款冬花多糖提取及分离纯化工艺研究

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1、西北大学硕士学位论文款冬花多糖提取及分离纯化工艺研究姓名：李婉婷申请学位级别：硕士专业：化学工艺指导教师：李稳宏20100616摘要款冬花系菊科植物款冬的干燥花蕾，是我国传统的中草药，在医疗单位处方和民间验方、偏方等也多采用款冬花治疗急慢性气管炎、肺结核等症。多糖具有抗氧化性、抗肿瘤、抗病毒、抗溃疡、抗突变、降血脂、降血糖等作用，在医药领域应用广泛。本课题以陕南中药材款冬花为研究对象，重点对款冬花多糖的提取和款冬花多糖脱蛋白、脱色纯化工艺进行了研究，并对其抗氧化活性以及结构鉴定进行了初步的探索。主要研究成果如下：(1)款冬花多糖

2、的优化提取工艺通过对不同提取方法的对比研究，得到了一条原料预浸泡．超声．水提法组合工艺从款冬花中提取多糖的优化路线，在单因素试验的基础上，通过响应面分析法得到了该工艺路线的的最佳工艺条件：料液比1：10g／mE，预浸泡时间5h，温度71℃，超声时间33min，水提时间1．5h，多糖提取率达到19．48％．(2)款冬花多糖脱蛋白工艺通过对盐酸法、三氯乙酸法、Sevage法、胰蛋白酶·Sevage法和木瓜蛋白酶-Sevage法等5种脱除蛋白方法的对比研究，结果表明木瓜蛋白酶．Sevage法最为理想，该法的最佳工艺条件为：木瓜蛋白酶的

3、酶底比为l％，pH值7．0，先在50"C水浴中酶解2h，再经Sevage法脱蛋白3次，其蛋白脱除率为88．95％，多糖保留率为92．63％。(3)款冬花多糖脱色工艺通过对双氧水氧化法、活性炭吸附法、反胶束溶液法和大孔树脂吸附法等4种方法的研究，结果表明大孔树脂吸附法对款冬花多糖的脱色效果最为理想，同时也能脱除部分蛋白质。通过对6种吸附树脂研究表明，LS．206树脂最为理想，该法最佳吸附工艺条件为：流速1BV／h，上样量为1．SBV，上样浓度为6mg／mL。经大孔树脂脱色后的脱色率可达94．20％，多糖保留率为73．03％。经过脱

4、蛋白工艺及脱色处理后，蛋白质总去除率可达97．40％．(4)款冬花多糖的抗氧化性试验结果表明，款冬花多糖能有效的清除超氧自由基、羟自由基、亚硝基和DPPH-这四种自由基，尤以对亚硝基、DPPH自由基有着明显的清除作用，且超声辅助提取多糖清除作用略优于水提多糖，且随着对多糖的不断纯化，其清除率也不断提高。(5)结构初步解析对款冬花超声提取多糖纯化组分进行了一级结构初步解析，采用凝胶渗透色谱法得出其分子量约为169800Dal；经气相色谱分析单糖组成为甘露糖和半乳糖，摩尔比约为：1．83：1。关键词：款冬花，多糖，提取，分离纯化，抗

5、氧化性，结构解析AbstractnledriedbudsandflowersofTussilagofarfaraplacedingenusTussilago，astraditionalChineseherbalmedicineinofficialmedicalprescriptionorfolkremedyandprovedrecipe，aremostlyusedinresistingacuteandchronicinflammationofthetrachea,pulmonarytuberculosis，andSOon．Pol

6、ysaccharidesarewidelyappliedinmedicalfieldwitllitsfunctionofantioxidation,antitumor,antivirus，antiulcer,antimutagenic，lipiddecreasing，reducingbloodsugar,etc．硼1ethesisisaimedtodevelopherbalresourcesofSouthernShaunxithroughresearchingthedI．iedbudsandflowersofTussilagof

7、arfara．Tiffsthesishasasystematicstudyfocusedonthepolysaccharideextraction,purificationprocessincludingremovingproteinandthedecolorizationprocess．111eantioxidantactivityofpolysaccharideistested、析tllpreliminaryanalysisitsstructure．(1)polysaccharideextractionAnewtechnol

8、ogyofextractingpolysaccharidefromthedriedbudsandflowersofTussilagofarfaraWasstudied．111erawmaterialsweremanagedbypre—soaking-ultras