欢迎来到天天文库
浏览记录
ID:30068508
大小:18.00 KB
页数:12页
时间:2018-12-26
《动物组织中核酸的提取与鉴定实验报告》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在应用文档-天天文库。
1、为了适应公司新战略的发展,保障停车场安保新项目的正常、顺利开展,特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划动物组织中核酸的提取与鉴定实验报告 实验七动物组织中核酸的提取和鉴定 【原理】 动物组织细胞中的核糖核酸(RNA)与脱氧核糖孩酸(DNA)大部分与蛋白质结合形成核蛋白。核蛋白可被三氯醋酸沉淀,再用95%乙醇加热可以除去附着在沉淀上的脂类杂质,然后用10%NaCl溶液提取出核酸的钠盐,加入醇可使核酸钠沉淀析出。 先用水由动物肝中提出核蛋白,再籍酚将核酸与蛋白质之间的结合键断裂,并用乙醚抽提去蛋白质及其它杂质,最后用乙醇将核酸沉淀。 核酸(RNA、DNA)可被硫酸水解产生磷酸。
2、有机碱和戊糖。 此三类化合物可用下列方法鉴定之。 1、磷酸:能与钼酸试剂作用生成磷钼酸,后者在还原剂的作用下。还原成兰色的钼兰。常用的还原剂有氨基苯磺酸、氯化亚锡,维生素C等。 H3PO4+12H2MoO4→H3PO4·12MoO3+12H2O H3PO4·12MoO3 H3PO4·6MoO3·3Mo2O5 2、嘌呤碱:能与苦味酸作用形成针状结晶3、戊糖:目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解,并感受到安保行业的发展的巨大潜力,可提升其的专业水平,并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展,保障停车场安保新项目的正常、顺利开展,特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的
3、培训计划 (1)核糖:经与强酸(盐酸与硫酸)共热生成糠醛,后者可与3;5二羟甲基苯缩合成绿色化合物。 (2)脱氧核糖:在强酸中加热,可生成ω—羟基γ—酮基戊醛,后者再与二苯胺作用生成一蓝色化合物。 上述二反应如下 【操作】(一)核酸提取l、用酚提取法: 取小白鼠一只,断头处死,剖腹取肝,置于研钵中,加入玻璃少许,研磨至糊状后,加入蒸馏水3ml,继续研磨约三分钟。 于该研钵中再加酚液5ml,研磨约十分钟后,倒入—-圆底离心管中,离心5分钟。 用毛细管将上液吸出,置于一圆底离心管中,加乙醚2ml,用拇指将管口按(转载于:写论文网:动物组织中核酸的提取与鉴定实验报告)住,用力振摇1—2
4、分钟(提出酚),离心5分钟后,用毛细滴管吸取全部下层液于一圆底离心管中。 于该管中加入95%乙醇2ml,用玻棒搅拌约2分钟,离心3分钟,取出.去上清液,沉淀部分即为核酸。 2、用三氯醋酸提取法 杀兔;取肝,称重,按每克肝脏4ml比例加入1%三氯醋酸,制成肝匀浆。每组量取肝匀浆5ml于带塞离心管中,3000转/分离心5分钟。目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解,并感受到安保行业的发展的巨大潜力,可提升其的专业水平,并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展,保障停车场安保新项目的正常、顺利开展,特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划 将离心后的上清液倾去,于沉淀
5、中加95%乙醇5ml充分混匀,在水浴中加热至沸2分钟,注意酒精沸腾后将火关小,避免酒精蒸汽燃烧。冷却后离心。 倾去上层乙醇液。于沉淀中再加入10%NaCI溶液4ml,置沸水浴中8分钟,并用玻棒不断搅拌,取出;冷却后再离心, 将上清液倾入另一离心管中,再离心一次,除去可能存在的微量残渣,将上清液倒入一试管。 取等量95%的乙醇,逐滴加入到上清液中,即可见白色沉淀逐渐出现,静置10分钟后。将其内容物摇匀后倒入一圆底离心管中,离心5分钟,将上液倾去,所得白色沉淀即为核酸钠。 (二)核酸的水解: 在有核酸沉淀的离心管中加入蒸馏水2ml。振摇至沉淀溶解后,加入10%H2SO42mL摇匀,于沸水
6、浴中加热10分钟,即得核酸水解液,用流水冷却后进行下列定性试验。 (三)鉴定: l、嘌呤碱的鉴定: 取中试管一支,加入饱和苦味酸约2ml,再加入核酸水解液4—6滴,摇匀。静置于室温中,观察有无黄色针状结晶出现,。 2、脱氧核糖的鉴定: 3、核糖的鉴定: 4、磷酸的鉴定目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解,并感受到安保行业的发展的巨大潜力,可提升其的专业水平,并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展,保障停车场安保新项目的正常、顺利开展,特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划 摇匀,于沸水浴加热10分钟后观察色颜色之变化。【试剂配法】 1、饱和苦味酸溶
7、液:称取克的苦味酸,溶于100ml的蒸馏水中,静置过夜。临用前倒取上层液。 2、钼酸试剂,称取钼酸铵5克,溶于100ml蒸馏水中,再加入浓硫硫15ml待冷却后加蒸馏水至1000ml,此试剂可置阴凉处保质一月。 3、拜耳氏试剂:称取克3,5一二羟甲苯,加入浓盐酸50ml。再加10%三氯化铁20—30滴,贮于冰箱。此试剂应在临用前配制。 4、二苯胺试剂:称取纯二苯胺lg溶于1000ml的冰醋酸中
此文档下载收益归作者所有