加味四逆散对肝纤维化大鼠肝组织ⅰ,ⅲ型胶原mrna影响的研究

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1、从本学科出发,应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性,便于研究生提出新见解,特别是博士生必须有创新性的成果加味四逆散对肝纤维化大鼠肝组织Ⅰ,Ⅲ型胶原mRNA影响的研究作者:郑旭锐,韦永红,周莉英,孙守才,宇文亚【摘要】目的观察加味四逆散对肝组织Ⅰ,Ⅲ型胶原mRNA影响,探讨其抗肝纤维化的药理机制和作用。方法采用二甲基亚硝胺腹腔注射制备大鼠肝纤维化模型,加味四逆散灌胃给药,采用实时定量PCR技术检测各组大鼠肝组织Ⅰ,Ⅲ型胶原mRNA表达的水平。结果加味四逆散能明显降低肝纤维化大鼠肝组织Ⅰ,Ⅲ型胶原的含量,与病理模型组比较有显著性差异。

2、结论加味四逆散可有效的减少肝组织Ⅰ,Ⅲ型胶原的生成,对肝纤维化有肯定的治疗作用。【关键词】加味四逆散;肝纤维化;Ⅰ型胶原;Ⅲ型胶原TheEffectsofJiaWEiSiNiSanonExpressionofCollagenⅠ,ⅢofHepaticFibrosisinRatsAbstract:ObjectiveThemechanismofChineseHerbailcompoundJLAWEISINISANintreatinghepaticfibrosiswerefurtherexploredandstudiedbyobservingtheexpression

3、ofCollagenⅠandⅢCollagenmRNAinratfibrosismodelwasinducedbygroupsoftreatmentwerefedwithJWSNSImRNAandCollagenIIImRNAwere课题份量和难易程度要恰当,博士生能在二年内作出结果,硕士生能在一年内作出结果,特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发,应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性,便于研究生提出新见解,特别是博士生必须有创新性的成果detectedinliversampleswithRTpathologicalex

4、amination,theJWSIStreatmenthadsignificantlyreversedDMN-inducedliverJWSIStreatmentgrouptheexpressionofcollagenⅠ,ⅢinliverwasmarkedlyreducedrespectivelyaccordingtoRTPCRanalysisascomparedwithmodelgroup(PKeywords:JWSNS;Hepaticfibrosis;CouagonⅠ;CouagenⅢ  加味四逆散是治疗慢性病毒性肝炎的有效经验方,既往的临床观察和动物实

5、验研究已经证实该方具有良好的防治肝纤维化作用[1~3]。本实验采用二甲基亚硝胺腹腔注射诱导肝纤维化大鼠动物模型,应用实时定量PCR技术检测大鼠肝组织中I,Ⅲ型胶原mRAN表达,探讨加味四逆散抗肝纤维化的作用机制。  1材料动物SD大鼠46只,雄性,清洁级,体重g,由第四军医大学实验动物中心购进。动物合格证号:军医动字第XX2020号。药品及试剂加味四逆散煎剂等药组成,由陕西中医学院附院药房购进,经本院药物鉴定教研室鉴定无伪劣品。药物加水浸泡常规煎煮,过滤,水浴蒸发至每毫升含生药,置于4℃冰箱保存备用。秋水仙碱、TRIzol课题份量和难易程度要恰当,博士生能在二

6、年内作出结果,硕士生能在一年内作出结果,特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发,应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性,便于研究生提出新见解,特别是博士生必须有创新性的成果Regent(Invitrogen公司)、RTPCRKit、二甲基亚硝胺。  2方法.1动物模型制备大鼠在适应性饲养1周后随机选取8只作为空白对照组,其余38只均用DMN以10ml/kg体重腹腔注射,1次/d,每周连续d,连续4周。.2分组4周造模结束后,38只大鼠共死亡8只,死亡率为%,将剩余30只造模大鼠随机分为:B组10只;C组10只;D组10只。

7、.3给药A,B组以生理盐水ml/只灌胃;C组以秋水仙碱mg/kg体重灌胃;D组以加味四逆散煎剂10ml/kg体重灌胃。以上各组用药均1次/d,连续用药30d后结束。.4标本制作实验结束后取部分新鲜肝组织用10%甲醛固定,石蜡包埋,连续切片,厚μm。.5普通病理组织学观察参照中华医学会传染病寄生虫病分会制定的《病毒性肝炎防治方案》,病理组织学分级标准为:正常肝脏或无明显胶原纤维增生为“-”级;胶原纤维增生,中央静脉和汇管区有少量纤维索放散延伸,但无间隔形成为“+”级;胶原纤维增生,中央静脉和汇管区结缔组织变厚,由此向四周伸出纤维索,形成不完全间隔为“++”级;胶

8、原纤维大量增生,有个别菲薄的完全间隔形

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