αβ-晶状体蛋白促进体外培养人rpe细胞的增殖

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1、αΒ-晶状体蛋白对促进体外培养人RPE细胞的增殖的影响唐德荣，张学东，陈小丽，沈强，李颖媛（400016重庆，重庆医科大学附属第一医院眼科）[摘要]目的测定αΒ-晶状体蛋白在体外培养人视网膜色素上皮细胞（retinalpigmentepithelialcell,RPE）中的表达，探讨αΒ-晶状体蛋白对体外培养人RPE细胞增殖的影响。方法传代培养人ARPE-19细胞系，免疫荧光技术检测αΒ-晶状体蛋白在RPE细胞中的表达。用不同稀释浓度(体积比分别为1/10-2、1/10-3、1/10-4、1/10-5、1/10-6为何不直接写100……？请核对有无负号)的αΒ-晶状

2、体蛋白以及其抗体干预相应组组别应交代细胞，MTT方法检测不同时间点各组细胞光密度值，流式细胞技术检测各组细胞不同时间点的周期及凋亡情况。结果αΒ-晶状体蛋白在体外培养人RPE细胞质中表达；在48h，浓度为1/10-4～1/10-2时，3组细胞的光密度值差异有统计学意义（P＜0.05）；蛋白组与对照组相比，0～48h蛋白组的G1期比例减小，S、G2期比例增加，抗体组与对照组相比G1期比例增加，S、G2期比例减少；48h时3组之间凋亡细胞的构成比差异有统计学意义（P＜0.05）。结论实验证实αΒ-晶状体蛋白在体外培养人RPE细胞质中的表达，并对体外培养人RPE细胞增殖起

3、明显促进作用。[关键词]αΒ-晶状体蛋白；人视网膜色素上皮细胞；增殖[中图法分类号][文献标志码]AE英文摘要随中文修改ffectsofαΒ-crystallinonhumanRPEcellsinvitroTangDerong,ZhangXuedong,ChengXiaoli,ShenQiang,LiYingyuan(DepartmentofOphthalmology，FirstAffiliatedHospital,Chongqing[基金项目]重庆市卫生局资助项目（2011-1-029）[通信作者]张学东，E-mail:zxued@sina.comMedicalU

4、niversity,Chongqing,400016,China)[Abstract]ObjectiveTodeterminetheexpressionofαΒ-crystallininhumanretinalpigmentepithelialcells（RPE）andtoinvestigatetheeffectsofαΒ-crystallinonRPEproliferationculturedinvitro.MethodsARPE-19cellsweresubculturedandtheexpressionofαΒ-crystallinwasdetectedusi

5、ngimmunofluorescencetechnique.αΒ-crystallinindifferentconcentrations(1/10-2,1/10-3,1/10-4,1/10-5,1/10-6:V/V)anditsantibodywereusedfortreatingdifferentgroupsofcells,thenODvaluesandcellcycletogetherwithcellapoptosisatdifferenttimesweremeasuredbyMTTassayandflowcytometry,respectively.Resul

6、tsαΒ-crystallinwerefoundtobeexpressedinthecytoplasmofhumanRPEcellsculturedinvitro；Therewerestatisticallysignificance（P＜0.05）incellODvaluesamongthethreegroupsat48hwhentheconcentrationusedwas1/10-4-1/10-2；TheproportionofG1phasedecreasedwhiletheproportionofS,G2phaseincreasedinαΒ-crystalli

7、ngroupcomparedtothecontrolgroup(0-48h);TheproportionofG1phaseincreasedwhiletheproportionofS,G2phasedecreasedinαΒ-crystallinantibodygroupcomparedtothecontrolgroup(0-48h)；Theconstituentratiosofapoptoticcellsamongthethreegroupswerestatisticallysignificantat48h（P＜0.05）.ConclusionOurstudy