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时间:2019-02-01
《sm22α抑制球囊损伤诱导新生内膜的形成》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、中文摘要SM22Q抑制球囊损伤诱导的新生内膜形成摘要目的:经皮腔内冠状动脉成形术(percutaneoustransluminalcoronaryangioplasty,PTCA)是目前治疗冠心病的安全、有效方法之一,但其远期效果受到局部血管再狭窄(restenosis,RS)的影响。平滑肌22alpha(smoothmuscle22alpha,SM22a)是血管平滑肌细胞(vascularsmoothmusclecells,VSMC)的一种分化标志物,其表达具有平滑肌组织特异性和细胞表型特异性。为了探讨SM220t与血管内膜增生的关系,本实验利用本室构建的SM
2、22a腺病毒载体表达系统,将其导入内膜剥脱的颈总动脉壁,观察其在血管壁中的表达,以及对球囊损伤诱导的血管内膜增生的影响,揭示SM22a抑制内膜增生的分子机制。方法:1颈总动脉球囊损伤动物模型的复制及分组将SD大鼠(250~300g)常规麻醉消毒,沿颈部正中线切口,分离暴露左侧颈总动脉与颈外动脉,在颈外动脉远心端剪一楔形切口,球囊导管自切口插入至主动脉分支处,充盈球囊后将其拖回至颈外动脉切口处,如此反复三次,球囊减压后退出。夹闭颈总动脉近心端,由切口处注入20肛lpAd.SM220t溶液,结扎颈外动脉,关闭切121。20min后打开近心端血管夹,恢复血流。实验动物
3、分为三组,uninfected组、pAd组和pAd.SM220t中文摘要组。2标本的处理术后从股动脉放血处死大鼠。取大鼠颈总动脉并将血管分为两部分,一部分匀浆,提取组织蛋白,用Westernblot方法检测血管壁中SM22cr、p-Raf-1、P.MEKl/2和p-ERKl/2的表达变化。另一部分做病理切片,HE染色观察血管内膜增生情况并进行形态测量学分析,其余切片行免疫组织化学染色,观察SM22a、PCNA和p27在血管壁中的表达情况。结果:1外源性SM22a在血管壁中的表达Westernblot结果显示,pAd.SM22a组中SM22a的表达水平明显高于un
4、infected组和pAd组。同时,免疫组织化学染色亦显示,在pAd.SM22a转染组血管壁中,SM22a的表达量明显增加,阳性染色细胞数量及着色强度较其余两组明显增强,与Westernblot结果一致。2过表达SM220t抑制球囊损伤诱导的血管内膜增生形态学分析显示,球囊损伤14天后,uninfected组与pAd组中膜内的VSMC排列紊乱,内膜呈弥散性增厚,管腔缩小,内膜/中膜(intima/media,I/M)比值分别为2.43i-0.21和2.19+0.19,两组之间无明显差异。而pAd.SM220t组血管内膜的增生程度和I/M比值(o.68+0.12)
5、明显小于uninfected组和pAd组(尸6、M22a过表达抑制球囊损伤后血管壁中PCNA的表达,促进p27的表达。4SM22a过表达可抑制球囊损伤诱导的Raf-1、MEKl/2和EIⅨl/2的磷酸化活化Westernblot结果显示,与uninfected组和pAd组相比较,pAd.SM22ct组中Raf-1、MEKl/2和ERKl/2的磷酸化水平显著下降,SM22a对ERK/MAPK途径具有较强的抑制作用,而uninfected组与pAd组相比,上述三种蛋白磷酸化水平无显著差异。结果提示,SM22a过表达抑制Raf-1、MEKl/2和ERKI/2的磷酸化活化。结论:1成功建立颈总动脉腔内感染pAd.SM7、22ct腺病毒载体的模型。2SM22a过表达显著抑制内皮剥脱诱导的血管内膜增生。3外源性SM22a可下调增殖相关基因PCNA表达和上调细胞周期抑制因子p27表达。4SM22tx过表达可抑制球囊损伤诱导的Raf-1、MEKl/2和ERKl/2的磷酸化活化,通过阻断Raf-1.MEKl/2.ERKl/2通路级联活化而抑制新生内膜形成。关键词:SM22a;在体感染;球囊损伤;新生内膜。英文摘要SM22aInhibitsNeointimalHyperplasiaafterBalloonInjury。RatInv-ABSTRACTObjective:Percutaneou8、stranslumina
6、M22a过表达抑制球囊损伤后血管壁中PCNA的表达,促进p27的表达。4SM22a过表达可抑制球囊损伤诱导的Raf-1、MEKl/2和EIⅨl/2的磷酸化活化Westernblot结果显示,与uninfected组和pAd组相比较,pAd.SM22ct组中Raf-1、MEKl/2和ERKl/2的磷酸化水平显著下降,SM22a对ERK/MAPK途径具有较强的抑制作用,而uninfected组与pAd组相比,上述三种蛋白磷酸化水平无显著差异。结果提示,SM22a过表达抑制Raf-1、MEKl/2和ERKI/2的磷酸化活化。结论:1成功建立颈总动脉腔内感染pAd.SM
7、22ct腺病毒载体的模型。2SM22a过表达显著抑制内皮剥脱诱导的血管内膜增生。3外源性SM22a可下调增殖相关基因PCNA表达和上调细胞周期抑制因子p27表达。4SM22tx过表达可抑制球囊损伤诱导的Raf-1、MEKl/2和ERKl/2的磷酸化活化,通过阻断Raf-1.MEKl/2.ERKl/2通路级联活化而抑制新生内膜形成。关键词:SM22a;在体感染;球囊损伤;新生内膜。英文摘要SM22aInhibitsNeointimalHyperplasiaafterBalloonInjury。RatInv-ABSTRACTObjective:Percutaneou
8、stranslumina
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