裙带菜多糖免疫调节作用的体外实验的研究

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1、英文缩写PBMCUPPSPHAELISADMSOFCMRPMIMTT0DPBSTrisEnglishAbbreviationperipheralbloodmononuclearcellUndariaPinnatifidapolysaccharides植物血凝素Ezyme—linkedimmunosorbentassayDimethylSulfoxideflowcytometryRoswellParkMemorialInstitutue3一(4，5一dimethy一2一thiazloy)一2，5一diphenyl·-2·-te--trazoliumbromideoptic

2、aldensityphosphatebuffersolution三羟甲基氨基甲烷6河北医科大学学位论文使用授权及知识产权归属承诺本学位论文在导师(或指导小组)的指导下，由本人独立完成。本学位论文研究所获的研究成果，其知识产权归河北医科大学所有。河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表与学位论文主要内容相关的论文，第一署名单位为河北医科大学，试验材料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。否则，承担相应的法律责任。研究生勰啤缉导师虢研究生学位论文独创性声明导签名：z／凋本论文是在导师指导下进行的研究T作及取得的研究成果，除了文中特别加以标注和

3、致谢等内容外，文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果，指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写，文责自负。，^研究⋯啤多易寺翮妊洋鸺-‘乃,1‘'’，牛t-．i--歹月17，2沙中文摘要裙带菜多糖免疫调节作用的体外实验研究摘要目的：分离纯化出裙带菜多糖活性成分，观察裙带菜多糖对人外周血单个核细胞(PBMC)增殖、淋巴细胞亚群、细胞因子分泌的影响，探讨裙带菜多糖的免疫调节机理。方法：1．采用逐步分离法对裙带菜多糖进行分离与纯化。采用水提醇沉法进行初步分离，柱层析法进一步纯化，应用硫酸一苯酚法进行成分鉴定。2．采用MTT法分析裙带菜多糖提取物对人外周血淋巴细胞体外增殖

4、作用的影响。3．用流式细胞术检测淋巴细胞亚群的变化。4．应用酶联免疫方法测定裙带菜多糖作用后淋巴细胞培养上清中细胞因子的浓度。结果：1．裙带菜粗提液经SephadexG一100凝胶过滤层析柱进一步纯化后，经硫酸一苯酚法鉴定，得到单一的对称峰，最终得到多糖化合物。2．裙带菜多糖对PBMC增殖的影响与阴性对照组相比，裙带菜多糖对PBMC的增殖反应有明显的促进作用，随着浓度的增加，增殖反应明显增强(P

5、影响与阴性对照组相比，不同浓度的裙带菜多糖可刺激CD4+T细胞的增殖，但经统中文摘要计学检验无显著性差异(P>0．05)；随着裙带菜多糖浓度的增加，CD8+T细胞的比例有明显增加，较阴性对照组相比有显著性差异(P<0．05或0．01)；但各浓度组裙带菜多糖对B细胞增殖反应无明显影响，与阴性对照组相比无显著差异(P>0．05)；除O．5ug／ml组外，随着裙带菜多糖浓度的增加，NK细胞比例渐增高，与阴性对照组相比，差异有显著性(P<0．01)，在20ug／ml时，达到最高，为9．67±1．53。4．裙带菜多糖对PBMC分泌细胞因子的影响不同浓度的裙带菜多糖对PBMC产生I

6、L-6的作用无明显影响(P>0．05)；但裙带菜多糖可明显刺激PBMC产生IL一2(P<0．01)，20ug／ml时达最高，为阴性对照组的2．19倍；各浓度组裙带菜多糖对PBMNC产生IL一10作用无明显影响(P>O．05)。结论：1裙带菜多糖可明显刺激人外周血淋巴细胞的增殖2裙带菜可使人外周血淋巴细胞产生IL．2增加，而对IL．6，和IL．10的产生无明显影响。3裙带菜多糖可影响人外周血淋巴细胞中CD4+T／CD8+T的比例，使CD8+T比例增高。4裙带菜多糖可促进人外周血淋巴细胞中的NK细胞增殖。关键词：裙带菜多糖；外周血单个核细胞；免疫学调节作用；MTT法：细胞因

7、子；细胞增殖．．茎查塑墨一．———————————————————————————一——。一AExternalExperimentalStudyontheImmunoregulatoryActivityofUndariaPinnatifidapolysaccharidesABSTRACTObjective：ThisstudywaspurposedtOisolateandpurifyactivecomponetandfindouttheactivepartandactivecomponetofUndariaPinnatifidapolysa