资源描述：
《反萃取对螺旋霉素成品质量的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、反萃取对螺旋霉素成品质量的影响俟崇强(明治医药东>有限公司山东济宁272100)【摘要】螺旋霉素牛产过程中，反萃取温度和pH等参数对螺旋霉素成品中II、III组分含量的影响，在反萃取工序做了大量试验，特別是对反萃取的不同反萃取温度、反萃取最佳pH值等方面做了大量对照试验，总结出一些提高SPM成品II、III组分含量的工艺改进方法，为以后提高SPM成品质量的研究提供了试验数据和理论基础。【关键词】螺旋霉素萃取反萃取组分缓冲液【中图分类号】R94【文献标识码】A【文章编号】2095-1752(2012)17-0
2、369-02螺旋霉素(spiramycinSPM)是由牛二素链霉菌(S.ambofaciens)产牛的多组分的十六元大环内酯类抗生素，其内酯环的牛物合成由5分子乙酸、1分子丙酸、1分子丁酸和1分子未知前体(二碳单位)组成，支链氨基酸如纟颉氨酸等，经分解代谢可产生乙酸、丙酸、丁酸，作为SPM生物合成的前体，由于3・位的基团不同，有三个主要成分，分别是I(3-0H),11(3-0-乙酰基),III(3-0-丙酰基)，见下图：1,11,111组分的分子量分别是842,884,898,成品中各组分分别占：I:5-10%,
3、II,20—30%,III：50-60%o由于螺旋霉素组分I3—位是一个梵基，乙酰化后与组分II相同，所以乙酰螺旋霉素只有组分II,分子式为C47H78O16N2,分子量为927.14,组分III,分子式为C48H80O16N2,分子量为941.16o因此，提高SPM成品中II、III组分含量，对提高SPM的成品效价，提高乙酰收率和乙酰螺旋霉素的效价，都是大有益处的，研究牛产过程中影响螺旋霉素成品中II、III组分含量的因素很有实际意义。1材料与方法1.1材料螺旋霉素为本公司产品，乙酸丁酯、盐酸、草酸等化学试剂（
4、Ap或Cp）均为北京化工厂产，乙膳为邯郸四友生物医学技术有限公司生产，甲酸钱为上海试剂一厂生产，异辛醇为齐鲁石化公司生产，控温式磁力搅拌器为江苏泰县分析仪器厂产，高效液相色谱仪为美国光谱物理公司产。1.2操作方法取本公司生产用的发酵液，然后用不同的酸化剂预处理过滤，得滤液，用氢氧化钠碱化后，用分液漏斗静置分层法，用不同的溶媒萃取，不同的酸水缓冲液体系在不同的pH,萃取时间等条件下进行反萃取对照试验，反萃取液结晶、干燥后得成品干粉，用高效液相色谱法测其组分。1.3成品组分测定采用HPLC测定，流动相为甲酸镀（O.l
5、mol/L）一乙睛（体积比59.8：40.2）C18柱，流速为0.7ml/min,紫外检测波长232nm。2结果与讨论反萃取是决定成品质量的重要环节，萃取液的质量对成品质量起关键作用。反萃取主要从以下几方面进行分析：2.1不同酸水缓冲液体系的反萃取取生产上得到的乙酸丁酯萃取液2000ml,分别用为2.0的草酸一磷酸二氢钾、盐酸一磷酸二氢钾、盐酸溶液进行混合，反萃取，pH调到4.0左右，静置分层后分离，得到反萃取液，反萃取液过滤后得到杂质、滤液，再把滤液pH调至7.0,过滤后得到杂质、滤液，再把滤液pH调至9.5,
6、温度55°C,结晶，对各步所得的杂质及SPM湿粉烘干，称重，如下表所示：从生产工艺流程及理论进行杂质的分析，A1杂质主要是弱酸盐，如草酸盐，磷酸盐等，还有一些杂蛋白。A2主要是少量的不溶于水的氢氧化物（如氢氧化镁和氢氧化铝）和少量蛋白质。B1主要是杂蛋白，B2为磷酸盐和氢氧化物沉淀。C1主要是蛋白。C2是氢氧化物和少量蛋白质。从成品分析，A3中杂质主要是少量的蛋白及氢氧化物沉淀，B3杂质主要是蛋白，还有钙、镁离子的磷酸盐和氢氧化物。C3中杂质为较多的弱酸盐及蛋白、氢氧化物。从不同的酸水缓冲液体系所得到的成品的（H
7、PLC）组分图谱分析，采用草酸一磷酸二氢钾酸水体系得到的螺旋霉素成品II、III组分最高。2.2反萃取缓冲液体系最佳pH由生产经验及理论得出，反萃取缓冲液的最佳pH应在2.0-2.5之间，如果pH低于2.0,由于酸性条件下螺旋霉素易分解，因此，加入酸水缓冲液的瞬间由于pH较低，会造成螺旋霉素的分解。如果pH太高，则造成反萃取液量较多，反萃取液效价低，在生产上不利于结晶操作。2.3反萃取pH的影响取相同的乙酸丁酯萃取液各1000ml7份，都用pH2.0的草酸一磷酸二氢钾缓冲液进行反萃取，分别调pH为2.5,3。3.
8、5,4.045,5.0,5.5,得反萃取液，经结晶、干燥后得螺旋霉素成品，测组分，绘出坐标曲线，见下图：由上图看出，螺旋霉素1I+III组分随反萃取吋间的增加而降低，说明反萃取时间越长，SPM分解程度越大，因此，反萃取应在确保分离的情况下,越快越好。2.5反萃取温度的影响由于反萃取是放热过程，降低温度有利于反萃取进行，但如果反萃取温度太低，易在反萃取过程中产生乳化多，分离
