肿瘤睾丸抗原ssx2、ssx4、magea1在胰腺癌和癌旁组织中的表达

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1、目录fllflfflrfffffflfffffJfllfflfrJJflllfIIflllrflllfY1801640中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··1英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯2英文缩写⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯7研究论文肿瘤一睾丸抗原SSX．2、SSX．4、MAGE．A1在胰腺癌和癌旁组织中的表达前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．8日U舌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯‘8材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

2、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯9结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·15附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯”l6附表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·19讨论········································-·······-·····--·····-······································20结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·23参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·2

3、4综述SSX基因家族与胰腺癌免疫治疗⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·28致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·36个人简历⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·37中文摘要肿瘤一睾丸抗原SSX-2、SSX-4、MAGE-A1在胰腺癌和癌旁组织中的表达摘要目的：胰腺癌是严重威胁人类健康的一种常见恶性肿瘤，发病率呈逐年增高的趋势，并有手术切除率低，术后复发率高的特点r使胰腺癌成为实体肿瘤中治疗效果较差的肿瘤之一。免疫治疗的发展，使它成为胰腺癌综合治疗中有效手段之一。目前，许多肿瘤相关抗原已相继被发现。其中肿瘤．睾丸抗原(cancer-

4、testisantigen，CTA)研究工作最早源于上世纪70年代末到80年代初，其在肿瘤组织中的表达具有以下特征：①同一肿瘤．睾丸(cancer-testis，CT)抗原在不同肿瘤组织的表达频率不同；②不同CT抗原在同一肿瘤组织的表达频率也不同；③CT抗原的表达具有“群集性’’，即同一肿瘤组织可同时表达多种CT抗原。基于CT抗原的这些特征，筛选出各种肿瘤组织中高表达的CT抗原显得尤为重要，这将为肿瘤疫苗的制备提供坚实的理论基础。为了寻找胰腺癌中高表达的CT抗原，本实验检测并比较了肿瘤一睾丸抗原、滑膜肉瘤X断裂点基因(synovialsarcomaXbreakpiont，SS

5、X)．2、SSX．4、黑色素瘤抗原(melanomaantigen，MAGE)．A1在胰腺癌以及癌旁组织中的表达情况，为临床研制、应用肿瘤疫苗提供可靠的理论基础。方法：选取2008年河北医科大学第二医院肝胆外科胰腺癌手术切除病例26例，癌组织均经病理证实；癌旁组织取自癌缘外2cm以内的胰腺组织，且经病理证实；另外选取河北医科大学第二医院病理科2005年至2007年间手术切除、病例资料完整的存档蜡块，其中包括癌旁组织15例和胰腺癌52例。病例入组前所有病例的全部切片均由两位高年资病理医师严格按照2000年WHO标准明确诊断复核。免疫组织化学检测SSX．2、SSX．4、MAGE．

6、A1抗原表达采用链霉素抗生物素蛋白．过氧化物酶免疫组化法(即S．P法)。结果判定按照Volm报道的判断标准进行，根据以下两方面的总分进行判断：(1)选染色均匀中文摘要的阳性表达区域，以着色细胞占视野细胞总数的多少分级。O：无阳性细胞；l：阳性细胞数<25％；2：阳性细胞数26％～50％；3：阳性细胞数>50％。(2)按着色细胞染色强弱分：O：阴性；1：弱，淡黄色；2：中等，棕黄色；3：强，棕褐色。按(1)、(2)的数值相加判断结果，0"-'-'2为阴性(一)；3～4为弱阳性(+)；5"--6为强阳性(++)。RT-PCR检测CT抗原在胰腺癌组织和癌旁组织中的表达。使用组织RN

7、A提取试剂盒进行总RNA的提取，电泳鉴定后反转录合成eDNA并进行扩增。PCR产物于1．5％琼脂糖凝胶中电泳，凝胶分析系统中观察、照相并进行定量分析。结果：1免疫细胞化学染色结果在15例胰腺癌旁组织中肿瘤一睾丸抗原SSX均不表达，52例胰腺癌中，其阳性表达率为25例(48．08％)。两者相比P值小于O．01，表明SSX在癌旁组织不表达，在癌组织中表达。两者存在显著性差异。肿瘤一睾丸抗原MAGE．A1蛋白在15例癌旁组织中均不表达，其阳性表达率为O例(O％)；在52例胰腺癌中，其阳性表达率为15例(28．