β淀粉样蛋白诱导血管平滑肌细胞损伤模型的建立与利福平的保护作用

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1、华中科技大学硕士学位论文β-淀粉样蛋白诱导血管平滑肌细胞损伤模型的建立及利福平的保护作用华中科技大学同济医学院附属协和医院神经内科硕士研究生陈义书导师刘昌勤教授摘要第一部分β-淀粉样蛋白(1-40)诱导的血管平滑肌细胞损伤模型建立目的：建立实用有效的β-淀粉样蛋白（1-40）诱导的血管平滑肌细胞损伤模型。方法：以培养的SD大鼠颈动脉平滑肌细胞作为观察对象,以Matrigel模拟血管基底膜，实验分为实验组和对照组,观察细胞培养板孔底经β-淀粉样蛋白（1-40）处理与未处理情况下，不同生长时期显微镜下平滑肌细胞的形态学变化,并用四唑

2、盐比色实验检测平滑肌细胞活性,台盼蓝拒染法绘制细胞生长曲线，依据乳酸脱氢酶漏出量检测平滑肌细胞膜的损伤程度。结果：与对照组相比，经β-淀粉样蛋白（1-40）处理组的培养平滑肌细胞各时间点形态发生变化，活细胞比例减少，死亡细胞比例增加，乳酸脱氢酶漏出量增加(P<0.05)。结论：以Matrigel模拟血管基底膜建立的β-淀粉样蛋白（1-40）诱导的血管平滑肌细胞损伤模型是成功的。【关键词】β-淀粉样蛋白(1-40)；血管平滑肌细胞；Matrigel；MTT；LDH1华中科技大学硕士学位论文第二部分利福平对β-淀粉样蛋白(1-40)

3、诱导的血管平滑肌细胞损伤保护作用及与炎症关系目的：利用建立的β-淀粉样蛋白（1-40）诱导的血管平滑肌细胞损伤模型来观察利福平的保护作用并探讨与炎症的关系。方法：实验分组为对照组(β-淀粉样蛋白未预处理)和利福平保护组(β-淀粉样蛋白预处理),每组因利福平终浓度不同又各分为5组(利福平终浓度分别0,1,5,10,20mg/mL），显微镜下观察平滑肌细胞的形态学变化,用四唑盐比色实验检测平滑肌细胞活性,依据乳酸脱氢酶漏出量检测平滑肌细胞膜的损伤程度；检测培养上清液细胞炎症因子(IL-6,TNF-α)水平变化了解炎症在其中的作用。结

4、果：与对照组相比，经利福平处理后的培养平滑肌细胞形态好转，活细胞比例增加，死亡细胞减少，乳酸脱氢酶漏出量减少；培养细胞上清液IL-6,TNF-α浓度降低。结论：利福平对β-淀粉样蛋白(1-40)诱导的血管平滑肌细胞损伤有保护作用，且与减轻炎症过程有关。【关键词】β-淀粉样蛋白(1-40)；血管平滑肌细胞；利福平；MTT；LDH；IL-6；TNF-α2华中科技大学硕士学位论文TheModelofVascularSmoothMuscleCellsCulturedinVitrodamagedbyAβandProtectiveEffec

5、tofRifampicinDepartmentofNeurology，UnionHospital，TongjiMedicalCollege，HuazhongUniversityofScienceandTechnology，WuhanPostgraduate：ChenYishuTunor：ProfessorLiuChangqinAbstractPartOneTheModelofVascularSmoothMuscleCellsCulturedinVitroDamagedbyAβObjective:Toestablishaneffe

6、ctivemodelofvascularsmoothmusclecellsculturedinvitrodamagedbyAβ1-40.Methods:Theculturedsmoothmusclecellsoftherat’scarotidarterywereobservedinthesepresentexperiments.Matrigelwasusedtomimicthebasementmembraneofthebloodvessels.Thecellsweredividedintocontrolgroupandexper

7、imentalgroup，intheexperimentalgroupstheAβ1-40wasdepositedintothedishesbeforetheexperiment.Underthemicroscopeweobservedthemorphologicchangesofthecells.TheviabilityoftheVSMCswasevaluatedbyMTTassayandthegrowthcurve.LDHeffluxwasusedtoshowdamagedegreeofthemembrane.Results

8、:Comparedwiththecontrolledgroup，TheviabilityatvariousstagesofthegroupsunderAβ1-40treatmentdecreased，becausethemorphousofthecellscha