（课标版）高考生物一轮总复习生物技术实验第2讲微生物的培养与应用课件（选修1）

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1、考纲要求考纲分析(1)微生物的分离和培育(Ⅱ)(1)主要是无菌技术与培养基的种类及其应用(2)培养基对微生物的选择作用(Ⅱ)(2)主要是微生物的筛选、分离、纯化、鉴别技术营养物质营养基质水、碳源、氮源、无机盐pH氧气称量单个细胞平板划线法无菌尿素稀释涂布平板法配制培养基复合C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶纤维二糖透明圈纤维素纤维素选择培养基纤维素酶比较项目平板划线法稀释涂布平板法关键操作接种环在固体平板培养基表面连续划线①一系列的梯度稀释②涂布平板法操作注意事项每次划线先后均需灼烧接种环稀释度要足够高，为确

2、保实验成功可以增加稀释度的范围菌体获取在具有显著的菌落特征的区域菌落中挑取菌体从适宜的稀释度的平板上的菌落中挑取菌体优点可以根据菌落的特点获得某种微生物的单细胞菌落既可以获得单细胞菌落，又能对微生物计数缺点不能对微生物计数操作复杂，需要涂布多个平板比较项目间接计数法(稀释涂布平板法)直接计数法(显微计数法)原理当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的

3、样品中微生物的数量公式每克样品中的菌落数：(C÷V)×MC：某稀释度下平板上生长的平均菌落数；V：涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)；M：稀释倍数每毫升原液所含细菌数：每小格平均细菌数×400×10000×稀释倍数缺点当两个或多个菌体连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落不能区分细胞死活结果比实际值偏小比实际值偏大比较项目对照重复目的排除非测试因素对实验结果的影响排除偶然因素对实验结果的影响实例空白对照：确定培养基制作是否合格同一稀释度涂布至少3个平板条件结果常用方法应用范围消毒较为温和的物理或化学

4、方法仅杀死物体表面或内部的部分对人体有害的微生物煮沸消毒法日常用品巴氏消毒法不耐高温的液体化学药剂消毒法用酒精擦拭双手，用氯气消毒水源灭菌强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子灼烧灭菌法接种工具干热灭菌法玻璃器皿、金属工具高压蒸汽灭菌法培养基及容器的灭菌比较项目土壤中分解尿素的细菌的分离分解纤维素的微生物的分离方法利用以尿素为唯一氮源的选择培养基进行选择培养利用富含纤维素的选择培养基进行选择培养原理只有分解尿素的细菌能够合成脲酶，才能在以尿素为唯一氮源的培养基上生长因为培养基中含有丰富

5、的纤维素，因此能够分解纤维素的微生物具有更多的生存机会而大量繁殖鉴定在培养基中加入酚红指示剂，指示剂变红说明菌落中的菌体为分解尿素的细菌刚果红染色法，菌落周围出现不变红的透明圈的菌落为分解纤维素的微生物的菌落酵母膏无机盐淀粉纤维素粉琼脂CR溶液水培养基甲＋＋＋＋－＋＋培养基乙＋＋＋－＋＋＋