾镪遗传育稀导疼陈新邃教授姓名专姓名监学位论文如需保密，解密时间年月同楚否保密研究生笃名辛毫7雾纷仰蹲师签母?俐尺疑期：p参年。参熙／≯肇冁期：彩年6月死阳愀生签名蝴师签名：乃。∽雌院领导弛旖盈致谢本研究是在导师陈新建教授的悉心指导F完成斡，衷心感谢导师三年来在学业上的孜孜不错的教诲彝生活上帮劝。从潺撩设计、实麓委论文撰写，导师纣鹚了辛勤魄劳动耪大量的心威。导

2、爆丧譬识渊媾、治学严谨、乎易j疰太，使我受益噬浅。此时此亥l特向愚}蘑表示最深深豹滋意!在深蘧设计与实藏在试验熬过疆中，餐裂了詹克慧老簿、稼军营老簿等死位老厨驰热情帮韵鄱全嚣穗母，在试验实施过程中，提如许多宝懿意见。在此表示墩衷心的感谢!感谢臻±研究生殷冬梅帮嫣在试骏实旌过程稆论文写嚣避程中豹热心帮秘和指导。感谢师姐尹海燕、何盛莲，同窗文付辫、岳润清，师弟阮祥经、舒文涛，F纂妹癸饿、皋鹭薄、王沙沙、自华举等在试验设计及实施中提供静谗多帑裁，在此向他们表示最诚挚的感谢!感游我所有懿寒A茅嬖溪友在精簿帮经济上

3、一妻默默建支持浅、鼓灏我，诖菠无所后顾之忧、顺利地完成学业。鬣嚣，感谢新鸯爱我帮关心我鹣辩长彝弱友，并袭心逮褫愿称{}j好久努梦{杨憨会2006年6月于郑州河南农业大学硕士毕业论文摘要植物磺肽素(phytosulfokine，简写PSK)是近年来发现的一种新型植物肽类生长调节物质。它是两种短肽类物质一一磺化的四肽(PSK-B)或五肽(PSK-d)，其结构为[H-Tyr(S03H)一11e-Tyr(SO如-Thr-0}I]或[H_Tyr(S03H)一IIe-T)T(S03f1)mr．G1n_oH]。1996

4、年，日本学者Matsubyashi等从石刁柏培养细胞的培养液条件化培养基(conditionednmdium,叫)中发现了PSK，它可以促进细胞的生长和增殖。目前，PSK的研究仅限于日本学者Matsubayashi的一家实验室，作为一个新的植物生长调节物质，亟待进行深入和广泛的研究．本研究从PSK的化学合成、生理效应、生物分析等方面进行了初步研究．主要内容如下：1．利用磺化反应将五肽T”一11e—Tyr_Thr-Gln进行磺化，通过柱层析将其磺化产物进行分离，再利用薄板层析(TLc)法进一步纯化．经质谱鉴

5、定，PSK-口合成成功．2．在起始密度较低(3．6X104个·m14)的BY-2悬浮细胞培养体系下，即使在培养基中添加适量的生长素和细胞分裂素，细胞也不能正常生长和分裂。将不同浓度的0l添加到低密度的B1『一2悬浮细胞液中，删可以促进低密度下BY-2细胞的增殖．分析表明：CM中确实存在着促有丝分裂活性的信号分子。3．我们用化学合成的不同浓度的PSK-口添加到BY-2细胞的低密度培养体系中，来验证PSK-a的生理效应．测定结果显示：在低密度培养体系中，化学合成的PSK-o促有丝分裂活性与CM中信号分子的促有

6、丝分裂活性的趋势相一致，这说明CM中存在的促进细胞增殖的信号分子就是PsK-d．细胞的ODⅫ在一定范围浓度内随着PSK-a浓度的增大而增加，在0．25nmol·L-'～5．0nmol·L-1PSI(-a浓度范围内，ODⅢ和PsK-Q浓度呈直线关系。因此该反应系统可以用来作为PsK-a的生物分析系统．4．通过层析纯化和质谱(粥)鉴定首次从小麦愈伤组织，未受精的小麦子房、小麦幼穗、玉米花粉和烟草BY一2悬浮细胞的aI中发现了PsK．口的存在。5．用RT-PCR方法从小麦愈伤组织中提取总RNA得到了PSK前体物

7、基因．序列分析表明：我们克隆到的DNA片段与C,erlBank中的克隆的小麦PsK前体物基因(登陆号为BK000132)同源性是99．62％。这也说明小麦愈伤组织中存在着PSK前体物基因，小麦愈伤组织可能有信号分子PSK的存在，它可能参与了小麦诱导愈伤组织形成或植株再生。关键词：植物磺肽素；前体物基因；PSK—o；烟草BY一2细胞：增殖；生物分析；分离鉴定河南农业大学硕士毕业论文1文献综述1．1新型植物肤类生长调节物质的研究进展植物激素(planthormones或phytohormones)是指在植物体

8、内合成，并经常从产生部位输送到其它部位，对生长发育产生显著作用的一类微量有机物质。植物激素具有以下特点：第一，内生性(又叫内源激素)，是植物生命活动过程中的正常代谢产物；第二，可运性，由某些器官或组织产生后可运到其它部位而发挥调控作用，运转的方式与速率既随激素种类而异，也随植物与器官的特性而不同，在特殊的情况下植物激素在合成部位也有调控作用；第三，调节性，这类物物质不是营养物质，仅以低浓度对代谢过程起调节作用，通常植物激素在极