jy-25-12微生物检验操作规程

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1、食品微生物检验操作规程1目的为确保微生物检验中匀样、取样和接种等操作是在无菌条件下进行，以保证检验结果准确可靠。2范围适用于本企业化验室微生物检验的操作和检验质量监控。3微生物检验实验室的一般要求见附录A。4样品采集及处理要求4.1根据食品的种类、批量、检验项目，确定标准检验方法、采样数量。4.2所采集的检验样品一定要具有代表性。采样时应首先对该批食品原料、加工、运输、贮藏方法条件、周围环境卫生状况等进行详细调查，检查是否有污染源存在。4.3采样操作要防止污染，防止变质、损坏、丢失。4.3.1釆样应注意无菌操作，容器必须灭菌，避免环境中微生物污染。采

2、样所用剪、刀、匙、棉签等用具，也需灭菌方可应用。但釆样所用容器不得使用煤酚皂溶液，用新洁尔灭、酒精等消毒药物灭菌，更不能含有此类消毒药物或抗生素类药物，以避免杀死样品中的微生物。4.3.2不得加入防腐剂、固定剂等。4.3.3采集样品后，立即样品封存。4.3.4采样原则：能采取完整包装的样品就不拆开取样，必须拆开包装取样的应按无菌操作进行取样。5121]4.3.5液体样品釆样方法：充分混匀后，无菌操作打开包装，用lOOmL无菌注射器抽取，注入无菌盛样容器。4.3.6半固体样品釆样方法：无菌操作打开包装，用无菌勺子从几个部位挖取样品，放入无菌容器。4.3

3、.7固体样品采样方法：大块整体食品用无菌刀具和镶子从不同的部位割取,并注意其代表性；小块大包装食品应从不同部位的小块上切取样品，放入无菌容器。若为检验食品的污染情况，可取表层样品；若为检验食品品质的情况，应从深部取样。如水产品采样：用灭菌的熟料袋作采样袋，用已用酒精棉花擦拭的蹑子、剪刀取样，取样前，用酒精棉花在外包装上擦拭一下。4.3.8冷冻食品采样方法：大包装小块冷冻食品按小块个体采取；大块冷冻食品可用无菌刀从不同部位削取或用无菌手锯从冻块上锯取样品，放入无菌容器。若为检验食品污染情况，可取表层样品；若为检验食品品质情况，应从深部取样。4.3.9生

4、产工序监测采样：[ml21]4.3.9.1车间用水：从车间各龙头采样；4.3.9.2车间台面、用具、及加工售货员手的卫生监测：用5cm2孔无菌采样板和5支无菌棉签擦拭25cm2面积，擦拭后立即用无菌剪刀将棉签头剪入无菌容器中。4.3.9.3车间空气采样：将5个直径90nini的普通琼脂平板分别置于车间的四角和中部，打开平皿盖5min,然后盖盖送检。4.3.10采样标签的填写标签内容主要：编号、样品名称、生产单位、生产日期、产品批号、产品数量、存放条件、采样时间、采样人姓名，现场情况。4.4样品采集后应立即送往检验室进行检验。4.4.1送检过程中一般不

5、超过3h,若路途遥远，可在1£〜5低温下运送。运送过程中要注意防污染、防散漏、防变质。4.4.2检验室收到样品后，应立即进行检验，如果条件不具备，应置冰箱存放，但应尽量创造条件，尽快完成检验。需冷冻者，则在冻存状态下送检。4.5检验室收到样品后，进行登记（样品名称、送检单位、数量、日期、编号等），观察样品的外观，如果发现有下列情况之一者，可拒绝检验。4.5.1样品经过特殊高压、煮沸或其他方法杀菌者，失去代表原食品检验意义者。4.5.2瓶、袋装食品已启开者，熟肉及其制品、熟禽等食品已折碎不完整者，即失去原食品形状者（食物中毒样品除外）。4.5.3按规定

6、采样数量不足者。5检验操作步骤仁样品的处理方法4.1对送检符合要求的样品，样品检验操作采样时，要根据其不同性状，进行适当处理。这些操作须在无菌室和/或超净工作台中进行。4.2液体样品处理4.2.1瓶装液体样品：用点燃的酒精棉球灼烧瓶口灭菌，接着用石炭酸或来苏尔消毒后的纱布盖好，再用灭菌开瓶器将盖启开；含有二氧化碳的样品可倒入500mL磨口瓶内，口勿盖紧，覆盖一灭菌纱布，轻轻摇荡，待气体全部逸出后，取样25mL检验。4.2.2盒装或软塑料包装液体样品：将其开口处用75%酒精棉擦拭消毒，用灭菌剪子剪开包装，覆盖上灭菌纱布或浸有消毒液的纱布在剪开部分，直接

7、吸取样品25mL,或倾入另一灭菌容器中再取样25mL检验。4.3固体样品处理4.3.1捣碎均质法：将中样（MlOOg）剪碎或搅拌混匀，从中取25g放入带225mL稀释液的无菌均质杯中，8000"10000r/min均质P2min即可。5.3.2剪碎振摇法：将中样（MIOOg）剪碎或搅拌混匀，从中取25g检样进一步剪碎，放入带225mL稀释液和直径5mm左右玻璃珠的稀释瓶中，盖紧瓶盖,用力快速振摇50次，振幅要大于40cm。5.3.3研磨法：将中样（2100g）剪碎或搅拌混匀，从中取25g检样放入无菌乳钵中充分研磨后，再放入带有225mL无菌稀释液的稀

8、释瓶中，盖紧盖后充分摇匀。5.3.4整粒振摇法：直接称取25g整粒样品置于带有225mL稀释液和直径5mm左