骨髓间充质干细胞的生物学特性和靶向烫伤创面愈合的研究

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1、独创性声明本人声明所里交的学位沦文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文巾特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也小包含为获得南昌矢学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同I。作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：孑勿移签字日期：州年／月∥R学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解趋墨大学有关保留、使用学位论文的舰定有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权南昌太堕可以将学位论

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3、ediumDMEM培养基ethvlenediaminetetraaceticacidEnhanced6rreenFluorescentProteinextracellularsignal—regulatedkinaseFluorescence—activatedCellSortefocaladhesionkinaseFluoresceinIsothiocyanatehematoxylin—erosinhorseradishperoxidasemesenchymalstemcellsPhosphateBufferedSalineprolifera

4、tioncellnuclearantigenpolymerasechainreactionPhycoerythrinRevolutionsPerMinute乙二胺四乙酸增强型绿色荧光蛋白细胞外信号调节激酶流式细胞计数粘着斑激酶异硫氰酸荧光素苏木素一伊红辣根过氧化物酶间充质十细胞磷酸缓冲液增殖细胞核抗原聚合酶链反应藻红蛋白每分钟转速骨髓间充质干细胞的生物学特性和靶向烫伤创面愈合的研究博士研究生：王红梅导师：郭光华摘李国辉要皮肤是阻止微生物、化学物质等侵入以维持内环境稳定的屏障，烧伤主要损害是皮肤坏死，大面积皮肤缺损可引起全身的改变。冈而创面处理是

5、烧伤救治的重要环节之一，大面积皮肤缺损创面的覆盖与修复一直是临床医师倍感棘手的问题。烧伤创面的修复是一个十分复杂的生物学过程，包括炎症反应、细胞增殖和迁移、胶原与细胞外基质的沉积以及再上皮化等。目前，烧伤创面修复方法主要是以局部治疗为主。大面积深度烧伤患者由于白体皮源不足，多年来运用网状植皮、邮票植皮、小皮片移植、微粒植皮等技术来扩大皮肤覆盖面积，取得了较好的临床效果。但这些方法皮肤扩增面积有限，难以满足大面积皮肤缺损患者尽早封闭创面的需求，在加快创面愈合的速度和改进创面愈合质量，从而在减少功能障碍的发生率和提高患者生活质量方面，目前常规应用的

6、这些方法显然还存在着很多不足。组织^T程学的兴起和发展，为临床解决这一难题提供了崭新的思路和途径。组织工程将体外分离、培养的高浓度的功能相关的活细胞种植于天然的、人工合成的支架上，使之植入人体后能够形成新的有功能的组织，来制造、保存或修复失去的组织功能。组织工程化人体组织或器官产业化生产的一个关键因素是植入足够数量的、不引起免疫反应的、具有再生活力的细胞。其中种子细胞的体外培养扩增成为组织工程学中的重要环节。理想的种子细胞应具有容易获得，容易体外培养增殖，长期传代不改变生物学特征，抗原性小，组织修复能力强等特征。目前，有关皮肤种子细胞的研究主要

7、集中在表皮细胞大规模培养和表皮干细胞研究，以及胚胎干细胞向表皮细胞定向诱导分化等儿个方面。表皮细胞2大规模培养虽已有成功应用的报道，但仍存在生产周期长、技术要求高和费用昂贵等诸多限制：正常皮肤内表皮干细胞数量有限，而大面积深度烧伤患者表皮十细胞米源更有限。同时表皮干细胞的分离、纯化和培养技术尚不够成熟；在胚胎干细胞方而，牵涉到伦理、技术等诸多障碍。因此有必要探索一条新的途径来克服皮肤种子细胞的技术难度和瓶颈问题。近年来研究发现，骨髓组织除含有造血干细胞外，还含有另一类干细胞一一骨髓间充质干细胞(mesenchymalstemcells，MSCs

8、)。MSCs具有干细胞的共性，即自我更新及多向分化能力。大量研究证实，在一定诱导条件下MSCs可向成骨细胞、成软骨细胞、成肌细胞、肌腱细胞、脂肪细胞及