herceptin对宫颈癌细胞抑制及其和卡铂协同作用机制探讨

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1、第四军医大学硕士学位论文Herceptin对宫颈癌细胞的抑制及其与卡铂协同作用机制的探讨姓名：王巍申请学位级别：硕士专业：妇产科学指导教师：辛晓燕20070501第四军医大学硕士学位论文缩略语表缩略语英文全称中文全称ADCCAntibody-dependentcell-mediated抗体依赖的细胞cytotoxicity介导的细胞毒作用bpBaseparis碱基对CAMCelladhesionmolecule细胞粘附分子CBPCarboplatin卡铂cDNAComplementaryDNA互补DNADABDia

2、minobenzidine焦磷酸二已脂DEPCDiethylipyrocarbonat二乙基焦碳酸dNTPDeoyribonucleosidetriphosphate脱氧三磷酸核苷DMEMDulbecco'sminimumessential达尔伯克必需基medium本培养基DMSODimethylsulphoxide二甲基亚砜EDCExtracellulardomain胞外域EDTAEthylenediaminetetraaceticacid乙二氨四乙酸EGFREpidermalgrowthfactorrecept

3、or表皮生长因子受体FCMFlowcytometry流式细胞术FCSFatalcalfserum胎牛血清FISHFluorescenceinsituhybridization荧光原位杂交G1G1period(pre-synthesisgap)G1期（DNA合成前期）G2G2period(post-synthesisgap)G2期（DNA合成后期）IHCImmunohistochemistry免疫组织化学1独创性声明秉承学校严谨的学风与优良的科学道德，本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究

4、成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，不包含本人或他人已申请学位或其他用途使用过的成果。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了致谢。申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担一切相关责任。论文作者签名：日期：保护知识产权声明本人完全了解第四军医大学有关保护知识产权的规定，即：研究生在校攻读学位期间论文工作的知识产权单位属第四军医大学。本人保证毕业离校后，发表论文或使用论文工作成果时署名单位仍然为第四军医大学。学校可以公布论

5、文的全部或部分内容（含电子版，保密内容除外），可以采用影印，缩印或其他复制手段保存论文。学校有权允许论文被查阅和借阅，并在校园网上提供论文内容的浏览和下载服务。论文作者签名：导师签名：日期：第四军医大学硕士学位论文Herceptin对宫颈癌细胞的抑制及其与卡铂协同作用机制的探讨硕士研究生：王巍导师：辛晓燕教授辅导教师：刘玉副教授第四军医大学西京医院妇产科西安710032中文摘要子宫颈癌是妇科常见的恶性肿瘤之一，其发病率和死亡率居妇科恶性肿瘤的首位。由于筛查的推广应用，其发病率和死亡率明显下降，但近年来宫颈腺癌(包括

6、腺鳞癌)的发病比率却呈上升趋势。由于腺癌对放疗不敏感，临床化疗效果欠佳，因此寻找一种合理的治疗方案在临床上具有重要意义。c-erbB-2HER-2/neu又称c-erbB-2基因，其编码蛋白称P185，是一种跨膜ras受体糖蛋白，能参与细胞生长、分化调节。Ras基因编码蛋白称P21，可以与GTP或GDP高特异性结合，具有生物开关作用。HER-2/neu与配体结合可以激活Ras，导致Ras/Raf/MAPK途径的活化，诱导基因转录及细胞增殖。Herceptin是针对HER-2/neu的人源化单克隆抗体，是一种针对酪氨

7、酸激酶的靶向性药物，具有阻断信号转导和抑制细胞增殖的作用。本实验以宫颈腺癌HeLa、鳞癌SiHa细胞作为靶细胞，研究Herceptin对两种细胞的抑制差异、与卡铂（Carboplatin，CBP）间的协同效应。同时通过检测HER-2/neu和其下游的Ras癌基因变化来推测Herceptin对宫颈癌细胞的抑制机制。以此对Herception应用于宫颈腺癌的治疗进行有效3第四军医大学硕士学位论文性评估。目的：1.研究HER-2/neu和Ras癌基因在宫颈腺癌、鳞癌组织和细胞中的表达及与临床病理的关系，以推测在宫颈癌发生

8、发展中的作用；2.观察Herceptin对宫颈腺癌HeLa、鳞癌SiHa细胞生长的抑制差异，探讨Herceptin与卡铂的协同作用情况及机制；3.研究Herceptin抑制宫颈癌细胞增殖机制。方法：1.免疫组化SP法检测20例正常宫颈、40例宫颈腺癌和45例鳞癌组织c-erbB-2ras中以及宫颈腺癌HeLa细胞、鳞癌SiHa细胞中P185和P21蛋白的表达