微生物实验指导-

《微生物实验指导-》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、微生物实验指导书广西大学行健文理学院生物工程教研室二o——年八月目录实验一坏境中的微生物3实验二显微镜的构造、性能及使用和细菌单染色、革兰氏染色5实验三细菌荚膜、芽砲染色11实验四印片法观察放线菌形态13实验五霉菌的形态观察14实验六培养基的制备和灭菌15实验七从土壤屮分离细菌、放线菌和真菌及其平板菌落计数17实验八多管发酵法检测水中大肠菌群20实验九微生物显微直接计数23实验十微生物细胞大小的测量27实验十一紫外线照射杀菌实验30实验十二呼吸缺陷型酵母筛选32综合实验乳酸菌的分离筛选与乳酸饮料34实验一环境中的微生物一、实验目的和内容目

2、的:1.T解环境中微生物的分布2.建立无菌操作观念，学习平板倒制方法。内容：1.倒制平板。2.对平板做不同的处理，以检测环境中的微牛物。二、基本原理平板培养基含有微生物生长所需要的营养成分，当取自不同來源的样品接种于培养基上，在28〜37°C温度下培养，2〜4天内每一菌体即能通过很多次细胞分裂而进行繁殖，形成一个可见的细胞群体的集落，称为菌落。每一种微生物所形成的菌落都有它自己的特点，例如菌落的大小，表面干燥或湿润、隆起或扁平、粗糙或光滑，边缘整齐或不整齐，菌落透明或半透明或不透明，颜色以及质地疏松或紧密等。因此，可通过平板培养基來检查环

3、境中微生物的数量和类型。三、器材1.培养基牛肉膏蛋白豚固体培养基2.仪器或其他用具无菌平皿接种环试管架酒精灯记号笔四、操作步骤1•倒制平板融化培养基，冷却至60°C左右，以无菌操作方法倒制平板。每组倒制4~5个。倒培养基时，右手持盛有培养基的三角瓶于火焰旁，左手将瓶塞轻轻拔出，用右手小指和无名指夹住瓶塞，瓶口保持对着火焰。左手中指和无名指托住平皿底，拇指和食指配合小心将平皿打开一个缝隙，迅速倒入适量培养基并盖好皿盖，沿着实验台的边缘将平皿平推入台面。2.空气中微生物检查(1)实验室空间中空气将一个牛肉膏蛋白陈平板放在当时做实验的实验台上，

4、移去皿盖，使培养基表面暴餌在空气中，过30分钟后，再将皿盖盖上。(2)实验室近地空气将另一平板放在实验室通道旁地板上，移去皿盖，使培养基表面暴露在空气中，过30分钟后，再将皿盖盖上。3.手指上微生物的检查在一个平板的皿底划线，按照小组人数将平板划分成几个区域，打开皿盖，每个成员用手指头分别在对应的区域轻按，之后将皿盖盖上。清洁手部后，再在另一个平板上分别按上手指印。做好标记。2.自來水中微生物的检查将一个平板的皿盖打开，滴入一滴自来水后盖上盖子，轻晃平板，使水滴散开,放至一旁，直至水被吸收。3.培养将本小组的平板叠在一起，倒置于恒温培养箱

5、中，30°C培养2〜3天后取出观察。4.观察结果并记录（1）菌落计数。（2）根据菌落的大小、形状、高度、干湿等特征观察不同的菌落类型。样品序号样品来源菌落数（近似值）菌落类型数（近似值）12345五、思考题1.实验室空间空气与近地空气相比，平板上菌落数与菌落类型有何区别？你能解释一下造成这种区别的原因吗？2.无菌操作的要点是什么？为什么要这么做？通过木次试验，在这方面你有何体会？3.为什么平板要倒置培养?实验二显微镜的构造、性能及使用和细菌单染色、革兰氏染色一、实验目的和内容目的：1.熟悉明视野显微镜的结构和原理，掌握显微镜的使用方法。2

6、.能熟练进行简单染色的操作，掌握革兰氏染色操作技术，能用油镜观察染色标本。内容：1.熟悉显微镜的结构和油镜的工作原理。2.对大肠杆菌进行简单染色。3.对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌进行革兰氏染色。4.用油镜观察标木。5.显微镜用完后的处理。二、基本原理（一）显微镜的结构明视野显微镜由机械部分和光学部分组成。1.机械部分（1）镜筒位于显微镜上方。上接目镜，下接转换器。镜筒有单筒和双筒两种，多为斜筒式。（2）镜臂为弓形金属柱，支持镜筒。（3）镜头回转器装于镜筒下端，用于安装物镜和转换物镜。（4）载物台物镜下的平台，用以载放被检标木。中央有通光孔，

7、供入射光通过。载物台上，以片夹固定标本，或以标本推动器将标本固定后，前后左右推动，找寻不同观察视野。（5）调节器为调节焦距的装置，有粗调节器利细调节器两种。利用它们使镜筒或载物台上下移动，调节物镜与标本间距离，使物像更清晰。有的显微镜还有专司聚光器升降的调节器。（6）镜座位于显微镜底部，支持全镜。2.光学部分（1）目镜可将物镜所成实像进一步放大，但不增加分辨力。目镜上标有5X、10X.15X等，各代表其放大倍数。（2）物镜是显微镜中决定成像质量和分辨能力的重要部件，其作用是将标本放大。物镜上常标有放大倍数、数值口径等参数。物镜根据使用条件

8、不同，--般可分为干燥物镜（包括低、高倍镜）和浸汕物镜（100X）o（3）聚光器位于载物台下方。其作用为将入射光聚集于标本之上。聚光器位置升降可影响视野的明亮度。（4）光圈安装于聚光器下方。由