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《白灵菇产木聚糖酶发酵条件的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、白灵菇产木聚糖酶发酵条件的研究吴萍张海珍（安徽科技学院生命科学学院，安徽凤阳233100江苏灌云伊山高级中学江苏灌云222200）摘要：通过多因子的摇瓶液体发酵优化试验，以白灵菇为始菌，研究其产木聚糖酶的情况。以甘蔗渣为唯一碳源，来测定处于不同条件下的培养基中的白灵菇所产木聚糖酶的酶活力，同时测定其相应条件下的菌丝体生物量。结果表明：其最适温度为24°C,PH为6.0,接种量为12.5%,摇瓶装液量为60nil/瓶，摇床转速为160rpm，培养天数为7天。最后以各个因子的最佳梯度做优化培养。其发酵液体中木聚糖酶活力高达71.342IU/ml,菌丝体生物量也高达1.043g/6
2、0mlo关键词：白灵菇;木聚糖酶；甘蔗渣;发酵条件.木聚糖酶Qnclo一1,4—0—D—ylanxylanohydrolase.EC•3•2•1•8）是一类以内切方式降解木聚糖分子中的B-1,4—木糖昔键的水解酶类。包括内切［3—木聚糖酶、外切B—木聚糖酶和B—木二糖昔酶。其主要水解产物为木二糖和木二糖以上的低聚木糖，还有少量木糖和阿拉伯糖⑴。木聚糖酶体Gylanosome）是在微生物表面分离到的多酶复合体⑵。这些复合体在半纤维素的降解中起重要作用。现在已知能够产木聚糖酶的微生物包括细菌、放线菌、真菌中的黑曲霉和木霉等，不同来源的木聚糖酶其催化特性是有差异的，而且它们有其各自
3、不同的最适PH值和最适温度。据报道放线菌和细菌的最适生长和产酶PH接近丁•中性；耐碱性杆菌PH值在9-10；而真菌却较适合酸性条件，且能分泌木聚糖酶的水平高于酵母菌和细菌，从而格外引起研究人员的关注⑶。木聚糖的酶法降解在造纸、饲料、食品、制药等众多工业中有着十分诱人的应用前景⑷。所以人们对各种产木聚糖酶的微生物，包括细菌、真菌等各方面的性质及其发酵特性进行了详细的研究，对于它们各自所产生的木聚糖酶的使用特性也进行了探索，包括最适PH值、最适温度等，并且己经动用发酵工程技术得到了各种木聚糖酶产品。人们通过研究发现，由于木聚糖酶是一种结构复杂的非均一多糖，含有许多不同的取代慕,使
4、得木聚糖的生物降解需要一个复杂的酶系统中的不同的组分的相互协作，菌体产生的木聚糖酶是一组酶，而非是单一的某一种酶。在木聚糖的生物降解中，具不同催化功能的酶之间的协同增效作用是十分明显的。同时，人们还发现木聚糖酶多为诱导酶，诱导物对酶的生成和酶活水平的高低影响较大。随着分子生物学的发展和众多新的试验方法的引入，对木聚糖酶的研究已经达到了分子生物学基因工程的水平，己有许多来自细菌和真菌的木聚糖基因被克隆并在大肠杆菌中获得了表达。木聚糖酶的应用领域在不断扩大，除了在造纸和纸浆工业领域，它和其它半纤维素还可用于果汁和葡萄酒的澄清中、提取香料和色素、植物油和淀粉的生产中，在生产液体咖啡
5、时对咖啡黏液有液化作用，在焙烤工业中也有应用。列外，木聚糖酶在生产单细胞蛋白（SCP）、生物制药、液体或气体燃料、溶剂、糖浆及其饮料等方面也具有巨大潜力⑸。不过，在当前最被看好的应用前景是在生产燃料方面，国际上利用植物资源生产酒精成为了主要方面。而我国的甘蔗资源十分丰富，但是，其甘蔗渣则没能很好的加以合理利用，造成资源的严重浪费，甚是可惜！同时对微生物产酶的研究多集中在细菌和真菌中的木霉、黑曲霉等方面，而对大型真菌产木聚糖酶的研究则报道甚少。本研究是以甘蔗渣为唯一碳源，通过对大型真菌白灵菇进行液体发酵培养条件的研究，来测定其所产生的木聚糖酶的酶活力。以对其发酵条件因子：温度、
6、PH、接种量、摇床转速、摇瓶装液量及培养天数进行分析探究，来找出其最佳的发酵条件。1.材料与方法1.1供试菌种白灵菇（Pleurotusnehrodensis）,由安徽科技学院生物技术中心提供。1.2培养基配方1.2.1斜面培养基（加富PDA）⑹马铃薯20%,蛋白腺2%,葡萄糖2%,KH2P040.15%,MgS040.1%,琼脂1.8%,VB1,PH自然。1-2.2摇瓶种子培养葡萄糖4%,蛋白腺2%,KH2P040.15%,MgS040.1%,VB1,PH自然。1.2.3发酵培养基甘蔗渣4%,蛋白腺2%,KH2P040.15%,MgS040.1%,VB1,PH自然。1.3甘
7、蔗渣制备烘干，用万能粉碎机粉碎，过筛（60目）o1.4试剂1.4.1磷酸盐缓冲液(0.2mol/ml.PH6.5)[71称取2.72gKH2P04,0.8gNaOH分别溶于100ml蒸憾水中配成0.加ol/mk吸取90ml0.2mol/ml的KH2P04和22.68ml0.2mol/ml的NaOH溶于烧杯中加蒸馅水定容至360ml.1.4.2木聚糖溶液(0.5%)称取0.5g木聚糖然后用磷酸盐缓冲液定容至100ml・1・4・3木糖标准溶液（1000Ag/ml）准确称取0・02g分析纯的木糖，加入20ml
