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《肺炎链球菌溶血素诱导thp-1细胞凋亡涉及mapk13信号途径》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、[基金项目]国家自然科学基金面上项目（30872363）[通信作者]何於娟，电话:(023)68485859，E-mail:yjhemail@126.com肺炎链球菌溶血素诱导THP-1细胞凋亡涉及MAPK1/3信号途径姜慧，贺潇，袁军，王虹，李忱炜，董杰，崔瑾，董姗姗，周爱娥，张雪梅，胥文春，尹一兵，何於娟(400016重庆，重庆医科大学检验系临床检验诊断学教育部重点实验室)[摘要]目的探讨肺炎链球菌溶血素（pneumolysin，Ply）对人急性单核细胞白血病单核细胞株THP-1细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用及机制。方法MTT法检测Ply对THP-1细胞的增殖抑制
2、。瑞氏染色观察Ply对人THP-1细胞形态的影响。AnnexinV-FITC/PI双标法检测细胞凋亡。琼脂糖凝胶电泳观察凋亡细胞DNA片段化现象。免疫组化和Westernblot检测MAPK1/3蛋白表达的变化。结果将人THP-1细胞分别与0.05、0.1、0.5、1、2.5、5μg/mlPly共同孵育后，在24、48、72、96h用MTT法检测细胞增殖抑制率，发现Ply对人THP-1细胞具有明显的增殖抑制作用，并且呈剂量和时间依赖性，IC50（24h）为1.31μg/ml；0.05μg/ml和0.1μg/mlPly分别处理THP-1细胞12h后，通过瑞氏染色法观察
3、人THP-1细胞可见凋亡小体及核碎裂象等典型的凋亡形态学改变；用0.05μg/mlPly和0.1μg/mlPly作用THP-1细胞12h后细胞早期凋亡率分别为11.83%和48.45%(P<0.05)；提取凋亡THP-1细胞DNA，进行琼脂糖凝胶电泳可见典型的“梯状”条带；Ply作用于人THP-1细胞后，胞内MAPK1/3蛋白表达降低(P<0.05)。结论Ply可诱导人THP-1细胞凋亡，此作用涉及MAPK1/3信号通路的参与。[关键词]肺炎链球菌溶血素；THP-1细胞；凋亡；MAPK1/3通路[中图法分类号][文献标志码]APneumolysininducedap
4、optosisinhumanTHP-1cellsinvolvedMAPK1/3signalpathwayJiangHui,HeXiao,YuanJun,WangHong,LiChenwei,DongJie,CuiJin,DongShanshan,ZhouAi’e,ZhangXuemei,XuWenchun,YinYibing,HeYujuan(KeyLaboratoryofClinicalLaboratoryDiagnostics,MinistryofEducation,ChongqingMedicalUniversity,Chongqing,400016,Chin
5、a)[Abstract]ObjectiveTostudythemechanismofproliferationinhibitionandapoptosisofhumanacutemonocyticleukemiaTHP-1cellsinducedbypneumolysin(Ply).MethodsThegrowthinhibitionrateofTHP-1cellswasmeasuredbyMTTassay.MorphologyofTHP-1cellswasdetectedbyWright’sstaining.TheapoptosisrateofTHP-1cells
6、wasexaminedbyAnnexinV-FITC/PI-stain.DNAfragmentationwasexaminedbysepharoseelectrophoresis.TheexpressionofMAPK1/3wasinvestigatedbyimmunocytochemistryandWestern-blot.ResultsTHP-1cellswerecoculturedwithPlyattheterminalconcentrationof0.05,0.1,0.5,1,2.5,5μg/ml,thegrowthinhibitionratewasmeas
7、uredbyMTTassayat24,48,72,96haftercoculture,PlypresentedtheapparentproliferationinhibitiononTHP-1cellsinatime-anddose-dependentmanner,withIC50（24h）being1.31μg/ml;Thetypicalmorphologicalfeaturesofapoptosis,suchasnuclearfragmentationandapoptosisbody,wereobservedinTHP-1cellsafterPlytreat
