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时间:2018-12-25
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1、啤酒检验手册(微生物检验部分)23目录A、半成品质量检验一、冷麦汁…………………………………………………………2二、发酵酒…………………………………………………………2三、贮酒…………………………………………………………4四、一滤酒……………………………………………………6五、清酒……………………………………………………………7B、成品质量检验…………………………………………………8C、原辅材料质量检验……………………………………………13附录1:培养基、中和剂及染色剂的配制和染色方法…………15
2、附录2:玻璃器皿的洗涤、包扎与灭菌…………………………19附录3:无菌吸样要求……………………………………………19附录4:大肠菌群最可能数(MPN)检索表……………………2023A、半成品质量检验一、冷麦汁1、抽样方法1.1传统发酵1.1.1每班至少抽检一批。1.1.2取样时先打开取样阀排放少量液体,后用70-75%的酒精由内至外消毒取样阀,再用火焰灭菌(酒精火焰外焰灼烧15秒以上)。重新打开阀门排放样品,待阀门冷却后,取150~200ml入已灭菌的三角瓶。1.2锥形罐发酵逐批抽检,取样方法同A
3、一、1.1.22、检验项目好气菌(每班至少抽检一批)厌气菌(每天至少抽检一批,原则上由日班完成)注:停产搞卫生后的第一批麦汁一定要抽样检验好气菌和厌气菌。3、检验方法3.1好气菌:无菌操作吸取1ml样品加入已灭菌的平皿内,及时将冷却至45±1℃(手感不烫手)的营养琼脂培养基注入平皿10-15ml,并转动平皿使混合均匀。待琼脂凝固后,翻转平板,置36±1℃的电热恒温培养箱内培养24或48±2小时后,在菌落计数器上计菌落总数,结果即是每毫升样品中所含的好气菌数。3.2厌气菌:无菌操作吸取1ml样品加入
4、已灭菌的平皿内,及时将冷却至45±1℃的UBAD(或NBBD)培养基注入平皿10-15ml,并转动平皿使混合均匀。待培养基凝固后,翻转平板,置25±1℃的厌氧培养箱内培养5~7天后,在菌落计数器上计菌落总数,结果即是每毫升样品中所含的厌气菌数。4、结果处理4.1检验结果以电脑报告单或书面报告单的形式报给企业领导、生技部和酿造部。二、发酵酒1、抽样方法1.1传统发酵1.1.10代的酵母,半罐即取样;满罐1小时后再取样。1代以上(包括1代)的酵母满罐1小时后取样。取样时先打开取样阀排放少量液体,后用7
5、0-75%的酒精由内至外消毒取样阀,再用火焰灭菌(酒精火焰外焰灼烧15秒以上)。重新打开阀门排放样品,待阀门冷却后,取150~200ml入已灭菌的三角瓶。1.1.2满罐56小时后再取前酵液150~200ml检测高泡时期的酵母数。1.2锥形罐发酵231.2.10代的酵母,添加第一批麦汁后1小时及满罐后1小时取样;1代以上(包括1代)的酵母满罐1小时后取样。无菌操作取样,方法同A一、1.1.2。1.2.2满罐的第四日取样检测厌氧菌,方法同A一、1.1.2。1.2.3满罐的第20日取发酵液150~200
6、ml检测酵母数和死亡率。2、检验项目2.1传统发酵2.1.1每罐检验项目:酵母数、出芽率、酵母形态及厌气菌;高泡期酵母数。2.1.2抽检项目:0代酵母逐罐检验死亡率及好气菌;1代以上(包括1代)每月至少抽4罐检验好气菌及死亡率。2.2锥形罐发酵2.2.1每罐检验项目:酵母数、出芽率、死亡率、酵母形态、好气菌及厌气菌;2.2.2抽检项目:20天后的酵母数;(0代的酵母逐罐检验,0代以上的酵母抽检的罐数不少于当日满罐总数的50%)20天后的死亡率(0代的酵母逐罐检验,0代以上的酵母每月至少抽检4罐)3
7、、检验方法3.1好气菌:同A、一、3.1中好气菌的检验方法3.2厌气菌:同A、一、3.2中厌气菌的检验方法3.3酵母形态与死亡率:取1:5000的美蓝染色液一滴,滴在一块洁净的载玻片中央,用滴管或玻棒加一滴酵母悬浮液,混合均匀,染色3分钟后盖上盖玻片制成水浸片,镜检(在3分钟内用高倍镜观察)。染上蓝色的细胞是死细胞,未着色的是活细胞。用血球分类计算器计出死亡酵母数与酵母细胞总数(检酵母死亡率时,要求每个视野不少于50个酵母,数1000个以上酵母个数)。同时观察酵母形态,主要观察酵母的形状、大小、内
8、含物、液泡及细胞壁。(单纯观察酵母形态时可以用蒸馏水代替美蓝染色液)死亡酵母数酵母死亡率(%)=×100(计算结果保留一位小数)酵母细胞总数3.4酵母数与出芽率:3.4.1计酵母数时一般要求用2%的H2SO4稀释10倍(1ml酵母液加入9ml2%H2SO4),使血球计数板每个小方格中平均4~6个细胞为宜。但酵母含量少时不用稀释。 3.4.2取一块洁净的血球计数板,在中央计数区的上方加盖一块洁净的盖玻片。3.4.3用滴管或玻棒取酵母悬浮液滴于盖玻片的边缘,让菌液靠毛细作用渗入计数室,
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