曲安奈德对缺氧损伤人视网膜色素上皮细胞表达vegf的影响-眼科学专业毕业论文

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1、曲安奈德对缺氧损伤人视网膜色素上皮细胞表达VEGF的影响中文摘要目的：研究缺氧损伤的人视网膜色素上皮(humanretinalpigmentepithelium，hRPE)细胞表达血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor，VEGF)的变化情况及曲安奈德(triamcinoloneacetonide，TA)对其表达的影响。方法：体外培养人视网膜色素上皮细胞株，建立hRPE细胞氯化钻化学缺氧模型。实验分为正常对照组、缺氧损伤组、TA处理组，其中TA处理组根据曲安奈德浓度不同(①O．05mg／ml，②0．1mg／ml，③O

2、．2mg／m1)分为三个亚组。采用比色法测定乳酸脱氢酶(LDH)释放率，采用免疫细胞化学方法、逆转录一聚合酶链反应法(RT—PCR)检测血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor，VEGF)的表达变化。结果：l、hRPE细胞(hRPE—D407细胞株)以长梭形或多边形为主，单层贴壁生长，胞核透亮，胞浆丰富，细胞边界清楚。2、细胞免疫化学技术结果显示VEGF在正常的人视网膜色素上皮细胞中有少量表达，缺氧损伤后其表达水平升高，与正常对照组比较差异有统计学意义(P<0．05)。3、TA处理组的三个亚组LDH释放率分别59．4

3、9-I-7．87，49．45_+6．83，40．34±3．92，VEGF蛋白灰度值分别为134．34±4．42，137．77+6．43，142．97+6．31，VEGFmRNA相对表达量分别为0．74±0．04，0．68+0．04，0．52±0．05，与缺氧损伤组LDH释放率(69．2±5．18)、VEGF蛋白灰度值(131．62±3．05)、VEGFmRNA相对表达量(0．85±0．04)比较差异均具有统计学意义(P<0．05)。结论：VEGF在缺氧损伤的人视网膜色素上皮细胞中表达增强；曲安奈德可以抑制VEGF的表达和降低LDH的释放率，对hRPE细胞的

4、缺氧损伤发挥一定保护作用。硕士研究生钱诚(眼科学)指导教师周占宇副教授关键词：视网膜色素上皮；缺氧损伤；血管内皮生长因子；曲安奈德EffectofTriamcinoloneacetonideOiltheexpressionofvascularendothelialgrowthfactorinhRPEcellsinducedbyhyoxicinjuriesAbstractObjectiveTheaimofthisstudywastoinvestigatetheeffectsofTriamcinoloneacetonide(TA)ontheexpression

5、ofvascularendothelialgrowthfactor(VEGF)inhypoxicinjuryhumanretinalpigmentepithelial(RPE)cells．MethodsHumanretinalpigmentepithelialcellswereculturedtoestablishthemodelofhypoxicinjuryhRPEinducedbycobaltchloride．TheculturedhRPEcellsweredividedinto3groups，includingcontrolgroup，simplei

6、njurygroup，treatmentgroupwhichWastreatedwithTAandWasdividedinto4sub-groupsaccordingtotheconcentrationof1’A(①o．05mg／ml，②0．1mg／ml，③0．2mg／m1)．ThereleasingrateofLDHintheculturedmediumweredetectedbychromatometryafterinjury，theexpressionofVEGFproteinWasassessedbyimmunocytochemistryassay

7、,andtheVEGFmRNAwasstudiedbyreversetranscriptasePCR．Results1．Thehumanretinalpigmentepitheliumcells(hRPE-D407cellline)presentedlongfusiformorpolygon—basedshape，monolayeradherencegrowing．ThenucleusWaslucency,largeandround．Theendochylemawasabundant．，andthecellboundaryWasclear．2．VEGFwa

8、sdetectedinnormalculturedRPEcells