兔bmscs在vanco-ab-fg三维支架中增殖和分化的实验研究

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1、兔BMSCs在VANCO-AB-FG三维支架中增殖和分化的实验研究边巴罗布，侯天勇，吴雪晖，许建中（400038重庆，第三军医大学西南医院骨科，全军矫形外科中心）[摘要]目的观察兔间充质干细胞（mesenchymalstemcellsderivedfrombonemarrow，BMSCs）在带有万古霉素藻酸盐微球的纤维蛋白凝胶（vancomycinalginatebeadsembeddedinfibringel，Vanco-AB-FG)中增殖和成骨分化情况。方法选取健康成年家兔，通过梯度离心结合贴壁培养法

2、分离、纯化BMSCs。将兔BMSCs溶解于纤维蛋白原溶液中，以注射的方式均匀接种于Vanco-AB-FG内部构建组织工程骨，以此作为实验组。以将BMSCs直接接种于Vanco-AB-FG复合物表面作为对照组，通过测定生长曲线来比较实验组和对照组的细胞增殖能力。通过碱性磷酸酶和茜素红染色来观察比较实验组和对照组BMSCs成骨分化的情况。结果生长曲线结果显示，早期（前7d）处于三维生长模式的实验组细胞的增殖速度慢于处于二维生长环境的对照组，在5d和7d时二者具有显著的统计学差异（P<0.05）；然而，后期（9

3、d后）二者之间无显著的统计学差异。碱性磷酸酶检测显示实验组细胞的碱性磷酸酶活性在12d达到峰值，为5.98pg/min/mg/cell明显高于对照组（P<0.05）。在实验组中，茜素红染色显示Vanco-AB-FG复合物的内部和表面均有明显的钙化结节。结论BMSCs可以在Vanco-AB-FG复合物内增殖和成骨分化，为进一步探讨其修复体内伴有感染的腔隙性骨缺损的实验研究提供了可靠依据。[关键词]组织工程骨；抗生素缓释；骨组织感染；可注射凝胶[中图法分类号][文献标志码]AExperimentalstudy

4、onPproliferationandosteogenicdifferentiationofrabbitBMSCswithinthecompoundin3DscaffoldofvancomycinalginatebeadsembeddedinfibringelBianBaluobu，HouTianyong，WuXuehui，XuJianzhong（DepartmentofOrthopedics,OrthopedicsCenterofPLA,SouthwestHospital,TheThirdMilitar

5、yMedicalUniversity,Chongqing400038,China）[Abstract]ObjectiveToobservetheproliferationandosteogenicdifferentiationofmesenchymalstemcellsderivedfromrabbitbonemarrow(BMSCs）)incompoundthe3Dscaffoldofvancomycinalginatebeadsembeddedinfibringel（(Vanco-AB-FG),and

6、toinvestigatetheirpossibleuseapplicationsintreatmentfortreatingosteomyelitisorpreventinginfectionscombiningcombinedwithlacunebonedefects.MethodsBMSCswerederivedfromhealthyadultrabbitsthroughgradientcentrifugationandadherentculture.Intheexperimentalgroup,B

7、MSCsweresuspendedinafibrinogensolution,andtheninjectedintoVanco-AB-FGtoconstructtissue-engineeredbones.Inthecontrolgroup,Asexperimentalgroup,BMSCswereseededwithinVanco-AB-FG.Asacontrol,BMSCswereseededonthesurfaceofVanco-AB-FG.ThegrowthcurvesofBMSCsintheex

8、perimentalandcontrolgroupswasweredetectedindifferentphasestocomparetheircellproliferationabilities.TheactivityofALPandstainingofalizarinredwereusedforevaluationofosteogenesisofBMSCsinthecompoundofVanco-AB-FG.Alkalin