癌—睾丸抗原ssx2在肝细胞癌中表达探究

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1、癌—睾丸抗原SSX2在肝细胞癌中表达探究　　【摘要】目的检测癌-睾丸抗原SSX2在肝细胞癌组织中的表达。方法应用RT-PCR技术，对40例肝细胞癌的癌组织及相应癌旁组织进行SSX2基因的mRNA检测。结果肝细胞癌组织中SSX2mRNA表达阳性率为27.5%（11/40），而相应的癌旁组织无SSX2mRNA表达阳性率为0（0/40），两组比较差异有统计学意义（P0.05）。结论SSX2在HCC中呈低频率的表达。【关键词】肝细胞癌；癌-睾丸抗原；SSX2；逆转录-聚合酶链反应肝细胞癌（hepatocellularcarcinomas，HCC）是我国

2、常见的恶性肿瘤，目前临床治疗已积累了丰富经验，在肿瘤免疫治疗方面也有了一定的进展。目前已发现的肿瘤相关抗原较多，CT抗原（cancertestisantigen）是其中最有前景的一种。因为这类抗原只在睾丸及广泛的肿瘤组织有表达。在CT抗原中有一种SSX抗原的多基因家族[1]。其中SSX2在HCC的表达研究目前已有报道[2，3]，但在广东地区未见报道，为了了解其在广东地区HCC的表达情况，本研究应用RT-PCR技术检测HCC及相应癌旁组织，初步探讨广东地区HCC中SSX2基因表达的意义。1材料与方法41.1标本来源40例HCC及相应癌旁肝组织标本

3、取自附院，所有病例均经病理查实。标本于外科手术切除后即液氮冻存备用。1.2RT-PCR分析总RNA提取采用异硫氰酸胍-酚-氯仿抽提法，cDNA质量检测方法见参考文献[4]。取2?g总RNA进行cDNA合成（逆转录试剂盒，MBI公司），取1?lcDNA进行RT-PCR检测（30?l反应体系），设睾丸cDNA为阳性对照，不加模板为空白对照。基因序列，经计算机辅助设计，使用Omiga2软件设计引物，SSX2引物（MWGBiotech公司）序列为：Sense：GTGCTCAAATACCAGAGAAGATC；Antisense：TTTTGGGTCCAGA

4、TCTCTCGTG，退火温度为58℃，扩增产物大小为434bp。PCR反应完毕进行1.5%琼脂糖凝胶电泳分析。1.3统计学方法采用最新版本SPSS19.0统计软件包进行统计学分析。2结果2.1SSX2在HCC组织中低表达癌旁肝组织SSX2表达阳性率为0（0/40），HCC组织SSX2表达阳性率为27.5%（11/40），P值0.05），结果见表1。3讨论在SSX抗原基因家族中，包括有SSX1～SSX5等5种基因，其中SSX2属于肿瘤基因，4可以使滑膜肉瘤患者发生t（X，18）易位。SSX2最早在血清检测法（SEREX）分析中发现，被命名为HOM

5、-MEL-40蛋白，进一步通过NorthernBlot技术证实其为SSX2[5]。在以往的研究中，SSX2在HCC的mRNA表达率在30%～46.7%之间。Chen等[2]检测30例肝细胞癌中SSX2呈较高的表达率为46.7%，其余的研究表明SSX2在HCC中呈低频率的表达率在30%～35.7%之间。本研究RT-PCR检测结果为SSX2在HCC组织的mRNA表达率为27.5%（11/40），相应的癌旁肝组织均未检测到SSX2的mRNA，两组比较差异有统计学意义（P0.05）；在其余的5个指标中，在AFP阳性和阴性，Ⅰ～Ⅱ级和Ⅲ～Ⅳ级的病理分级，

6、直径>5cm和≤5cm的肿瘤，有无肝硬化及在患者>45岁和≤45岁的HCC组织中，SSX2的表达率都很接近，统计学结果均无相关性（P>0.05）。本项目的研究结果显示癌-睾丸抗原SSX2在广东地区的HCC组织中表达率稍低于以往的研究结果，是因为标本例数的原因还是不同地域组织的原因，有待于进一步的研究发现；而SSX2的表达情况与患者年龄、性别、病理分级、肿瘤大小、HBsAg及AFP的水平等无关，则与以往的报道一致。参考文献[1]ZahnM.Cancer/Testis（CT）GeneDatabase.CancerImmunologyonline，2

7、006.[2]ChenCH，ChenGJ，LeeHS，etal.Expressions4ofcancer-testisantigensinhumanhepatocellularcarcinomas.CancerLett，2001，164（2）：189.[3]肖瑞雪，农蔚霞，宋琼，等.癌-睾丸抗原SSX基因在肝细胞癌中mRNA水平的表达及意义.中国医药导报，2013，10（05）：4-6.[4]GureAO，StockertE，ArdenKC，etal.CT10：anewcancer-testis（CT）antigenhomologoustoCT

8、7andtheMAGEfamily，identifiedbyrepresentational-differenceanalysis.IntJCance