【硕士论文】胰岛素和性激素对肾近端小管上皮细胞hUAT基因表达的影响.pdf

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1、90936{Y胰岛素和性激素对肾近端小管上皮细胞hUAT基因表达的影响中文摘要目的：1．观察不同浓度胰岛素对人肾近端小管上皮细胞(IlK一2)hUAT基因表达的影响。2．观察不同浓度的雌激素和睾酮对HK一2细胞hUAT基冈表达的影响。方法：体外培养HK一2细胞，使其早单层贴壁细胞，将其簧于刁i含血清的培养液中24h，然后分别加入不同浓度的胰岛素、雌激素和睾酮，培养48h后收集细胞抽提总RNA，荧光定量PCR共扩增hUAT和GAPDH片段，应用SDS软件计算hUATmRJNA相对表达量。应用SPSSll．0软件进行f检验和单因

2、素方差分析，显著性标准为P以OSo结果：(1)所有标本均能检测到hUATmRNA的表达。(2)随胰岛素浓度的增加(A2组一A4组)hUATmRNA的表达明碌降低。(3)A5组(HK一2细胞在含500ulU／ml胰岛素培养液中培养24h，再换用无胰岛素培养液继续培养24h)，hUATmRNA表达水平明显高于A4组(尸以01)。A4组hUATmRNA的表达水平仅为对照组(AO组)的23．4％。(4)随雌激浓度增加(BO—B4)，hUATmRNA的表达明显增加。其中B4组hUAT基因表达水甲为BO组的1．87倍。(5)随皋酮浓度(

3、CO—C4)增加，hUATmRNA表达水平明显降低。其11IC4组hUAT基因表达水平为CO组的19％。结论：(1)高胰岛素血症lj：r能通过下调肾小管hUAT基因表达和促进肾小管对尿酸的霞吸收，使肾脏尿酸排泄减少，导致高尿酸血症。(2)雌激素可能通过上调hUAT基因表达。促进肾脏尿酸排泄，预防高尿酸血症的发生。这可能是绝经前后女性高尿酸和痛风发病率明显不同的重要原因。(3)睾酮可能通过下调hUAT的基因表达，使肾脏尿酸排泄减少，这可能是男性高尿酸和痛风发病率明显高于女性的重要原因。研究生：宋娓(内分泌学)导师：李长贵教授袁

4、鹰副教授关键词：胰岛素；雌激素；睾酮；高尿酸血症TheeffectsofinsulinandSeXhormoneOUttheexpressionofhUATgeneintheIlK·2cell．Abstract0bjective：1．TostudytheroleofhyperinsulinemiaplaysinthemorbilityofviathehUAThyperuricemiawaybyobservingtheeffectsofdifferentlevelsofinsulinontheexpressionofhUATi

5、nHK-2cells．2．TostudytheroleofsexualhormoneplaysinthemorbilityofhyperuricemiaviathehUATwaybyobservingtheeffectsofdifferentlevelsofsexualhormoneontheexpressionofhUATinHK-2cells．Methods：TheexperimentwasbasedontheunilamellarHK-2cellsculturedinvitro．Thesecellswerefirstl

6、yculturedinmediawithoutserumfor24h，thenculturedinmediawithdifferentlevelsofinsulinorestrogen(EDortestosteronefor48hours．ThecellswerecollectedtoextracttotalRNA，andthebUATgeneandGAPDHwereamplifiedatthesametimebythemeansoffluorescentquantitationPCR．Atlastweanalyzedthe

7、relativeexpressionofhUATmRNAbySDSsoftware．ThedataWasanalyzedbyT-testandone—wayanalysisofvarianceinSPSSll．0，andthestandardofsignificancewasP

8、ssionlevelofhUATmRNAwasobviouslydownregulated．(3)TheexpressionlevelofhUATmRNAingroupA5(inwhichtheHK一2cellSwerefirstlyculturedinmediawith500uIU／ml