苦荞籽壳中黄酮类化合物的定性定量研究

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1、从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果苦荞籽壳中黄酮类化合物的定性定量研究【摘要】目的:建立苦荞籽壳黄酮类化合物的定性和含量测定方法。方法:用薄层色谱法对苦荞中主要黄酮类化合物芦丁和槲皮素进行定性鉴别，并用紫外分光光度法对其进行总黄酮含量测定。结果:TLC定性鉴别能检出供试品中槲皮素和芦丁;总黄酮含量在×10-3～×10-2mg·mL-1范围内线性关系良好，平均加样回收率%，RSD为%。结论:色谱分离良好，斑点清晰可见，提示该方法简便可

2、行，准确度和精密度均能满足分析要求。【关键词】苦荞籽壳;黄酮类化合物;定性分析;定量分析;薄层色谱法;紫外分光光度法　　苦荞麦为蓼科荞麦属植物，别名乌麦、花荞等。《本草纲目》记载:苦荞麦性味苦、平、寒，有益气力、续精神、利耳目、降气宽肠健胃的作用。苦荞主要分布在西北、东北、华北以及西南一带高寒山区。苦荞中含有丰富的蛋白质、脂肪酸及维生素，苦荞维生素的独特之处是含有大量的黄酮类物质，其中主要是芦丁，约占80%左右。几年来的研究表明，芦丁等黄酮类化合物对加强毛细血管和调节其渗透性，改善心血管系统，抑制恶性肿瘤生长及癌症，抗糖尿病，消炎

3、，治疗课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果溃疡以及对呼吸道系统疾病等有良好的作用。本试验采用TLC对苦荞籽壳提取物进行定性鉴别，并用紫外分光光度法对其中总黄酮进行含量测定，为苦荞的开发和利用奠定基础。　1仪器与试剂仪器756型紫外-可见分光光度计;恒温水浴锅;旋转蒸发仪;美国Waters公司真空脱气过滤装置。试药苦荞籽壳:广

4、灵苦荞，由山西省农科院小杂粮室提供，种子干燥样品经粉碎过筛后的苦荞籽壳;芦丁对照品:上海试剂二厂，Sigma进口分装;槲皮素对照品:中国药品生物制品检定所;其余试剂均为分析纯。样品的制备准确称取苦荞籽壳粉碎样5g，滤纸包好，放入索氏抽提器，加入70%乙醇300mL抽提至回流液无色，过滤提取液，减压蒸馏至无醇味后，用乙醚萃取3次，萃取液旋转蒸发浓缩至剩少量液体后冷冻干燥，得黄绿色粉末。所有溶剂都要经过脱气处理。　2定性鉴别.1溶液的配制.对照品溶液分别称取芦丁和槲皮素对照品适量，甲醇溶解，制成浓度为2mg·mL-1的对照品溶液。.供

5、试品溶液取“”项下苦荞黄酮提取物5mg，置25mL容量瓶中，加甲醇适量，振摇使完全溶解并定容至刻度，作为供试品溶液待用。课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果.阴性对照液取不含芦丁和槲皮素的提取物，按“”项下方法制成阴性对照液。.2薄层色谱照薄层色谱法分别吸取芦丁和槲皮素对照品溶液、供试品溶液、阴性对照液4种溶液各5μL，分别

6、点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯甲酸蒸馏水为展开剂，展至薄膜上边缘约处，取出，晾干，喷以1%三氯化铝乙醇溶液，待乙醇挥干后，置紫外光灯下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性对照色谱无相同斑点显现。　3总黄酮含量测定.1溶液的配制.对照品溶液精密称取芦丁对照品，甲醇溶解完全后，移入50mL容量瓶中，用甲醇定容，配成浓度为·mL-1的对照品溶液。.供试品溶液取“”项下苦荞黄酮提取物10mg，置250mL容量瓶中，加甲醇适量，振摇使完全溶解并定容至刻度，作为供试品溶液待用。.测定方法精密吸取样品溶

7、液1mL于10mL容量瓶中，加入%亚硝酸钠，摇匀，放置6min;加10%硝酸铝，摇匀，放置6min;加2mL4%氢氧化钠，甲醇定容至10mL，摇匀，放置15min。以甲醇为参比，在510nm处用紫外可见分光光度计进行测定。课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果.2测定波长的选择精密吸取“”项下对照品溶液，按“项下溶液处理方法，

8、以甲醇为参比，用紫外分光光度计，1cm比色皿在350～600nm波长范围内扫描，测定吸收度。在510nm处有最大吸收，故选择510nm为测定波长。.3线性关系考察准确量取“”项下芦丁对照品，，，，，，按“”项下方法操作，于510nm处测定。以吸收度