cx3cr1+antibody对胫骨癌痛大鼠痛行为学及脊髓胶质细胞活化影响

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1、参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯36综j丕⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯41培i)lld,结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯53攻读硕士学位期间发表学术论文题目⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯55致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯56论文声明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯57论文审阅认定书⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯58徐州医学院硕士学位论文缩略词BSA哂心HEIba-1i．t．MODNS缩略词表Abbrevia

2、tion英文全称bovineserumalbumingliafibrillaryacidicproteinHemotocylinandEosinstaining中文全称牛血清白蛋白胶质纤维酸性蛋白苏木精伊红染色Ionizedcalciumbindingadaptormolecule一1离子钙接头蛋白分子．1intrathecalinjectionmeanopticaldensityNormalsalinePMWTPawmechanicalwithdrawalthresholdPTWLPBSPAGESDSTBSTPawthermalwithdrawallatencyphosp

3、hatebufferedsalinePolyacrylamidegelelectrophoresisSodiumdodecylsulfateTris．bufferedsalineTween．20鞘内注射平均光密度生理盐水机械缩足反射阈值热缩足反射潜伏期磷酸盐缓冲生理盐水聚丙烯酰胺凝胶电泳十二烷基硫酸钠嘶s缓冲液吐温20}l}}I。}。b徐州医学院硕士学位论文CX3CRlantibody对胫骨癌痛大鼠痛行为学及脊髓胶质细胞活化的影响中文摘要目的研究鞘内注射(intrathecalinjection，i．t．)CX3CRlantibody对胫骨癌痛大鼠疼痛行为学、肿瘤生长及脊髓

4、背角胶质细胞增殖活化的影响。方法采用Walker256乳腺癌细胞注入大鼠胫骨骨髓腔构建胫骨癌痛模型。雌性SD大鼠(150-1809)随机分为五组：假手术组(I组)、假手术+CX3CRlantibody1299组(II组)、骨癌痛组(III组)、骨癌痛+controlIgG组(IV组)、骨癌痛+CX3CRlantibody1299组(V组)。于手术当天和术后第一、二天，每天给药1次，分别于术前1d、术后1d、3d、5d、7d、9d、lld、14d、21d，测定大鼠机械痛敏、热痛敏及自发性疼痛评分；HE染色观察肿瘤骨的骨质破坏程度；Westernblot法测定脊髓CX3CRl蛋

5、白的表达；免疫荧光化学法检测脊髓背角小胶质细胞标记物离子钙接头蛋白分子．1(Iba．1)及星形胶质细胞胶质纤维酸性蛋白(黜)的表达来观察脊髓小胶质细胞和星形胶质细胞的增殖活化情况。结果(1)疼痛行为学：与I组相比，胫骨癌痛组大鼠在术后5天左右出现机械痛觉过敏(III、IV、V组)，第7天出现自发性疼痛评分升高(Ⅲ、Ⅳ组)(氏O．01)，II组上述指标无明显差别(尸>0．05)。与Ⅳ组比较，V组鞘内注射CX3CRlantibody1299后能明显提高癌痛大鼠的机械痛觉阈值，降低自发性疼痛评分(氏0．05，P<0．01)，III组上述指标无明显差异(尸>o．05)。各组之间热缩

6、足潜伏期未见明显的差异(户l>O．05)。(2)胫骨HE染色观察骨质破坏程度：术后21d癌痛各组(III、IV、V组)内肿瘤细胞增生活跃并侵犯周围组织。I、II组未见骨质破坏。(3)Westem2～lAI●徐州医学院硕士学位论文blot：与假手术组相比，术后7d、14d、21d癌痛大鼠CX3CRl表达上调(氏0．01)。(4)免疫荧光化学法：与I组相比，骨癌痛大鼠(III、IV、V组)脊髓背角小胶质细胞和星形胶质细胞数量明显增加，胞体突起增生肥大，呈激活状态，lba-1、GFAP平均光密度(meanopticaldensity，MOD)值显著增加(P

7、)。与Ⅳ组相比，鞘内注射CX3CRlantibody能明显抑制癌痛大鼠小胶质细胞和星形胶质细胞的活化，降低MOD(氏O．05，P<0．01)。结论1．鞘内注射趋化因子CX3CLl受体CX3CRlantibody，能够延迟骨癌痛大鼠痛觉过敏的产生，减轻已形成的痛觉过敏，但对肿瘤细胞的生长及组织破坏程度无明显影响；2．胫骨癌痛大鼠脊髓背角CX3CRl表达明显上调，鞘内注射CX3CRlantibody可以抑制胫骨癌痛大鼠脊髓小胶质细胞和星形胶质细胞的活化，提示趋化因子CX3CLl及其受体CX3CRl可能是胶质细胞参与骨癌