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《尿毒症血清蛋白对血管内皮细胞的损伤作用》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、尿毒症血清蛋白对血管内皮细胞的损伤作用梁新1，吴军2，韦杏雪1，丁瑜1，周宝尚1，王代红1，王沂芹1，袁发焕1（400037重庆，第三军医大学新桥医院：1肾内科，2健康管理科）[摘要]目的研究尿毒症血清蛋白对人血管内皮细胞的损伤作用，探讨蛋白结合尿毒症毒素对人血管内皮细胞的损伤作用。方法采集维持性血液透析尿毒症患者和正常健康人的静脉血，经过血清分离、透析、低温真空冻干等处理提取血清蛋白，以不同浓度的尿毒症血清蛋白溶液或正常血清蛋白溶液(0.4%、1%、2%、4%)刺激人脐静脉内皮细胞（HUVEC）不同时间（24、48、72h）,设置空白对照组。倒置相差显微镜观察细胞形态，CCK-8检测细胞
2、增殖抑制率，一氧化氮（NO）试剂盒、一氧化氮合酶（NOS）试剂盒分别检测细胞培养上清液NO浓度和细胞NOS活性，流式细胞仪检测内皮细胞膜微粒（EMPs）产生率、细胞凋亡率。结果与正常血清蛋白溶液组、空白对照组比较，尿毒症血清蛋白溶液组细胞折光性差，细胞间隙增宽，细胞膜表面毛糙，细胞突起明显增多，细胞形态各异，胞浆颗粒明显增加。不同浓度的尿毒症血清蛋白溶液处理HUVEC的细胞增殖率均显著低于相应正常血清组和空白对照组(P＜0.05）。与正常蛋白溶液组、空白对照组比较，尿毒症蛋白溶液组细胞培养上清液中NO浓度降低、细胞NOS活性明显降低（P＜0.05）。尿毒症蛋白溶液组EMPs产生率为（62.
3、57±1.59）%，显著高于空白对照组（7.3±0.57）%和正常蛋白溶液组（13±0.94）%（P＜0.05）。尿毒症蛋白溶液对HUVEC细胞凋亡无明显影响。结论尿毒症血清蛋白溶液能使内皮细胞形态发生变化，抑制内皮细胞增殖，损伤内皮细胞分泌功能，导致内皮细胞功能受损。[关键词]蛋白结合尿毒症毒素；人脐静脉内皮细胞；一氧化氮合酶；内皮膜微粒[中图法分类号][文献标志码]ADamageeffectofuremicserumproteinonvascularendothelialcellsLiangXin1,WuJun2,WeiXingxue1,DingYu1,ZhouBaoshang1,Wa
4、ngDaihong1,WangYiqin1,YuanFahuan1(DepartmentofNephrology1,DepartmentofHealthManagement2,XinqiaoHospital,ThirdMilitaryUniversity,Chongqing,400037,China)[Abstract]ObjectiveToinvestigatethedamageeffectofprotein-bounduremictoxinsonhumanumbilicalveinendothelialcells(HUVECs).MethodsHUVECswerecultureding
5、rowthmediumwiththeadditionofdifferentconcentrations(0.4%,1%,2%and4%)ofproteinscollectedfromtheuremicpatientsorthenormalpersonsfordifferenttime(24h,48hand72h),andtheblankcontrolgroupwasestablished.Thecellmorphologywasobservedwithaninvertedphasecontrastmicroscope.Thecellproliferationrate,nitricoxide
6、(NO)concentrationandnitricoxidesynthase(NOS)activityweredetectedbyrespectiveassaykits.Thecellapoptoticrateandthelevelofendothelialmicroparticles(EMPs)weredetectedbyflowcytometry(FCM).ResultsComparedwiththenormalgroupandtheblankcontrolgroup,theuremicgroupshowedirregularcellmorphology,lowercellproli
7、ferationrate(P＜0.05),lessNOinculturesupernatant(P＜0.05),andlowerNOSactivity(P＜0.05).Thelevel[(62.57±1.59)%]oftheEMPsintheuremicgroupwassignificantlyhigherthanthat[(7.3±0.57)%]intheblankcontrolgroupandthat[(13±0.9
