hplc法检测血清中伏立康唑含量的研究

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1、从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果HPLC法检测血清中伏立康唑含量的研究【摘要】目的建立人体血清样本中伏立康唑含量检测方法。方法色谱柱为依利特C18柱；流动相为水：乙腈：冰醋酸：三乙胺＝64：36：：；流速：/min；检测波长:258nm。结果伏立康唑在～μg/ml浓度范围内呈良好的线性关系，r=。结论实验建立的HPLC方法可以用于血清样本中的伏立康唑含量检测。【关键词】伏立康唑血清样本HPLC含量测定【Abstract】O

2、bjectiveToestablishamethodtodeterminatethevoriconazolecontentinhumanserumEliterC1columnwasusedwiththemobilephaseofwater-acetonitrile-aceticacid-triethylamine.Theflowratewasthewave-lengthwas58nm.ResultsThecalibrationcurvewaslinearintherangeofμg/TheestablishedHPLCme

3、thodcanbeusedinthedeterminationofvoriconazolecontentinhumanserum.【Keywords】voriconazole;serumsample;HPLC;determination课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果伏立康唑是一个三唑类抗真菌药物，其作用机制是抑

4、制真菌细胞色素p450依赖的14α-固醇脱甲基酶，而本品对于真菌细胞色素p450酶比对各种哺乳动物的细胞色素p450酶系统更具选择性。伏立康唑在～64μg/ml的浓度范围内对几乎所有的实验真菌，包括致病性酵母菌和丝状菌属及双芽生菌的分离菌株均有作用。对一些条件致病真菌如曲霉菌属、隐球菌属及念珠菌属包括对氟康唑耐药的克柔念珠菌均有抗菌活性。本实验旨在建立血清样本中伏立康唑浓度检测方法。　　1实验材料伏立康唑对照品，中检所提供。卡马西平对照品，中检所提供。乙腈：色谱纯，天津市科密欧化学试剂开发中心，批号：XX1120。冰醋酸：

5、分析纯，天津市化学试剂三厂，批号：XX1228。三乙胺：分析纯，天津市东丽区天大化学试剂厂，批号：XX0806。Waters515高效液相泵，717自动进样器，996紫外检测器，Empower色谱工作站。色谱条件及血浆样本处理方法［1～4］.1色谱条件色谱柱为依利特C18柱；流动相为水：乙腈：冰醋酸：三乙胺＝64：36：：；流速：/min；检测波长：258nm；柱温：室温。.2标准液制备精密称取伏立康唑对照品，加甲醇溶解于50ml容量瓶中并稀释至刻度,即得698μg/ml的伏立康唑对照品溶液。精密称取卡马西平对照品，用流动

6、相溶于100ml容量瓶中并稀释至刻度，即得50μg/ml的内标溶液。.3血浆样品的处理课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果取血浆，内标10μl，混匀，再加入甲醇，旋涡振荡，16000r/min离心5min;吸取上清液100μl进样。3方法学研究.1专属性在选定的色谱条件下，伏立康唑与内标卡马西平完全分离，且峰形良好，

7、两者保留时间分别约为.4min和，空白血浆、空白血浆加药物及内标、含药血浆加内标按4法处理后，色谱图见图1。Ⅰ:空白血浆；Ⅱ:空白血浆加药；Ⅲ:含内标血浆；IV：2号受试者用药后2h色谱图A：卡马西平,B：伏立康唑图1伏立康唑色谱图标准曲线及线性回归方程用伏立康唑对照品溶液配制标准曲线工作液：将698μg/ml对照品溶液依次用流动相稀释，得到、、、、、μg/ml。取空白血浆分别置于系列试管中，分别加上述标准曲线溶液各10μl，配制成血浆浓度为样，按上、、、、、μg/ml的血浆标述4方法处理血浆样品，测定样品及内标的峰面积，

8、计算其峰面积比值，以峰面积比值A对血浆浓度C进行线性回归分析，求得线性回归方程为：C=.11A+，r=。结果表明，伏立康唑血浆浓度在～μg/ml浓度范围内，线性关系良好，血浆样品可进行定量检测的最低浓度为μg/ml。见图2。图2伏立康唑血浆标准曲线.3绝对回收率各取空白血浆于15个空白试管中，5个为一组