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1、谷氨酰转肽酶细胞合成L-谷氨酰正丙胺徐礼生收稿日期：基金项目：安徽省高校自然科学研究重点项目（KJ2017A440）；安徽省质量工程项目（2015zjjh034、2015ckjh108、2016jyxm1038）作者简介：徐礼生(1980-)，男，安徽安庆人，理学博士，副教授，E-mail:xulisheng111@163.com。1,2，王梦婷1，高贵珍1，赵亮1，曹稳根1，焦庆才2（1.宿州学院生物与食品工程学院，安徽宿州234000;2.南京大学医药生物技术国家重点实验室，江苏南京210093）摘要：以L-谷氨酰肼和正丙胺为底物，利用谷氨酰转肽酶细胞合成L-谷氨酰正丙胺
2、，考察底物浓度、温度、pH、催化剂用量对合成L-谷氨酰正丙胺的影响。结果表明，谷氨酰转肽酶细胞能有效合成L-谷氨酰正丙胺，在温度37℃、pH=10.0、L-谷氨酰肼浓度为0.4mol/L，正丙胺浓度为3mol/L的条件下，谷氨酰转肽酶细胞催化剂添加量为0.2g，300mL反应体系L-谷氨酰正丙胺的收率为97.9%，经高效液相色谱法测定，L-谷氨酰正丙胺纯度为99.8%。关键词：谷氨酰转肽酶；L-谷氨酰正丙胺；L-谷氨酰肼；生物工程SynthesisofPropyl-L-GlutaminebyGlutamyltranspeptidaseCellXULi-sheng1，2,WAN
3、GMeng-ting1,GAOGui-zhen1,ZHAOLiang1,CaoWen-gen,JIAOQing-cai2(1.DepartmentofLifeandFoodScience,SuzhouUniversity,Suzhou234000,Anhui,China;2.StateKeyLaboratoryofPharmaceuticalBiotechnology,NanjingUniversity,Nanjing210093,Jiangsu,China)Abstract:Synthesisofpropyl-L-glutaminebyglutamyltranspeptid
4、asecellswasinvestigated.WithL-glutamlhydrineandpropylamineassubstrate,thefactorssuchassubstrateconcentration,pHandtemperaturewereinvestigated.Synthesisofpropyl-L-glutaminebyglutamyltranspeptidasecellswaseffective.TheresultsindicatedthatwhentheconcentrationofL-glutamlhydrinewas0.4mol/L,theco
5、ncentrationofpropylaminewas3mol/L,glutamyltranspeptidasecellscatalyst dosagewas0.2g,reactiontemperaturewas37ºC,andpHwas10.0.Theyieldofpropyl-L-glutaminewas97.9%in300mlreactionvolume.Thepurityofpropyl-L-glutaminewas99.8%byhighperformanceliquidchromatography.Keywords:glutamyltranspeptidase;pr
6、opyl-L-glutamine;L-glutamlhydrineFoundationitems:TheKeyProjectofNaturalScienceResearchinUniversitiesinAnhuiProvince(KJ2017A440);AnhuiQualityEngineerProgram(2015zjjh034,2015ckjh108,2016jyxm1038)谷氨酰转肽酶作为一种重要的酶参与谷氨酰循环反应，它能特异性地催化谷氨酰基团的迁移过程，从而获得含有谷氨酰基团化合物[1,2]。谷氨酰转肽酶来源广泛，稳定特性较好[3]。动物脏器和变形杆菌可纯化得到
7、γ-谷氨酰转肽酶，它对谷胱甘肽有转肽以及水解作用[4-5]。γ-谷氨酰转肽酶在临床检查中可作为生物标识物[6]。L-谷氨酰基类化合物具有重要生物活性，医学上该类物质应用广泛，利用谷氨酰转肽酶可制备L-谷氨酰基类化合物，如谷胱甘肽、茶氨酸、谷氨酰甲胺等谷氨酰基类物质[7]。ChenYY等人利用Bacilluslicheniformis中γ-谷氨酰转肽酶催化合成γ-L-谷酰基-S-丙烯基-L-半胱氨酸，并且对来源于Bacilluslicheniformis中γ-谷氨酰转肽酶结构、功能和稳定性进行了研究[8-
