的应用rnai抑制survivin基因诱导a549细胞凋亡的研究

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1、重庆医科大学硕士学位论文应用RNAi抑制survivin基因诱导A549细胞凋亡的研究姓名:刘永全申请学位级别:硕士专业:内科学(呼吸内科)指导教师:江涛20070501重庆医科大学硕士研究生学位论文英文缩写L心P!AGE10×BpPCREBEDTAAGAGEODNSCLCDEPCR1二PCRPBSA549BB13.aetin~nTRN黜RNasinBSADMSORNAiSiRNADNA符号说明英文全名InhibitorofApotosisfamilyofproteinPolyaerylamidegelelectrophoresis10Xbufferbasepa

2、irPolymerasechainreactionEthiditimbromideEthylenediaminetetraaeetateAgarosegeleleetrophoresisAgarosegeleleelrophoresisOpticaldensitynon-smaUcelllungcanccrdiethylpyrocarbonatereversetranscdptasephosphatebufferedsalinebromphenolbluebetaactinMosmannTetrazoliumTestribonucleaseinhibitorbo

3、vine,serumalbttmindimethylsulfoxideRNAinterferencesmallinterferingRNAdeoxyribonucleicacid中文全名凋亡抑制蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳PCR缓冲液碱基对聚合酶链反应溴化乙啶乙二胺四乙酸琼脂糖琼脂糖凝胶电泳光密度非小细胞肺癌焦碳酸二乙酯反转录PCR磷酸盐缓冲生理盐水肺腺癌细胞株溴酚蓝肌动蛋白13四唑盐比色法RNA酶RNA酶抑制剂牛血清白蛋白二甲基亚砜RNA干扰RNA小干扰RNA脱氧核糖核酸重庆医科大学硕士研究生学位论文RNAcDNASDSDABTrisribonucleicacidc

4、omplementaryDNAsodiumdodecylsulfatediaminobenzidineUis(hydroxymethyl)aminomethane2核糖核酸互补DNA十二烷基硫酸钠二氨基联苯胺三羟甲基氨基甲烷重庆医科大学研究生学位论文独创性声明‘:/、申明所呈交的论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研“。譬借我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他j-=:经发袁或撰写过的研究成果,也不包含为获得重庆医科大学或其他教育机构:P学位或证书而使用过的材料,与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已j.诊,中作了明确的说明并

5、表示谢意.掣清拳位论文与资料若有不实之处,本人承担一切相关责任.学位论文作者签名:童I壹兰乞日期.巡Z=幺!:丝学位论文版权使用授权书本人完全了解重庆医科大学有关保护知识产权的规定,即:研究生在攻读学位期问论文工作的知识产权单位属重庆医科大学.本人保证毕业离校后,发表论,置f:j!!削论文工作成果时署名单位为重庆医科大学.学校有权保留并向国家有关,‘“z机}勾送交论文的复印件和琏盘,允许论文被查阅和借阅.学校可以公布学-一又的全部或部分内容(保密内容除外),可以采用影印、缩印或其他手段保fj诊‘t。论文作者签名:指导教师签名:日期:2=!二≥:幺互;,重庆医科大

6、学硕士研究生学位论文用RNA干扰抑制survivin基因表达诱导肺腺癌A549细胞的凋亡的研究摘要肺癌是当今世界上发生率和死亡率最高的恶性肿瘤之一,尽管采用了手术、放疗和化疗等综合治疗措施,但疗效不佳。其中一个重要原因是肿瘤组织抗凋亡相关基因表达上调,癌细胞凋亡减少,癌细胞整体耐药增加。很多研究表明,通过反义核酸技术抑制肿瘤抗凋亡基因表达,选择性诱导细胞凋亡,对于有效的清除肿瘤细胞具有重要意义,是肿瘤基因治疗的一项重要策略。然而,诱导凋亡的靶向性差和特异性低是目前限制其疗效的两个重要因素。选择肿瘤细胞特异表达基因并特异的抑制其表达,是靶向诱导肿瘤凋亡的关键。RN

7、A干扰(鼢怆i)技术是近几年发展起来的一种阻抑基因表达的新方法,它具有高效率、高特异性、显效快、可以向子代遗传和可同时进行多基因研究等优点,可望作为反义核酸的优化方式成为肿瘤基因治疗的新手段。Survivin是最近发现的一种新的IAPS家族蛋白,是迄今发现的最小的IAPs蛋白,也是迄今为止发现的最强的凋亡抑制因子。由于其表达的特异性(仅在人类胚胎组织和肿瘤组织中表达)及对细胞增殖和凋亡的双重作用,使其成为肺癌基因治疗研究的理想靶目标。因此,通重庆医科大学硕士研究生学位论文过应用RNA干扰技术抑带lJsurvivin基因的表达,观察分析其对肺腺癌A549细胞增殖和

8、凋亡的影响,推断其与肺癌

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