淮山药多糖的免疫调节作用研究

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1、淮山药多糖的免疫调节作用研究作者：徐增莱，汪琼，赵猛，徐琴，贾成森，史云云【摘要】目的探讨淮山药粗多糖对小鼠的免疫调节作用。方法小鼠灌胃给予不同剂量（200，400和800mg/kg）的淮山药多糖，1次/d，连续8d，进行ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化实验（MTT法）、测定血清溶血素测定（半数溶血值法）、小鼠碳廓清实验。结果山药多糖具有增强小鼠淋巴细胞增殖能力的作用，促进小鼠抗体生成的作用和增强小鼠碳廓清能力的作用。结论淮山药多糖具有一定的免疫功能增强作用。【关键词】淮山药；多糖；免疫调节　　Abstract：ObjectiveToinvestigate

2、theimmunologicenhancementofDioscoreaoppositaThunb.polysaccharide.MethodsDioscoreaoppositaThunb.polysaccharideindifferentdosages(200,400,800mg/kg)phcellstransformationofConAinducingmethod(MTTmethod),hemolytictestofbloodserumandhemchromeandmousecarbontest.ResultsTheresultsshoiceLymp

3、hocytetransformationtest；HC50raisedinallthreeconcentrations;ratioofmonocyte-macrophagecarbongraineliminationhassignificantchangestothecontrol.ConclusionDioscoredoppositaThunb.polysaccharidepossessesapotentialeffectofimmuneregulation.　　Keymunitymoderation山药属常用中药，味甘、性平，具有补脾养胃、生津益肺、补

4、肾涩精等作用。山药多糖DioscoreaoppositaThunb.polysaccharide是从山药中分离提纯的水溶性多糖成分，具有免疫调节作用。以往有关山药的药理研究多针对河南省出产的铁棍山药和太谷山药等怀山药品种。而山药在全国大部分地区均有栽培，淮山药为其在淮河中下游地区（江苏、安徽两省北部）传统栽培品种。以食用为主，兼作药用。对淮山药等山药地方品种的药理作用至今仍缺乏研究。为了充分利用淮山药资源，本实验研究了江苏产淮山药粗多糖对小鼠的免疫调节作用。　　1材料　　1.1样品淮山药DisoscoreaoppostitaThunb.来源：淮山药采自江苏

5、省灌南县花苑乡。将淮山药削皮切片，晒干后粉碎，干燥后称取粗粉（60目）900.0g，加入适量蒸馏水在水浴中浸提，其间不断搅拌，静置冷却后离心（3000r/min，5min）除去不溶物，收集上清液，减压浓缩。在冷却后的上清液中加入95%乙醇至醇含量在80%以上，不断搅拌，有大量沉淀生成，离心，收集沉淀，分别用无水甲醇和乙醚洗涤，以除去水分和杂质，得到灰白色粉末状粗多糖38.88g(1g粉末相当于生药23.14g)。粗多糖得率可以达到4.32%，该粗多糖中含有18.43%的山药多糖。　　1.2动物和细胞ICR种小鼠18～22g，雄性，中国科学院上海克莱斯实验动

6、物中心，合格证号：SCXK（沪）2003-2004。豚鼠，由江宁青龙动物养殖场提供，动物使用许可证号：（苏）2002-0057。所有实验动物均食用全价颗粒饲料，自由摄食饮水。YAC-1细胞，由南京中医药大学海洋中心药理毒理室提供。　　1.3绵羊红细胞（SRBC）与补体制备健康绵羊颈脉取血，将羊血放入有玻璃珠的灭菌锥形瓶中朝一个方向摇动，以脱纤维，用阿氏液保存于4℃冰箱保存备用。用时生理盐水2000r/min离心10min洗涤3遍。采集豚鼠血，分离出血清（至少5只豚鼠的混合血清），前将1ml压积SRBC加入到5ml豚鼠血清中，放4℃冰箱30min，经常振荡，

7、离心取上清，分装小瓶，-70℃保存。用时以生理盐水按1∶10稀释。　　2方法小鼠随机分为对照组（给予蒸馏水）及山药多糖200，400，800mg/kg［1］3个剂量组，每组10只。灌胃体积0.1ml/10g体重，1次/d，连续8d。　　2.1ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化实验1640培养液用微孔滤膜过滤除菌，加入10%小牛血清、1%谷氨酰胺（200mg/ml）、青霉素（100mg/ml）、链霉素（100mg/ml）及2-巯基乙醇（5μmol/ml），用无菌HC1（1mol/L）或无菌NaOH（1mol/L）调pH至7.0～7.2，制成完全培养液；用7.2～

8、7.4的PBS缓冲液作溶剂，现用现配MTT溶液（5mg/ml）；以