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《当归多糖联合阿糖胞苷对移植性人白血病小鼠模型肝脏作用机制》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、当归多糖联合阿糖胞昔对移植性人白血病小鼠模型肝脏作用机制［摘要］白血病是造血系统的恶性肿瘤，白血病细胞极易进入血液并浸润、损伤肝脏。本室既往研究表明，当归多糖(APS)能抑制白血病细胞的增殖和分化，但治疗白血病时对肝脏的影响未见报道。本研究通过尾静脉移植K562细胞建立人白血病NOD/SCID小鼠模型，通过腹腔注射APS、阿糖胞昔(Ara-c)以及两者联合(APS+Ara-c)治疗白血病小鼠，研究对肝脏的影响及其机制。结果表明，与白血病小鼠对照组相比，APS或Ara-c治疗后，外周血白细胞数显著降低；肝功
2、能损伤减轻：丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性与总胆红素(TB让)降低，白蛋白(Alb)升高；肝脏抗氧化能力下降得以抑制；抗氧化酶谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)活性升高，谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)降低；炎症因子IL-1B,IL-6水平降低；肝指数减少；白血病细胞对肝小叶浸润减少，且凋亡率增加。APS+Ara-c联合治疗后肝脏病理恢复更加显著。综上所述，APS和Ara-c可减少肝脏内白血病细胞聚集，降低肝功能损伤和炎症因子水平，提高肝组织抗
3、氧化能力，提示APS+Ara-c联合治疗可以发挥更好作用。［关键词］K562细胞株；人白血病小鼠模型；当归多糖;阿糖胞昔；肝损伤［收稿日期］2013-07-31［基金项目］国家自然科学基金项目(81173398)［通信作者］*王亚平，教授，博士生导师，Tel:(023)68485968,E-mail：ypwangcq@aliyun.com白血病是造血系统的恶性肿瘤，白血病细胞具有较强的游走能力，很容易离开原发部位进入血液并浸润肝脏、肺等非造血器官。迄今，治疗白血病的药物主要以非靶向细胞毒药物为主，如甲氨蝶
4、吟、6疏基嚓吟、阿糖胞昔等，它们对正常的组织细胞也会造成严重损害。肝脏是大多数药物分解代谢的器官，抗肿瘤药物在治疗肿瘤时对肝脏损伤值得高度关注。有研究证明，抗白血病药物在肝脏内潴留时间较短，且药物浓度相对较低，这些因素可能使肝脏成为白血病细胞的庇护所［1］。当归多糖(Angelicapolysscharides,APS)是传统补血中药当归的主要有效成分之一。本室既往研究表明，APS对正常细胞和肿瘤细胞存在双向调节作用，即APS既能促进造血干/祖细胞的增殖分化，又能抑制白血病细胞的增殖并诱导其向成熟方向分化
5、［2-3］o本研究在成功建立人白血病NOD/SCID小鼠模型基础上，通过APS,阿糖胞昔(Ara-c)单独以及联合治疗白血病模型小鼠，观察在治疗白血病时对肝脏形态与功能的影响及其相关作用机制。1材料与方法1.1动物雄性NOD/SCID小鼠，8〜10周龄,体重18〜23g,由重庆医科大学实验动物研究所提供。1.2药品、试剂与仪器当归多糖购自陕西慈缘生物技术有限公司（批号CY130421,甘肃岷县当归提取，纯度95%,注射用生理盐水配制为20g•L-1,过滤除菌）。阿糖胞昔（国药准字H20055127,相对分
6、子质量279.68,注射用生理盐水配制为2.5g・LT）。SOD,MDA,GSH,GSH-Px购自南京建成生物工程研究所。IL-IB,IL-6ELISA试剂盒购自武汉博士德生物工程有限公司。TUNEL试剂盒购自碧云天生物技术研究所。550酶标仪（BIORAD）,CM1950冰冻切片机（Leica）,IX71-A12FL/PH荧光显微镜（Olympus）,HFX-IIA光学显微镜（Nikcon）o1.3人白血病小鼠模型的建立动物随机分为正常组、模型组、当归多糖治疗组（APS组）、阿糖胞昔治疗组（Ara-c组
7、）、当归多糖与阿糖胞昔联合治疗组（APS+Ara-c组）。除正常组注射等量生理盐水外，其余组按本课题组方法，建立移植性人白血病NOD/SCID小鼠模型[4],即给小鼠腹腔注射环磷酰胺每只2mg,qd,2d,第3天从尾静脉注射移植对数生长期K562细胞（2X107个/只），接种K562细胞30d后模型建立成功。从第31天开始分别腹腔注射APS（200mg•kg-1•d~l),Ara~c(2.5mg•kg-1•d~l)以及APS(200mg•kg-1•dT)+Ara~c(2.5mg•kg-1•d~l)联合治疗
8、各组小鼠，共14d,接种K562细胞45d处死小鼠取材。1.4外周血白细胞计数与分类和肝功能检测各组小鼠取尾静脉血，自动血细胞分析仪测定白细胞总数，血涂片经Wrightzs染色,光镜下分类计数。取小鼠眼球血制备血清,全自动生化仪检测ALT,AST,Alb,TBiL等肝功能指标。1.5肝指数与肝组织病理学检查颈椎脱臼处死小鼠前称各组小鼠体重，迅速取下整体肝脏，吸去血液后称肝脏质量。按公式计算肝指数：肝指数二肝脏湿重(mg)/体重
