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时间:2018-12-23
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1、广州大学学生实验报告开课学院及实验室:生命科学学院计机楼4072013年12月6日学院生命科学学院年级、专业、班生物工程10姓名学号10142000实验课程名称生物信息学 成绩 实验项目名称 实验六蛋白质序结构与预测指导教师 一、实验目的1、掌握蛋白质序列检索的操作方法;2、熟悉蛋白质基本性质分析;3、熟悉基于序列同源性分析的蛋白质功能预测,了解基于motif、结构位点、结构功能域数据库的蛋白质功能预测;4、了解蛋白质结构预测。二、实验内容1、提交使用上述软件对人脂联素蛋白质序列进行基本性质分析、同源性分析、
2、motif结构分析以及二级结构和三维结构预测的结果;2、总结进行上述分析所需注意的关键事项11三、实验步骤1、提交使用上述软件对人脂联素蛋白质序列进行基本性质分析、同源性分析、motif结构分析以及二级结构和三维结构预测的结果;1、人脂联素蛋白质序列的检索:(1)调用Internet浏览器并在其地址栏输入Entrez网址(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/Entrez);(2)在Search后的选择栏中选择protein;(3)在输入栏输入homosapiensadiponectin;(
3、4)点击go后显示序列接受号及序列名称;(5)点击序列接受号NP_004788(adiponectinprecursor;adiposemostabundantgenetranscript1[Homosapiens])后显示序列信息;(6)将序列转为FASTA格式保存(参考上述步骤使用SRS信息查询系统检索人脂联素蛋白质序列);2、使用BioEdit软件对人脂联素蛋白质序列进行分子质量、氨基酸组成和疏水性等基本性质分析:打开BioEdit软件→将人脂联素蛋白质序列的FASTA格式序列输入分析框→点击左侧序列说
4、明框中的序列说明→点击sequence栏→选择protein→点击AminoAcidComposition→查看该蛋白质分子质量和氨基酸组成;或者选择protein后,点击Kyte&DoolittleMeanHydrophobicityProfile→查看该蛋白质分子疏水性水平;11113、人脂联素蛋白质序列的蛋白质同源性分析:(1)进入NCBI/Blast网页;(2)选择Protein-proteinBLAST(blastp);(3)将FASTA格式序列贴入输入栏;(4)点击BLAST;(5)查看与之同源的
5、蛋白质;11114、人脂联素蛋白质序列的motif结构分析:(1)expasy-tools(http://cn.expasy.org/tools/)中的链接进入,或直接输入网址(http://myhits.isb-sib.ch/cgi-bin/motif_scan)进入网页。(2)将人脂联素蛋白质序列的FASTA格式序列贴入输入栏;(3)在PrositeProfile前打钩,然后点击Search;(4)查看分析结果(注意PrositeProfile中的motifinformation);11115、人脂联素蛋
6、白质序列的二级结构预测:(1)可由expasy-tools(http://cn.expasy.org/tools/)中的链接进入,或直接输入网址(http://www.predictprotein.org/)进入;(2)进入predictprotein页面后,先register(注册);(3)然后将人脂联素蛋白质序列的FASTA格式序列贴入输入栏,submission(提交)所要分析的蛋白序列;(4)分析结果。11PHDpredictions结果:PROFpredictions结果6、人脂联素蛋白质序列的三维
7、结构预测:(1)进入http://www.expasy.org/swissmod/SWISS-MODEL.html(SwissModelFirstApproachMode)网页;(2)选择Automatedmode(自动模式);(3)进入Automatedmode界面后输入E-Mail地址和序列名称,将将人脂联素蛋白质序列的FASTA格式序列贴入输入栏,点击“submitmodelingrequest”后,等待结果。(4)下载蛋白PDB文件观看其三维结构图像。(注:需下载软件入rasmol查看三维图象)。11
8、112、总结进行上述分析所需注意的关键事项1、对人脂联素蛋白质序列进行两种分析即基于NCBI/Blast软件的蛋白质同源性分析和motif结构分析。2、二级结构预测可大致分为二类:一是有关根据单一序列预测二级结构;二是有关根据多序列列线预测二级结构。3、比对数据库中已知结构的序列是预测未知序列三级结构的主要方法。多种途径可进行以上这种比对。最容易是使用BLASTP程序比对NRL-3D或SCOP数据库
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