款冬花中黄酮类化合物的提取及纯化工艺研究

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1、DissertationforMasterDegreeofZhengzhonUniversityStudieSontheExtraetionandPurifiCationofFlavonoidsinTussilagofarfaraL.ByDingCailiSuPervisor:Prof.WUMin幻ianSchoolofChemicalandEnEnglnCenngZhengzhouUniversityZhengzhou，HenanP.R.ChinaMay，17，2009摘要款冬花是一种传统中药材，

2、为菊科款冬属植物款冬(乃姗ilagofarfaraL)的干燥花蕾，具有润肺下气，止咳化痰等功效。现代临床上主要用于新久咳嗽，喘咳痰多，劳嗽咳血等症。从文献调研发现，对款冬花的研究多集中于生理药理作用和化学成分方面，而对其活性成分黄酮类物质的提取及纯化工艺方面尚未见报道。本文针对文献中研究的不足，对款冬花中的黄酮类化合物进行了系统研究，为使款冬花更好的应用于医药、食品、化妆品等领域提供理论基础。其主要内容及研究结果如下:1.本文以芦丁为标准品，利用铝盐显色可见分光光度法，得到款冬花总黄酮的标准曲线，标

3、准曲线的回归方程为C=0.08594A一0.00369，相关系数R二0.99992。经方法学验证得知该方法具有线性关系良好、精密度高、稳定性可靠、回收率高等特点，可以作为款冬花黄酮类化合物的含量测定方法，能够满足后期提取纯化工作的要求。2.比较了不同溶剂对款冬花黄酮提取率的影响，结果表明乙醇为性能良好的提取剂;研究了索氏提取法、回流提取法、超声辅助提取法、超声辅助提取法四种不同提取方法对款冬花总黄酮的提取效果，其平均提取得率分别为9.03%、7.44%、7.23%、4.70%(n=3)，以索氏提取法

4、的提取率为最高。3.研究了乙醇浓度、提取时间、提取温度、提取次数对款冬花总黄酮回流提取工艺的影响，并结合以34)正交试验法，优化回流提取工艺。结果表明，各因素对提取工艺的影响程度为:乙醇浓度>提取温度>料液比>提取时间，最佳提取工艺为30倍量50%乙醇，在80℃下回流提取Zh，提取1次，其最高得率为8.15%。该工艺提高了回流提取法的提取率，且简单易行，为工业化生产提供依据。4.采用大孔吸附树脂技术对款冬花总黄酮进行纯化，比较了AB一8、NKA、NKA一11、X一5、SP825、HP20六种大孔树脂

5、对款冬花总黄酮的吸附解析特性，结果在静态吸附和动态吸附实验中均以SP825具有较优的吸附容量和解吸率，可以作为纯化款冬花总黄酮的理想树脂。5.考察了SP825大孔吸附树脂对款冬花总黄酮的纯化工艺条件，结果表明，原药液(总黄酮质量浓度为29.09m创ml)稀释5倍，调pH为3一4，以2By瓜的流速上样，最大上样量为科BV;再用3BV的70%乙醇溶液，以1一2BV小流速进行洗脱，经处理后的总黄酮纯度达60%以上，约为原纯度的4倍，该方法大大提高了固体提取物中总黄酮的纯度，为富集纯化的工业化生产提供了试验

6、依据。6.通过颜色反应和红外吸收光谱，确认了纯化后的款冬花固体提取物的主要组分为黄酮类化合物，初步判断固体中的黄酮类化合物含有黄酮醇类物质。关键词:款冬花;黄酮类化合物;大孔吸附树脂;提取;纯化;鉴定AbstraCtThe卫。werbudof乃绍silaJ卯farfaraL.hasbeenthetraditionalChinesemedicineitbelongstothegenusT恤ssilagooffamilyComPositae.刀招‘ilagofarfaraL.hasbeenusedinC

7、hinesefolkmedieineforthetreatmentofcough，bronchitis，andastbmatiedisorders.Theliteraturesof刀籽silagofarfaraL.havebeenmainlyaboutcherniealandPhanaeologiealasPects，bultheextractionandPurificationProeessofthetotalflavonoidswhicharetheactiveingredienthasnotb

8、eenr印orted.InthisP叩鱿thetotalfiavonoidsfromTussilagofarfaraL.werestudiedsystematiely，inordertoProvideatheoretiealfoundationfortheaPPlieationsofTussilagofarfaraL.inmedieine，food，eosmetiesandotherfields.ThemaineontentsandconclusionsareProv