金樱子多糖的提取、纯化与其降血脂作用的研究

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1、金樱子多糖的提取、纯化及其降血脂作用的研究摘要近年的大量研究表明，生物体内的多糖具有调节机体免疫、抗肿瘤、抗氧化、降血糖和降血脂等广泛的生理作用。中药金樱子（RosalaevigataMichx），又名糖罐子，是蔷薇科蔷薇属的一种野生常绿蔓性灌木的果实。在医学上金樱子有着广泛的应用，早在《本草纲目》中就记载有多种功效。金樱子在我国分布广泛、资源丰富，其多糖含量较高，在金樱子的诸多作用中，多糖无疑是其中的主要活性成份之一。因此，开展对金樱子多糖（Rosalaevigatamichxpolysaccharides，RPs）的分离纯化及其药理作用的研究有着广泛

2、的应用前景。本研究采用正交实验设计，以温度、料液比、提取时间等为变量，预测最佳工艺参数，优化金樱子多糖的最佳提取条件；粗提物经Sevage法脱蛋白，透析法除去小分子，乙醇沉淀，冷冻干燥，得到金樱子多糖粉末；重新水溶解后，采用DEAE-纤维素柱分离纯化，得到三个组份的多糖，经凝胶过滤色谱法，测定其分子量分布范围。利用RPs为受试物，进行体外自由基的清除实验，再利用实验性高脂血症小鼠和大鼠模型，观察RPs及其各组分的降血脂作用。以高脂饲料持续喂小鼠2W，大鼠14W后，采血，直接测定血清的总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG），高密度脂蛋白（HDL-C）含量，并由

3、公式计算低密度脂蛋白（LDL-C）和动脉硬化指数（AI）值；采用冰冻切片，光镜观察大鼠动脉的形态学结构的变化。研究结果如下：1．浸提温度、料液比和浸提时间对金樱子多糖的提取率有较显著的影响，粗提最佳温度、料液比及提取时间分别为：95℃、1:10、4h。2．金樱子多糖经纯化分离后，所得三个组份RP1、RP2和RP3的平均分子量分别为：8300～8600、18500～19000和11000～12500。3．三种多糖组份对超氧阴离子自由基，羟基自由基都有显著的清除作用，－但活性强度不同。在对O2·的清除作用中，RP2的活性最强（EC50=642.7ug/ml）

4、，而RPs对·OH清除率最高（EC50=1455.1ug/ml）。在降血脂实验中，饲喂RP2小鼠组具有显著的降血脂活性，与高脂模型组比较，血清中的TC、TG、LDL-C含量和AI均有显著降低（P<0.01），HDL-C含量则显著升高（P<0.01）。在进一步的大鼠实验中，血管的组织形态学对比表明：RP2饲喂组与高脂饮食组相比，动脉粥样硬化病变明显减轻（P<0.05）。综上所述，金樱子多糖RP2有较显著降脂效果，对动脉粥样硬化可能有一定的预防作用,值得进一步深入研究和开发利用。关键词：金樱子；多糖RP2；纯化；降脂作用StudiesontheSeparat

5、ionandLipid-depressingFunctionofPolysaccharidesintheRosalaevigatamichxAbstractIthasbeenfullyrecognizedinrecentstudiesthatthepolysaccharideshavevariouseffectssuchasanti-tumor,anti-virus,anti-mutation,anti-oxidation,immunemodulation,reductionofbloodsugarandbloodlipidsandsoon.Rosala

6、evigatamichx,awildevergreentrailingshrub,belongstorosefamilyinrosegeneraanddispersedalloverChina,richinnaturalresources.Rosalaevigatamichxfruitwaswidelyusedinmedicalscience,originallyrecordedinCompendlumofMateriaMedica.Itisveryimportant,undoubtedly,toexploitandmakeuseoftherichnat

7、uralplantresourcesofRosalaevigatamichxpolysaccharides(RPs),andtostudytheapproachesofitsseparation,purificationanditsbioactivities.Thisresearchwasundertakeninthewayofperpendicularexperiments:takingtemperatureofextracting,theratioofsolventvolumetothefruitweighofRosalaevigatamichxan

8、dthesuitabletimeastheparametersinorderto