骨癌痛小鼠脊髓水平il-1β和tnf-α的表达及胶质细胞对其的影响

骨癌痛小鼠脊髓水平il-1β和tnf-α的表达及胶质细胞对其的影响

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1、徐州医学院硕士学位论文骨癌痛小鼠脊髓水平IL-1β和TNF-α的表达及胶质细胞对其的影响姓名:孙玉娥申请学位级别:硕士专业:麻醉学指导教师:申文20090401徐州医学院硕士学位论文缩略词表Abbreviation缩略词英文全称中文全称ACSFartificialcerebrospinalfluid人工脑脊液BSAbovineserumalbumin牛血清白蛋白CD11bthemono-antibodyofcomplementC3receptor补体C3受体单克隆抗体ELISAenzyme-linkedimmunosorbentassay酶联免疫吸附法FCFluorocit

2、rate氟代柠檬酸GFAPgliafibrillaryacidicprotein胶质原纤维酸性蛋白IL-1βInterleukin-1β白细胞介素-1βi.t.intrathecalinjection鞘内注射MEMminimummustmedium最小必须培养基MIMinocycline米诺四环素MODmeanopticaldensity平均光密度PBSphosphatebufferedsaline磷酸盐缓冲生理盐水TNF-αtumornecrosisfactor-α肿瘤坏死因子-α1徐州医学院硕士学位论文论文独创性声明本论文《骨癌痛小鼠脊髓水平IL-1β和TNF-α的表达

3、及胶质细胞对其的影响》是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。论文中除了特别加以标注和致谢的地方外,不包含其他人或机构已经发表或撰写过的研究成果。其他同志对本研究的启发和所做的贡献均已在论文中作了明确的声明并表示了谢意。作者签名孙玉娥日期:2009年03月论文使用授权声明本人完全了解徐州医学院有关保留、使用学位论文的规定,即:学校有权保留送交论文的复印件和电子文档,允许论文被查阅和借阅;学校可以公布论文的全部或部分内容,可以采用影印、缩印或其它复制手段保存论文。保密的论文在解密后遵守此规定。作者签名:孙玉娥导师签名:申文日期:2009年6月65徐州医学院硕士学位

4、论文论文审阅认定书研究生孙玉娥在规定的学习年限内,按照研究生培养方案的要求,完成了研究生课程的学习,成绩合格;在我的指导下完成本学位论文,经审阅,论文中的观点、数据、表述和结构为我所认同,论文撰写格式符合学校的相关规定,同意将本论文作为学位申请论文送专家评审。导师签名:申文日期:2009年6月66徐州医学院硕士学位论文骨癌痛小鼠脊髓水平IL-1β和TNF-α的表达及胶质细胞对其的影响中文摘要目的研究鞘内注射(intrathecalinjection,i.t.)氟代柠檬酸(fluorocitrate,FC)和米诺四环素(minocychine,MI)对骨癌痛小鼠疼痛、肿瘤生长

5、、脊髓背角胶质细胞增殖活化及脊髓水平IL-1β和TNF-α表达的影响。方法采用小鼠跟骨癌痛模型。将雄性C3H/He小鼠随机分为六组,包括:正常组、假手术组、癌痛组。其中癌痛组又因鞘内给药不同分为四个亚组:癌痛+人工脑脊液组(artificialcerebrospinalfluid,ACSF5µli.t.,ACSF组)、癌痛+FC组(0.50nmol5µli.t.,FC组)、癌痛+MI组(16µg5µli.t.,MI组)、癌痛+MI+FC组(8µgMI和0.25nmolFC混合液5µli.t.,MI+FC组)。术后每天给药1次,持续21天,并于术前、术后3d、5d、7d、10

6、d、14d、21d采用机械性痛觉过敏及冷痛敏测定小鼠行为学变化、H-E染色观察肿瘤骨的骨质破坏程度、免疫荧光法观察小胶质细胞及星形胶质细胞的增殖活化情况、酶联免疫吸附法(enzyme-linkedimmunosorbentassay,ELISA)及免疫荧光法检测各组小鼠脊髓水平IL-1β和TNF-α表达的变化,激光共聚焦显微镜镜检星形胶质细胞、小胶质细胞与细胞因子IL-1β、TNF-α的共表达情况。结果⑴疼痛行为学测定显示,与正常组相同时间点(3d、5d、7d、10d、14d、21d)相比,癌痛各组小鼠出现明显的疼痛现象,有显著性差异(P<0.05)。其中癌痛各组内,与AC

7、SF组相比,MI、FC、MI+FC组能明显提高小鼠机械性刺激及冷刺激疼痛阈值,有显著性差异(P<0.05)。⑵组织切片H-E染色观察骨质破坏程度结果显示:术后21d癌痛各组内肿瘤细胞增生活跃并侵犯周围组织,无显著性差异(P>0.05)。⑶免疫荧光化学法:与正常组相比,术后3d小鼠脊髓背角小胶质细胞的数量和形态,假手术组无显著性差异(P>0.05);而癌痛各亚组数量明显增加,2徐州医学院硕士学位论文胞体突起增生肥大,呈激活状态,有显著性差异(P<0.05),而术后14d始脊髓背角星形胶质细胞明显被激活。癌痛各组内,术

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