大鼠孕期应激对子代听觉系统影响的实验的研究

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1、郑州大学2006年硕上研究生毕业论文人鼠孕期成激对子代听觉系统影响的实验研究(摘要)大鼠孕期应激对子代听觉系统影响的实验研究研究生李萍导师董雪蕾教授郑州大学第三附属医院耳鼻咽喉科郑州450052摘要背景和目的：人类流行病学和动物实验表明，长期反复暴露于急性强烈应激和慢性应激会引起机体内环境的变化。大量的文献报道，产前应激对子代神经行为发育及子代学习和记忆能力有影响。但这些研究着重于妊娠期应激对子代学习能力和行为方面的影响，然而对子代听觉中枢的影响尚缺乏系统的研究。本课题在制作孕期束缚应激模型的基础上，检测母鼠血浆中A

2、cTH和皮质醇的含量，检测新生鼠的听性脑干诱发电位(ABR)，并用免疫组化技术观察新生鼠耳蜗核Fas，FasL蛋白的表达，探讨产前应激对子代听觉系统的影响，降低新生儿耳聋的发生率，为母子孕期保健提供理论依据。材料和方法：1．sD成年雌性大鼠(210一2509)随机分为实验I组(Ml组)；实验II组(M2组)和对照组(c组)，每组10只。雌雄台笼后，在动情期发现精子满视野时为妊娠第O天，受孕雌鼠分笼并单独饲养。实验M1、M2组分别在妊娠第11．21日、1．2l口给予束缚应激，c组不给予任何处理，束缚应激每天3次，每次4

3、5min。新生鼠按照母鼠的分组分为应激I组(s1组)：应激II组(S2组)：应激对照组(SC组)。2．母鼠确定怀孕后每天早8时称体重，新生仔鼠在出生后8小时内分别称体重。孕鼠末次应激结束后称重，断尾采血1ml，取血浆放入．70℃冰箱中保存，用放射免疫法检测AcTH和皮质醇的浓度。3．每组新生大鼠随机抽出20只分别测试ABR反应阈，I、II、IⅡ波潜伏郑州大学2006年硕上研究生毕业论文人鼠孕期应激对于代听觉系统影堕堕塞竺型壅!垫墨!期及I～Il、II～ⅡI、I～Ⅲ波间期。4．每组新生仔鼠随机抽取30只取脑，经面神经根

4、平面向后做连续冠状切片，取从耳蜗核开始出现至消失的切片，共取四套切片，一套行HE染色，一套行Fas免疫组化染色，一套行FasL免疫组化染色，另一套做阴性对照。5．应用HP执s．1000(同济医科大学千屏影像工程公司)电子计算机图像分析系统分析各组大鼠耳蜗核FaS和F勰L免疫组织化学染色的平均灰度值。6．实验数据经sPssll．5统计软件进行统计学处理，采用单因素方差分析和相关性分析，所有数据用均数±标准差(i±s)表示，以P

5、(P

6、浆浓缩，脂褐素沉积，尼氏体减少，胞浆内空泡形成，核膜不规则，毛细血管管腔增多，内皮细胞增生肥大，管壁增厚。5．光镜下新生仔鼠耳蜗核组织Fas和FasL免疫反应物呈棕黄色，s1组、s2组耳蜗核组织Fas和FasL免疫组化平均灰度值明显高于C组，即Fas和FasL蛋白表达明显增强，差异有统计学意义(P<0．05)。s2组耳蜗核Fas和FasL免疫组化平均灰度值明显高于s1组，差异有统计学意义(P

7、缚应激促进子代鼠耳蜗核神经细胞Fas，F船L蛋白的表达。郑州大学2006年硕士研究生毕业论文人鼠孕期应激对了代听觉系统影响的实验研究(摘要)3．产前束缚应激对子代听神经传导系统有影响，可导致新生鼠听阙升高，ABR各波潜伏期延长。‘4．产前束缚应激组的子代听力损失程度与Fas，FasL蛋白的表达呈明显正相关，提示Fas／FasL这一凋亡通路在产前应激所导致的听力损失过程中发挥重要作用。关键词：束缚应激；ACⅡ{；皮质醇；Fa泖asL；ABR：耳蜗核。II郑州大学2006年顽上研究生毕业论文大鼠孕期庳激对子代听觉系统影响

8、的实验研究(摘要)ResearchintheEf＆ctsofPrenatalStressonAuditoI。ySystemoftheOfbpringPostg删uate：LiPingTutor：DongXueLeiDepaItIr佗ntofOtorhinolaryngolog弘The111irdA匝liatedHospi协lofZhengzho