糖基化终末产物对视网膜色素上皮细胞表达nf—κb及vegf的影响

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1、2010年3月第14卷第3·-——325。-_——文章编号：1007．4287(2010)03—0325一o4糖基化终末产物对视网膜色素上皮细胞表达NF—feB及VEGF的影响李佳，吴雅臻，刘辉，魏海峰(1．吉林大学第二医院眼科，吉林长春130041；2．吉林大学药学院实验病理与毒理教研室，吉林长春130021)摘要：目的研究糖基化终末产物(AGEs)对人视网膜色素上皮(RPE)细胞表达核因子kappaB(NF-tcB)及血管内皮生长因子(vEGF)的影响。方法体外培养人RPE细胞，分别加入浓度为50mg／L、100mg／L、200mg／L的AGEs，采用免疫细胞化学法检测ⅦG

2、F蛋白的表达，免疫荧光染色观察NF-xB活化情况，应用WestemBlot方法检测VEGF的蛋白水平。结果免疫细胞化学染色结果表明，对照组仅少量细胞有VEGF弱阳性表达，AGEs各浓度可见细胞浆黄色或棕黄色着染，随作用浓度的增加其表达逐渐增强。免疫荧光染色显示AGEs各浓度组可见NF．xBp65向细胞核内转移，但未见明显的浓度依赖性。WesternBlot检测显示VEGF蛋白在50mg／L、100mg／L、200mg／LAGEs组比空白组及对照组VEGF含量明显升高(P<0．05)，200mg·L组较其它组VEGF含量明显升高(P<0．01)。结论AGEs能促使人RPE细胞VE

3、GF表达上调，并可促进RPE细胞NF-tcB的活化。关键词：糖基化终末产物；核因子kappaB；年龄相关性黄斑变性中图分类号：R774．1文献标识码：AEfectsofadvancedglycationendproductsontheexpressionofVEGFandNF-r,BinculturedhumanRPEcells，』肋，WUYa—zhen，删Hui，eta1．(1．脚0ofophthalmology，SecondClinicalHospital，JilinUniversity，Changchun130041，Chi—M；2．LaboratoryofPathobi

4、ologyandToxicology，CoZlegeofPharmacy，JilinUniversity，Changchun130021，China)Abstract：ObjectiveTheaimofthisstudywastoinvestigatetheefectsofAGEsontheexpressionofnuclearfactorkappaB(NF-tcB)andvasoularendothelialgrowthfactor(VEGF)inhumanretinalpigmentepithelial(RPE)cells．MethodsHumanRPEcellslines

5、wasmaintainedinDMEMmediumcontaining10％fetalbovine9chin．Theexperimentgroupsarewiththediferentconcen—trationofAGEsas50mg／L，100mg／L，200mg／L，andthepropetionalconcentrationofBSAsasthecontrolgroups．TheexpressionoftheVEGFproteinisbyimmunocytochemicalmethodandwesternblot．TheactivationoftheNKBisdetec

6、tedbyimmunofluoresceneemethod．ResultsTheimmunocytochemicalmethodandwesternblotshowedthattheexpressionoftheVEGFproteintoincreasegrad—ually．(P<0．05)．ThemethodshowedthatNF-tcBp65greenfluorescenceincytoplasminblankgroupandthecontrolgroups．InAGEsgroupsthepositivegreenfluorescencenucleartransfer，b

7、utthenucleartransferdidnotdepandsonthedifer—entconcentrationofAGEs．ConclusionAGEsCanregulatetheexpressionofVEGFproteininhumanRPEcells；AGEscanpromotetheconclusionofNF_KB．Keywords：advancedglycationendproducts；nuclearfactorkappaB：agerelatedmaculardege