临床医学论文-糖尿病大鼠肺的超微结构观察及形态计量学研究.doc

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1、临床医学论文•糖尿病大鼠肺的超微结构观察及形态计量学研究作者:汤秀英,王昱,王书合,张烽,柴立军,郭晓惠【摘要】H的电镜观察及定量分析糖尿病大鼠肺组织的超微结构变化。方法采用自发的2型糖尿病OLETF人鼠模型,使用透射电镜观察摄片、图像分析仪分析及形态计量学方法研究肺泡隔内基板厚度。结果糖尿病大鼠肺泡隔增宽。肺泡毛细血管内皮细胞基板与I型肺泡上皮细胞基板融合部及毛细血管内皮细胞基板均增厚(P<0.01)o结论肺泡隔基板増厚是糖尿病肺特征性的超微结构变化,肺泡隔厚度增加是导致肺功能障碍的形态学基础

2、。【关键词】糖尿病;肺;超微结构;形态计量学Abstract:ObjecliveToobserveandquantitativelyanalyzetheultrastructuralchangesofthealveolarseptaindiabeticratlungs.MethodsOLETFrats,aspontaneoustype2diabeticanima1model,wereselected.Thethicknessofbasallaminaofthealveolarseptaindia

3、beticratswasexaminedbytransmissionelectronmicroscopy,imageanalysis,andmorphometrymethods・ResultsIndiabeticrats,thealveolarseptawaswidened.Thefusedbasallaminaofthealveolarcapi1laryendotheliumandtypeIepithelialbasallamina,thealveolarcapi1laryendotheliu

4、mbasallaminawerethickened(PvO.OI)・ConclusionThethickeningofbasallaminaofthealveolarseptaischaracteristicultvastructureofthelungindiabeticrat.Theincreaseofalveolarseptathicknessisanimportantmorphologicbasisofpulmonarydysfunclion.Keywords:diabetesmcl1i

5、tus;lung;ultrastructurc;morphometry糖尿病合并症以对心、脑及肾脏等器官的影响较为严重而受到重视。自70年代起人们发现糖尿病患者肺的气体弥散功能发牛障碍,但糖尿病时有无肺组织损伤尚不十分清楚。本研究采用自发性2型糖尿病OLETF大鼠(OlsuknLongEvansTokushimaFattyrat)模型[1],使用透射电镜观察并定量分析其肺组织,探讨糖尿病肺组织的超微结构变化。1材料与方法K*221.1实验动物及方法试验动物由日本大冢制药公司研究所惠赠,为4周龄雄

6、性OLETF组人鼠及对照同种系同周龄雄性LETO(LongEvansTokushimaOtsuka)组大鼠,体重110〜120克。将上述大鼠饲养于北京大学医学部实验动物科学部2级清洁环境,普通全价饲料单笼喂养,室温23±2°C,光照与黑夜交替。8周龄时给予10%蔗糖水喂养,观察进食及饮水情况,每周称体重、记录进食量、监测血糖,至第20周处死。血糖用葡萄糖氧化酶法测定。1.2屯镜标本制备取LETO组大鼠及OLETF组大鼠各5只进行电镜观察及测量。每只大鼠取右肺新鲜组织各5块,立即固定于2.5%戊二

7、醛溶液,再用1%娥酸后固定。梯度脱水后用Epon812包埋,每只大鼠包埋6块。超薄切片用醋酸铀及枸椽酸铅双染色。JEM1230型透射电镜观察并照相(20000倍)。每例分别随机扌巾照I型肺泡上皮细胞基板融合部(fusedbasallamina,FBL)及肺泡毛细血管内皮细胞基板(capillarybasallamina,CapBL)。每例每种基板各拍照10张。1.3形态计量学方法基板调和平均厚度测量:使用MoticMed6.0数码医学图像分析系统,分别对每张照片的每种基板取3个点做垂线测量,得出

8、垂线长即该基板的厚度(Wi,i二1,2,...n)及各基板共测量厚度的数H(N),然后用调和平均厚度计算方法分别计算出各基板的调和平均厚度(n)[2,3],计算公式如下:n二83nXN/ni=l(l/Wi).1.4统计学处理采用SPSS10.0统计软件完成统计分析,采用以上获得的调和平均数代表每一只人鼠每个基板的厚度。应用成组t检验对LETO组与0LETF组的FB及CapBL进行比较。2结果K*222.1血糖测定12周龄时,OLETF组大鼠空腹及餐后120min血糖均显着高于LETO组大鼠,分别

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