整合素β1对人滋养层细胞粘附和迁移影响

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1、TheEffectofIntegrinβ1onAdhesionandMigrationofHumanVillousTrophoblastCellsAThesisSubmittedtoChongqingUniversityinPartialFulfillmentoftheRequirementfortheDegreeofMasterofSciencebyGuanZhangweiSupervisor:Prof.DengXiaoyanMajor:CellBiologyCollegeofBioengineeringofChongqingUniversity,Chongqing,ChinaApr

2、il2008重庆大学硕士学位论文中文摘要摘要在人胎盘发育过程中，滋养层细胞对子宫内膜血管的入侵至关重要。滋养层细胞的整个入侵过程是先进入毛细血管、再迁移至子宫螺旋动脉并在此过程中对子宫动脉血管系统进行重构。这一迁移过程提示，滋养层细胞的迁移方向是与血液的流动方向相反的,即滋养层细胞是逆血流而上的。为了弄清滋养层细胞在妊娠过程中的生理作用以及入侵子宫脉管系统的机理，学术界已做了大量卓有成效的工作，但是关于滋养层细胞在血管系统中逆流迁移机制的研究却极其有限。因此，为了深入了解和认识体内滋养层细胞逆血流迁移行为和调节机制，本文从细胞粘附分子的角度分析了滋养层细胞β1整合素的表达与其迁移行为的

3、相关性。本论文的具体研究工作和结论如下：首先，本文建立了一种简单稳定的人体滋养层细胞原代培养方法。结果表明：采用胰酶+DNA酶辅助消化的方法可显著提高原代培养滋养层细胞的产量；同时，通过Percoll非连续梯度离心以及相应的差速贴壁和机械刮除等纯化步骤后得到的滋养层细胞纯度相对较高，可达95%以上，且细胞形态单一，生长稳定，细胞活力强。这说明本文采用的方法适合滋养层细胞的分离、纯化和体外培养。本文还采用微管吸吮技术对滋养层细胞的粘附力学特性进行了研究。结果表明：滋养层细胞的粘附力随I型鼠尾胶原浓度的增加而呈显著的线性增加趋势，表现出明显的浓度依赖关系。当与内皮细胞接触时，滋养层细胞表现

4、出较高的粘附力，表明与内皮细胞的接触可显著增强滋养层细胞的粘附力学行为。此外，本文还从粘附分子的角度对滋养层细胞与胶原和内皮细胞的粘附力学特征进行了分析，结果提示在滋养层细胞的粘附过程中，β1整合素也起着重要的调节作用。最后，本文研究了体内绒毛组织和体外培养的滋养层细胞整合素表达的特性。结果表明：β1整合素在迁移显型滋养层细胞上高度表达。在剪切应力作用下，滋养层细胞β1整合素的表达随剪切应力作用的时间的延续而显著变化，剪切应力增强了滋养层细胞β1整合素的表达。当滋养层细胞与内皮细胞共培养时，β1整合素的表达较单独培养时显著增强。这些结果提示，β1整合素在滋养层细胞对内皮细胞的粘附和迁移

5、过程中有着重要的关系。本文的研究结果提示我们，滋养层细胞在体内的逆流迁移行为可能并不是一种细胞直接从子宫毛细血管移动到螺旋动脉的逆血流运动，而可能是一种定向分裂/增殖行为。即，在与血管内皮细胞接触时，滋养层细胞通过上调粘附分子的表I重庆大学硕士学位论文中文摘要达而拥有足够强的粘附力对抗血流冲击并稳定地粘附于血管内壁；尔后，细胞通过逆血流方向的定向分裂/增殖，达到逆血流迁移的目的。关键词：滋养层细胞，整合素β1，粘附，细胞迁移，微管吸吮技术II重庆大学硕士学位论文英文摘要ABSTRACTDuringthedevelopmentofhumanplacenta,trophoblastcell

6、s(TCs)invasionof,andmigrationwithintheuterinevasculatureisanessentialprocessfortheremodelingoftheuterinevasculature.Invivo,thecoursesofcellmigrationarethatTCsfirstlyinvadeintothecapillaryvessels,thenmigratewithinuterinevasculature,andeventuallyresidewithinthespiralarteries.Thisindicatesthatthedi

7、rectionofTCmigrationwithintheuterinevasculatureisagainstthebloodstream.InordertounderstandthephysiologicalrolesofTCsinthepregnancyprocessandthemechanismofTCinvasionintotheuterinevasculature,agreatamountofstudieshavebeencarri