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时间:2019-01-30
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1、90936{Y胰岛素和性激素对肾近端小管上皮细胞hUAT基因表达的影响中文摘要目的:1.观察不同浓度胰岛素对人肾近端小管上皮细胞(IlK一2)hUAT基因表达的影响。2.观察不同浓度的雌激素和睾酮对HK一2细胞hUAT基冈表达的影响。方法:体外培养HK一2细胞,使其早单层贴壁细胞,将其簧于刁i含血清的培养液中24h,然后分别加入不同浓度的胰岛素、雌激素和睾酮,培养48h后收集细胞抽提总RNA,荧光定量PCR共扩增hUAT和GAPDH片段,应用SDS软件计算hUATmRJNA相对表达量。应用SPSSll.0软件进行f检验和单因
2、素方差分析,显著性标准为P以OSo结果:(1)所有标本均能检测到hUATmRNA的表达。(2)随胰岛素浓度的增加(A2组一A4组)hUATmRNA的表达明碌降低。(3)A5组(HK一2细胞在含500ulU/ml胰岛素培养液中培养24h,再换用无胰岛素培养液继续培养24h),hUATmRNA表达水平明显高于A4组(尸以01)。A4组hUATmRNA的表达水平仅为对照组(AO组)的23.4%。(4)随雌激浓度增加(BO—B4),hUATmRNA的表达明显增加。其中B4组hUAT基因表达水甲为BO组的1.87倍。(5)随皋酮浓度(
3、CO—C4)增加,hUATmRNA表达水平明显降低。其11IC4组hUAT基因表达水平为CO组的19%。结论:(1)高胰岛素血症lj:r能通过下调肾小管hUAT基因表达和促进肾小管对尿酸的霞吸收,使肾脏尿酸排泄减少,导致高尿酸血症。(2)雌激素可能通过上调hUAT基因表达。促进肾脏尿酸排泄,预防高尿酸血症的发生。这可能是绝经前后女性高尿酸和痛风发病率明显不同的重要原因。(3)睾酮可能通过下调hUAT的基因表达,使肾脏尿酸排泄减少,这可能是男性高尿酸和痛风发病率明显高于女性的重要原因。研究生:宋娓(内分泌学)导师:李长贵教授袁
4、鹰副教授关键词:胰岛素;雌激素;睾酮;高尿酸血症TheeffectsofinsulinandSeXhormoneOUttheexpressionofhUATgeneintheIlK·2cell.Abstract0bjective:1.TostudytheroleofhyperinsulinemiaplaysinthemorbilityofviathehUAThyperuricemiawaybyobservingtheeffectsofdifferentlevelsofinsulinontheexpressionofhUATi
5、nHK-2cells.2.TostudytheroleofsexualhormoneplaysinthemorbilityofhyperuricemiaviathehUATwaybyobservingtheeffectsofdifferentlevelsofsexualhormoneontheexpressionofhUATinHK-2cells.Methods:TheexperimentwasbasedontheunilamellarHK-2cellsculturedinvitro.Thesecellswerefirstl
6、yculturedinmediawithoutserumfor24h,thenculturedinmediawithdifferentlevelsofinsulinorestrogen(EDortestosteronefor48hours.ThecellswerecollectedtoextracttotalRNA,andthebUATgeneandGAPDHwereamplifiedatthesametimebythemeansoffluorescentquantitationPCR.Atlastweanalyzedthe
7、relativeexpressionofhUATmRNAbySDSsoftware.ThedataWasanalyzedbyT-testandone—wayanalysisofvarianceinSPSSll.0,andthestandardofsignificancewasP8、ssionlevelofhUATmRNAwasobviouslydownregulated.(3)TheexpressionlevelofhUATmRNAingroupA5(inwhichtheHK一2cellSwerefirstlyculturedinmediawith500uIU/ml
8、ssionlevelofhUATmRNAwasobviouslydownregulated.(3)TheexpressionlevelofhUATmRNAingroupA5(inwhichtheHK一2cellSwerefirstlyculturedinmediawith500uIU/ml
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