加味三棱丸对大鼠异位内膜细胞凋亡及其机制的的研究

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1、重庆医科大学硕士研究生学位论文英文缩写DEPCE2EDl’AEMSG删aHEIODIPmRNAmlnPPBSPCD英文缩略语对照表英文全称DiethylpyrocarbonateEstradiolEthylenediaminetetraaceticacidEndometriosisGonadotropinreleasinghormoneagonistHematoxylinandEosinIntegratedopticaldensityPeritonealinjectionMessageribonucleica

2、cidMinuteProgestogenPhosphatebuffered—salineProgrammedcelldeath中文全称焦碳酸二乙酯雌二醇乙二胺四乙酸子宫内膜异位症促性腺激素释放激素激动剂苏木精一伊红染色平均光密度腹腔注射信使核糖核酸分钟孕激素磷酸盐缓冲液程序性细胞死亡TUNELTerminaldeoxynucleotidyltransferase末端脱氧核苷酸转移酶介gM“lmediateddUTPnickendlabelingGrammo儿Microlite导的dUTP缺口末端标记克摩尔{升

3、微升重庆医科大学’研究生学位论文独创性声明本人申明所呈交的论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果.据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得重庆医科大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料,与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意.‘申请学位论文与资料若有不实之处,本人承担一切相关责任.学位论文作者签名:蕴杰:日期:丝鎏:篁:生:学位论文版权使用授权书本入完全了解重庆医科大学有关保护知识产权的

4、规定,即:研究生在攻读学位期间论文工作的知识产权单位属重庆医科大学.本人保证毕业离校后,发表论文或使用论文工作成果时署名单位为重庆医科大学。学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅.学校可以公布学位论文的全部或部分内容(保密内容除外),可以采用影印、缩印或其他手段保存论文.论文作者签名:纽.指导教师签名:驾噍至:Et期:旦企:堡:至里重庆医科大学硕士研究生学位论文加味三棱丸对大鼠异位内膜细胞凋亡及其机制的研究摘要子宫内膜异位症(Endometriosis,EMS,简称内异

5、症)是妇科顽症,病因复杂,且与恶性肿瘤密切相关,被世界卫生组织(WHO)列为疑难病症之一。目前治疗本病多以激素类药物、手术为主。由于长期激素治疗伴随的假孕、假绝经现象,以及手术治疗适应症的限制和并发症的产生,给患者身体和心理健康造成了许多不良影响。中医药根据辩证论治,在缓解临床症状、调经助孕等方面有其独特疗效,且毒副作用小,可长期服用。因此寻找疗效可靠的中药制剂,并探讨其作用机理具有重要的研究价值。三棱丸最早见于《经验良方》,是由三棱、莪术两味活血化瘀中药组成,用于瘀血经闭,行经腹痛,瘤瘕积聚,食积腹痛。异位

6、子宫内膜细胞在宫腔外种植并存活,与其自发性凋亡减弱或对凋亡信号不敏感等特性改变有关。本课题从细胞凋亡的角度观察活血化瘀方加味三棱丸主要成份(简称SLW)治疗子宫内膜异位症的疗效并探讨其作用机制。目的观察加味三棱丸主要成分对子宫内膜异位症大鼠异位内膜的发展及其细胞凋亡的影响;观察加味三棱丸主要成分对抗凋亡基因Bcl.2mRNA和诱导细胞凋亡的基因FasmRNA的作用。探讨加味三棱丸主要成分治疗子宫内膜异位症的疗效及诱导异位内膜细胞凋亡的机制。方法:重庆市科委科研皋金资助项目【2002]18号·992重庆医科大学

7、硕士研究生学位论文1、动物模型的制作选取健康雌。I生Wistar大鼠50只,体重180---一2209,每天定时观察阴道细胞涂片,选择动情周期4~5天并连续有2个动情周期的雌性大鼠,于动情期(阴道细胞涂片为角化上皮细胞时)行造模手术。以5%水合氯醛(O.7ml/lOOg)腹腔注射麻醉,常规消毒,在无菌条件下开腹,结扎右侧子宫两端后,从远端剪取长约1.5cm的子宫段,剔除脂肪组织,剪成5mmx5mm的子宫组织3块。一块送病理检验(确证为子宫组织),另外两块靠近腹膜血管处,缝于腹壁,以粘膜面朝向腹膜,浆膜面朝向腹

8、腔,关腹。每鼠腹腔注射庆大霉素0.1ml×3天。正常清洁饲养。2、模型纳入的标准建模后4周,观察阴道细胞学涂片,第二次剖腹观察异位子宫内膜的生长情况,并用游标卡尺测量移植灶大小。如果移植灶体积增大,体积>8mm3,呈隆起透亮的结节状、囊状,被结缔组织或大网膜覆盖并有血管形成,内有淡黄色透明囊液积聚。切取移植灶送检,证实移植灶中有子宫内膜上皮细胞、腺体及间质的生长。3、试验分组与用药除正常对照组外,另

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