γ谷氨酰转肽酶(ggt) 速率法

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1、项目γ谷氨酰转肽酶（GGT）方法速率法目录1.检测原理2.标本采集与处理2.1受检者的准备2.2静脉采血2.3抗凝剂2.4标本处理3.试剂3.1试剂3.2校准血清3.3试剂的稳定性4.仪器5.操作6.计算7.操作性能7.1精密度7.2准确度7.3灵敏度7.4可报告范围7.5特异性7.6干扰8.参考值9.临床意义附录A:参数1.检测原理r-谷氨酰对硝基苯胺和双甘肽在r-谷氨酰转肽酶作用下，生成对硝基苯胺及r-谷氨酰双甘肽，所释放出的对硝基苯胺与r-谷氨酰转肽酶活力成正比，通过在405nm处测定对硝基苯胺的

2、变化，可求出r-谷氨酰转肽酶活力。r-GTr-谷氨酰-3羧基-对硝基苯胺+双甘肽------------对硝基苯胺+r-谷氨酰双甘肽+2.标本采集与处理2.1受检者的准备：病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。注意有无应用影响测试项目的药物。此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。2.2静脉采血：除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。体位影响水分

3、在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。2.3抗凝剂：血浆使用肝素或EDTANa2（1mg/mL）作为抗凝剂。2.4标本处理：血标本室温放置30min～45min后离心分离血清或血浆，在两小时内检测完毕；如两小时内不能检测完毕，将离心分离血清或血浆置洁净试管加盖2-8℃保存。3．试剂3.1试剂：本科使用湖南永和阳光科技有限责任公司GGT试剂盒，为液体双试剂，各组分如下：组成R1:R2=5:1混合后溶液的浓

4、度R1:Tris缓冲液:100mmol/LPH=8.25甘氨酰甘氨酸150mmoll/L稳定剂R2:起动液r-谷氨酰-3羧基-对硝基苯胺2.9mmol/L3.2：校准血清使用湖南永和阳光科技有限责任公司提供的40项校准血清。校准频次：空白定标：每日需做试剂空白定标。全点定标：试剂换批号使用时或质控结果超过规定的2SD范围，需要全点定标。3.3试剂的稳定性：原包装试剂储存在2-8℃至标签所示失效日期。18-22℃稳定28天，试剂应避免污染。当试剂空白吸光度高于1.2时，试剂按照失效处理。多项校准血清在2-

5、8℃储存至标签所示失效日期，复溶后-20℃保存，可稳定一个月，只可冻融一次，避免反复冻融。参见校准血清说明书。4．仪器KONELAB30型号仪器。性能：波长405nm，仪器测定吸光度的灵敏度应达到0.001ABS以上。5．操作样品为血清或肝素/EDTA抗凝血浆。本法为速率法。参数见后附，附录A。试剂参数设置、定标操作以及样本检测常规操作，见仪器操作规程。6．计算ΔA/min×Vt×1000GGT(U/L)=-----------------------------=ΔA/min×Fe×Vs×d式中：ΔA

6、/min——每分钟吸光度变化率；e——18.5摩尔吸光系数；Vt——反应液总体积（ml）；d——1比色杯光径（cm）；1000——变化因数；Vs——标本体积（ml）；7．操作性能7.1精密度：批内CV<0.81%，批间CV<3.05%。7.2准确度：检测结果的相对不准确度≤±10%。7.3灵敏度：r-谷氨酰转肽酶浓度为：300U/L时，吸光度变化率ΔA340nm/min为0.126～0.154。7.4可报告范围：血清与试剂用量之比为1:24时，测定上限为500U/L。7.5特异性：该方法测量值在给定值的

7、90%-110％范围内。7.6干扰：内源性干扰物溶血为1000mg/ml、脂血2000mg/ml、黄疸30mg/ml、抗坏血酸300mg/ml对测试结果无明显影响。8．参考值男：11～49U/L；女：7～32U/L。9．临床意义r-谷氨酰转肽酶是一种肽移换酶，它催化谷胱甘肽或其它含谷氨酰基多肽上的谷氨酰基团转移到其它合适受体上。血清中r-GT(亦称为GGT)主要来自肝脏，因此各种肝胆系统疾病可引起血清中r-GT活力的增高。附录A:参数