糖尿病大鼠肺的超微结构观察及形态计量学研究

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1、从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果糖尿病大鼠肺的超微结构观察及形态计量学研究作者：汤秀英，王昱，王书合，张烨，柴立军，郭晓惠【摘要】目的电镜观察及定量分析糖尿病大鼠肺组织的超微结构变化。方法采用自发的2型糖尿病OLETF大鼠模型，使用透射电镜观察摄片、图像分析仪分析及形态计量学方法研究肺泡隔内基板厚度。结果糖尿病大鼠肺泡隔增宽。肺泡毛细血管内皮细胞基板与I型肺泡上皮细胞基板融合部及毛细血管内皮细胞基板均增厚(P【关键词】糖尿病；肺；超微结构；形态计量学Abstract:

2、ObjectiveToobserveandquantitativelyanalyzetheultrastructuralchangesofthealveolarseptaindiabeticratlungs.MethodsOLETFrats,aspontaneoustypediabeticanimalmodel,wereselected.Thethicknessofbasallaminaofthealveolarseptaindiabeticratswasexaminedbytransmissionelectronmicroscopy,imageanalysis,an

3、dmorphometrymethods.ResultsIndiabeticrats,thealveolarseptawaswidened.ThefusedbasallaminaofthealveolarcapillaryendotheliumandtypeIepithelialbasallamina,thealveolarcapillary课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须

4、有创新性的成果endotheliumbasallaminawerethickened(PKeywords:diabetesmellitus;lung;ultrastructure;morphometry糖尿病合并症以对心、脑及肾脏等器官的影响较为严重而受到重视。自70年代起人们发现糖尿病患者肺的气体弥散功能发生障碍，但糖尿病时有无肺组织损伤尚不十分清楚。本研究采用自发性2型糖尿病OLETF大鼠模型［1］，使用透射电镜观察并定量分析其肺组织，探讨糖尿病肺组织的超微结构变化。1材料与方法〖*2〗实验动物及方法试验动物由日本大冢制药公司研究所惠赠，为4周龄雄性OLETF组大

5、鼠及对照同种系同周龄雄性LETO组大鼠，体重110～120克。将上述大鼠饲养于北京大学医学部实验动物科学部2级清洁环境，普通全价饲料单笼喂养，室温23±2℃，光照与黑夜交替。8周龄时给予10%蔗糖水喂养，观察进食及饮水情况，每周称体重、记录进食量、监测血糖，至第20周处死。血糖用葡萄糖氧化酶法测定。电镜标本制备课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果取LETO组大鼠

6、及OLETF组大鼠各5只进行电镜观察及测量。每只大鼠取右肺新鲜组织各5块，立即固定于％戊二醛溶液，再用1％锇酸后固定。梯度脱水后用Epon812包埋，每只大鼠包埋6块。超薄切片用醋酸铀及枸橼酸铅双染色。JEM1230型透射电镜观察并照相。每例分别随机拍照I型肺泡上皮细胞基板融合部(fusedbasallamina,FBL)及肺泡毛细血管内皮细胞基板(capillarybasallamina,CapBL)。每例每种基板各拍照10张。形态计量学方法基板调和平均厚度测量：使用Motic数码医学图像分析系统，分别对每张照片的每种基板取3个点做垂线测量，得出垂线长即该基板

7、的厚度(Wi,i=1,,...n)及各基板共测量厚度的数目(N)，然后用调和平均厚度计算方法分别计算出各基板的调和平均厚度(n)［2,3］，计算公式如下：n=83π×N/ni=1(1/Wi).统计学处理采用统计软件完成统计分析，采用以上获得的调和平均数代表每一只大鼠每个基板的厚度。应用成组t检验对LETO组与OLETF组的FB及CapBL进行比较。结果〖*2〗.1血糖测定12周龄时，OLETF组大鼠空腹及餐后120min血糖均显著高于LETO组大鼠，分别为±.39±/L和±±/L(P.2电镜观察课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果