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《GBT5413.13-1997-婴幼儿配方食品和乳粉维生素B6的测定.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、GB/T5413.13-1997前言维生素B。的测定有化学法、微生物法、分光光度法、气相色谱法等，本标准给出的反相高压液相色谱法，是在参阅了有关国内外资料的基础上，经反复实验而确定的，具有快速、经济、准确度高的优点。本系列标准从实施之日起，代替GB5413-85.本标准由中国轻工总会提出。本标准由全国乳品标准化中心归口。本标准负责起草单位:国家乳制品质量监督检验中心。本标准参加起草单位:卫生部食品卫生监督检验所、浙江省轻工业研究所、哈尔滨森永乳品有限公司、雀巢(中国)投资服务有限公司。本标准主要起草人:杨金宝、鄂来明、王尝、刘波。中华人民共和国国家标准
2、婴幼儿配方食品和乳粉GB/T5413.13-1997维生素B。的测定代替GB5413-85Milkpowderandformulafoodsforinfantandyoungchildren-DeterminationofvitaminBscontent1范圈本标准规定了用反相液相色谱法测定维生素B。的方法。本标准适用于婴幼儿配方食品和乳粉中维生素B。的测定。2方法提要样品经热水萃取等前处理后，经CIB色谱柱分离，荧光检测器检测，外标法定量维生素BB(毗哆醉、毗哆醛、毗哆胺)的含量。3试荆所有试剂，如未注明规格，均指分析纯;所有实验用水，如未注明其他要
3、求，均指三级水。3.1高峰氏淀粉酶(Take-Diastase),3.2盐酸溶液,c(HCI)为5.Omol/L,0.lmol/L,3.3氢氧化钠溶液,c(NaOH)为5.Omol/L,0.lmol/L,3.4冰乙酸:优级纯。3.5无水甲醉:色谱纯.36辛烷磺酸钠:优级纯.3.7三乙胺:体积分数_>99.9%.3.8标准溶液3.8.1毗哆醉、毗哆醛、毗哆胺标准贮备溶液，浓度均为200pg/mL,准确称取毗哆醉、毗哆醛、毗哆胺标准品各20.OOmg，用水溶解并定容至100mL容量瓶中.3.8.2毗哆醉、毗哆醛、毗哆胺标准工作溶液，浓度均为2.Opg/mL
4、a取1.OmL标准贮备溶液(3.8.1)，用水定容至100mL,4仪器常用实验室仪器及:4.1超声波振荡器。4.2高压液相色谱仪:带荧光检测器。4.3色谱柱:VarianMCH-IOpm30cmX4mm,C1。或具有同等性能的色谱柱。4.4酸度计。国家技术监，局199了一05一28批准1998一09一01实施G$/T5413.13-19975操作步骏5.1样品预处理5.1.1含淀粉的样品精确称取5.Og样品，放人150mL锥形瓶中，加入0.5gTaka淀粉酶(3.1)，再加入25mL45-50`C的蒸馏水，混合均匀后，用氮气排除瓶内空气，盖上瓶塞，置4
5、50C烘箱内30min，取出冷却至室温。5，.2不含淀粉的样品精确称取5.Og样品，放入150mL锥形瓶中，加入25mL60℃的燕馏水，振摇，静置5-lOmin，使样品充分溶解并降至室温。5.2测定液的制备5.2.，用盐酸溶液0.2)慢慢调节样品溶液的pH值至1.70，放置约lmin，再用氢氧化钠溶液(3.3)调节样品溶液的pH值至4.50,5.2.2将样品溶液转移到50mL容量瓶中，用蒸馏水反复冲洗锥形瓶，洗液合并于50mL容量瓶中，并用水定容至50mL.5.2.3把上述容量瓶放人超声波水浴(4.1)中，振荡1Omine5.2.4另取50mL容量瓶，
6、上面放入三角漏斗和滤纸，把样品溶液倒入其中，自然过滤。滤液再经0.45pm微孔滤膜加压过撼，用试管收集，即为样品待测液。5.3色谱条件检测灵敏度:0.002AU/MV.检测器条件:荧光激发波长E,:293nm，发射波长Em:395nm,柱温:300C,流速:1.OOmL/min流动相:体积分数为5。%的甲醇、0.20g/l00mL辛烷磺酸钠、体积分数为。.25%的三乙胺水溶液，用乙酸调pH=3.00,5.4定量分析(外标法)注射一定量的标准工作液(3.8.2)进人色谱仪，得到组分i的峰高(或峰面积)A;，注射等体积的样品待测液进入色谱仪，得到组分1的峰
7、高(或峰面积)B。6分析结果农述样品中维生素B‘的含量(mg/l00g)=Xff+Xff+Xf·············⋯⋯”(1)注:样品中维生素B,含f是各组分的含A之和.一c,;XB,XVX100样品中各组分含量(mg/100g)mXA,X1000式中:B;—样品组分i的峰高或面积;A;—标准工作液中组分1的峰高或面积;c=—标准工作液中组分1的质量浓度，pg/mLrm—样品的质量，9;V—样品溶液体积,mL,Gs/T5413.13-1997了允许睡同一样品两次测定值之差不得超过两次测定平均值的10%.
