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《阻断tgf-βtgf-βri通路对atdc5细胞增殖,分化及细胞外基质的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、阻断TGF-β/TGF-βRI通路对ATDC5细胞增殖、分化及细胞外基质的影响王权，戚华兵，王晓凤，朱莹，陈林（400042重庆，第三军医大学大坪医院野战外科研究所，创伤实验室，骨代谢与修复中心，创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室）[摘要]目的研究TGF-βRI阻断剂SB-505124对软骨细胞增殖、分化及细胞外基质的影响与机制。方法利用Westernblot检测不同浓度的SB-505124处理后，前软骨细胞系ATDC5中p-Smad2/3的变化。MTT法检测SB-505124处理对ATDC5细胞生长、增殖的影响及时间、浓度依赖性效应。Western
2、blot检测c-Myc蛋白水平的变化。Real-timePCR检测SB-505124处理后软骨分化、细胞外基质合成及降解相关分子CollagenⅡ、Aggrecan及Adamts5表达与变化，并利用阿尔新蓝染色法检测SB-505124处理对软骨细胞系蛋白聚糖合成的影响。结果Westernblot检测示，SB-505124处理ATDC5细胞明显抑制TGF-β1激活的p-Smad2/3，并呈浓度依赖性；MTT检测示，SB-505124浓度和时间依赖性的抑制ATDC5细胞增殖；Real-timePCR检测示，SB-505124处理明显抑制ATDC5细胞中
3、CollagenⅡ、Aggrecan的表达，同时上调了Adamts5的表达；阿尔新蓝染色则提示SB-505124处理明显抑制ATDC5细胞中蛋白聚糖的合成。结论利用SB-505124阻断内源性TGF-β信号，可抑制软骨细胞增殖、分化及细胞外基质的合成，同时促进细胞外基质的降解。[关键词]TGF-βRI；SB-505124；ATDC5；增殖；细胞外基质[中图法分类号][文献标志码]A[基金项目]国家自然科学基金重点项目（81030036）[通信作者]陈林，E-mail：linchen70@163.comEffectofinhibitingTGF-β/
4、TGF-βRIsignalingonproliferation,differentiationandextracellularmatrixofATDC5cellWangQuan,QiHuabing,WangXiaofeng,ZhuYing,ChenLin（StateKeyLaboratoryofTrauma,BurnsandCombinedInjury,CenterofBoneMetabolismandRepair,InstituteofSurgeryReserch,DapingHospital,ThirdMilitrayMedicalUniver
5、sity,Chongqing,400042,China）[Abstract]ObjectiveToinvestigatetheeffectofTGF-βRIinhibitorSB-505124onproliferation,differentiationandextracellularmatrixofchondrocytes.MethodsTheexpressionofp-Smad2/3inATDC5cellswhichweretreatedwithdifferentconcentrationofSB-505124wasanalyzedbywest
6、ernblot.TheeffectofSB-505124onproliferationofATDC5anditsrelationshipwithconcentrationwasdetectedbyMTTassay.TheeffectofSB-505124ontheexpressionofc-Mycproteinwasanalyzedbywesternblot.TheeffectsofSB-505124onthemarksofdifferentiationandextracellularmatrix,includingCollagenⅡ,Aggrec
7、anandAdamts5,wereanalysedbyReal-timePCR.TheeffectofSB-505124onexpressionofsulfatedproteoglycanswasmeasuredbyAlcianbluestaining.ResultsWesternBlotshowedthattreatmentwithSB-505124causedadeclineofphosphorylatedSmad2/3(p-Smad2/3),includingcarboxylterminiandlinkerregionstimulatedby
8、TGF-β1inATDC5cells.MTTassaydemonstratedthatSB-505124significa
