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1、小细胞肺癌和低分化鳞状细胞癌中Smac>Survivin与PCNA蛋白表达和预后探究［摘要］目的探讨小细胞肺癌(SCLC)和低分化鳞状细胞癌(PDSCC)的分子学差异，为临床准确诊断提供依据。方法经病理确诊为SCLC患者38例,PDSCC患者46例,均取组织样本制成切片，行免疫组化检验。结果SCLC患者Smac蛋白低表达率较高，Survivin蛋白阳性表达率较高，PCNA蛋白I、II、IV级表达率较低，与PDSCC患者比较差异有统计学意义(P0.05),2年生存率PDSCC患者明显低于SCLC患者(P0.05)o结论Smac蛋白低表达、Survivin蛋白阳性可作为SCLC和PDSCC检验和
2、区分的指标之一，而PCNA蛋白分级是否具有明确的指导意义仍需进一步的相关研究来认证。［关键词］肺小细胞癌；低分化鳞状细胞癌；蛋白表达;预后［中图分类号］R734.2［文献标识码］A［文章编号］1673-7210(2013)05(a)-0028-03小细胞肺癌(SCLC)属于肺癌的一种尚未分化分型的类型，据统计其发生率在肺癌患者中占20%〜25%,其恶性程度较高，癌细胞生长和发展速度较快，更易较早的引起淋巴转移，在各类肺癌的治疗中，SCLC的预后相对较差，严重影响患者的生命安全[1-2]o肺鳞状细胞癌主要来源于支气管上皮细胞，属于恶性上皮性肿瘤，低分化鳞状细胞癌(PDSCC)在肺鳞状细胞癌中分
3、化程度低，多以中央型出现，显微镜主要表现出与小细胞癌类似的特征[3-4]o因此，临床诊断过程中易将SCLC与PDSCC混淆，造成误诊，严重影响治疗和患者预后，延误治疗时机。本研究选取SCLC和PDSCC患者作为研究对象，旨在探讨两种病症的分子学差异，为临床准确诊断提高依据，现报道如下：1资料与方法1.1一般资料病例资料选取2008年1月〜2010年1月收治和确诊的肺癌患者，患者均由3名以上临床医生会诊以及石蜡病理切片检验得出结论。包括SCLC患者38例，诊断标准参照免疫组化指标Syn、ChrA.CK和CD56,其中男32例，女6例，年龄45〜72岁，平均(55.0±5.4)岁；PDSCC患者
4、46例，诊断标准参照WHO的相关病理分级标准判定为III级分化，其中男38例，女8例，年龄48〜74岁，平均(56.2±5.0)岁。肺癌患者临床分期参照国际抗癌联盟(UICC)的TNM分期标准，两组患者分期情况详见表lo两组患者的年龄、性别及临床分期情况比较差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性。1.2方法两组患者均临床取病理组织样本，并分别以常规石蜡包埋制作成病理切片共6份，厚度为4um,两组均取切片行免疫组化检验。具体方法：石蜡样本热抗原修复后以磷酸盐缓冲液(PBS)冲洗，并以H202孵育抑制内源性过氧化物酶的活性。切片加入山羊血清封闭处理，除血清部分，分别滴入鼠抗人Smac.Su
5、rvivingPCNA单克隆体，孵育后以PBS冲洗，再加入链霉卵白素工作液后PBS冲洗，滴入新鲜DAB溶液行显色反应，并于镜下观察染色适中后用苏木素复染，行常规脱水、封片、观察、记录。1.3应用试剂鼠抗人单克隆体采用美国Cruz公司生产的Smac、北京中山生物技术有限公司生产的Survivin和PCNA。1.4观察指标所有患者均随访2〜4年，分别记录两组患者蛋白表达情况，并记录患者2年预后情况。1.5诊断标准Smac以细胞质液呈现棕黄色或棕褐色颗粒状物质且背景清晰为阳性，并利用5个不同的高倍视野观察计数，每个视野计数500个细胞，阳性细胞数W10%计为(-),细胞含量在11%〜25%计为(+
6、),含量在26%〜50%计为(++),251%计为(+++),认为(1)(+)(++)为Smac蛋白低表达，(+++)为Smac高表达［5-7］。Survivin以细胞质液呈现棕黄色或棕褐色颗粒状物质且背景清晰为阳性，计算阳性细胞在切片中的百分比，以0%计为0分，1%〜25%计为1分，26%〜50%计为2分，$51%计为3分；取染色强度中无色计0分，淡黄色计1分，棕黄色计2分，棕褐色计3分，将两项计分相加,总分为0计为(-)，1〜2分计(+),3〜4分计(++),5〜6分计(+++),认为W2分为阴性,>2分为阳性[8-9]oPCNA同样以细胞质液呈现棕黄色或棕褐色颗粒状物质且背景清晰为阳性
7、，取高倍视野5次观察切片瘤细胞数量，计算阳性细胞数占总细胞数的百分比，W25%计为I级，26%〜50%计为II级,51%〜75%计为III级,276%计为IV级[10]o1.6统计学方法获得数据分别录入软件包SPSS11.0,并建立数据库进行数据处理与分析，计数资料采用百分率表示，组间对比采用X2检验。以P两组患者1年生存率差异无统计学意义(P>0.05),2年生存率PDSCC组明显低于SCLC组(P[8]李
